| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 1 绪论 | 第13-24页 |
| 1.1 莪术油 | 第13-15页 |
| 1.1.1 莪术油的简介 | 第13页 |
| 1.1.2 莪术油的提取及测定 | 第13-14页 |
| 1.1.3 莪术油的药理作用 | 第14页 |
| 1.1.4 临床应用研究 | 第14页 |
| 1.1.5 天然药物莪术研究的发展现状 | 第14-15页 |
| 1.2 胃癌 | 第15-17页 |
| 1.2.1 胃癌的概述 | 第15页 |
| 1.2.2 胃癌的分类 | 第15页 |
| 1.2.3 胃癌的病因 | 第15-16页 |
| 1.2.4 胃癌的症状 | 第16-17页 |
| 1.2.5 胃癌的治疗及研究进展 | 第17页 |
| 1.3 肺癌 | 第17-19页 |
| 1.3.1 肺癌的概述 | 第17-18页 |
| 1.3.2 肺癌的症状 | 第18页 |
| 1.3.3 研究进程与展望 | 第18-19页 |
| 1.4 细胞凋亡的研究进展 | 第19-21页 |
| 1.4.1 细胞凋亡的概念 | 第19页 |
| 1.4.2 细胞凋亡的形态学特征及生物学特征 | 第19-20页 |
| 1.4.3 引起细胞凋亡的过程 | 第20页 |
| 1.4.4 细胞凋亡的生物学意义 | 第20页 |
| 1.4.5 细胞凋亡与肿瘤的关系 | 第20-21页 |
| 1.4.6 细胞凋亡的检测 | 第21页 |
| 1.5 凋亡相关基因 bax 与 bcl-2 | 第21-23页 |
| 1.5.1 bcl-2 基因概述 | 第21-22页 |
| 1.5.2 bcl-2 调控机制 | 第22页 |
| 1.5.3 bcl-2 研究前景 | 第22页 |
| 1.5.4 bcl-2 和 bax 的作用机制 | 第22-23页 |
| 1.5.5 Bcl-2 和 Bax 与肿瘤的发生 | 第23页 |
| 1.6 本实验的研究内容及研究意义 | 第23-24页 |
| 2 材料与方法 | 第24-40页 |
| 2.1 实验仪器与材料 | 第24-27页 |
| 2.1.1 主要仪器 | 第24页 |
| 2.1.2 细胞株 | 第24-25页 |
| 2.1.3 主要药品及试剂盒 | 第25页 |
| 2.1.4 主要溶液配制 | 第25-27页 |
| 2.2 实验方法 | 第27-40页 |
| 2.2.1 细胞复苏 | 第27-28页 |
| 2.2.2 细胞培养 | 第28页 |
| 2.2.3 细胞收集 | 第28页 |
| 2.2.4 细胞传代 | 第28-29页 |
| 2.2.5 细胞冻存 | 第29页 |
| 2.2.6 细胞洗涤 | 第29页 |
| 2.2.7 细胞计数 | 第29页 |
| 2.2.8 细胞生长曲线的测定 | 第29-30页 |
| 2.2.9 台盼蓝拒染法测定莪术油对细胞增殖的抑制率(IC50)的测定 | 第30页 |
| 2.2.10 光学显微镜下观察细胞形态的变化 | 第30页 |
| 2.2.11 荧光显微镜下观察细胞形态的变化 | 第30页 |
| 2.2.12 透射电镜观察细胞形态的变化 | 第30-31页 |
| 2.2.13 琼脂糖凝胶电泳检测 DNA 片段化结果 | 第31-32页 |
| 2.2.14 Annexin V-FITC 凋亡检测 | 第32页 |
| 2.2.15 线粒体跨膜电位的检测 | 第32页 |
| 2.2.16 流式细胞术检测细胞周期的变化 | 第32-33页 |
| 2.2.17 Real Time RT-PCR 检测 bax/bcl-2 基因 mRNA 的表达情况 | 第33-35页 |
| 2.2.17.1 细胞 RNA 的提取 | 第33页 |
| 2.2.17.2 琼脂糖凝胶电泳检测 RNA 的提取情况 | 第33-34页 |
| 2.2.17.3 Real Time RT-PCR 检测凋亡相关基因 mRNA 的表达情况 | 第34-35页 |
| 2.2.18 胞质蛋白的抽提 | 第35-36页 |
| 2.2.18.1 收集细胞 | 第35页 |
| 2.2.18.2 预冷 Buffer A | 第35页 |
| 2.2.18.3 胞质蛋白提取 | 第35-36页 |
| 2.2.19 膜蛋白抽提 | 第36-37页 |
| 2.2.19.1 收集细胞 | 第36页 |
| 2.2.19.2 预冷 Buffer A | 第36页 |
| 2.2.19.3 膜蛋白的提取 | 第36-37页 |
| 2.2.20 蛋白质变性 | 第37页 |
| 2.2.21 SDS-PAGE 电泳 | 第37-38页 |
| 2.2.21.1 SDS-PAGE 凝胶电泳 | 第37-38页 |
| 2.2.21.2 考马斯亮蓝染色 | 第38页 |
| 2.2.22 转膜 | 第38-39页 |
| 2.2.23 Western 杂交 | 第39页 |
| 2.2.24 统计学处理 | 第39-40页 |
| 3 结果 | 第40-94页 |
| 3.1 细胞生长曲线 | 第40页 |
| 3.2 莪术油对细胞增殖的影响 | 第40-42页 |
| 3.2.1 莪术油对人胃癌 SGC-7901 细胞增殖的抑制曲线 | 第40-41页 |
| 3.2.2 莪术油对人肺癌 A549 细胞增殖的抑制曲线 | 第41-42页 |
| 3.3 莪术油作用 SGC-7901 和 A549 细胞的最佳浓度及半数抑制浓度 | 第42-43页 |
| 3.4 光学显微镜下细胞形态 | 第43-51页 |
| 3.4.1 光学显微镜下人胃癌 SGC-7901 细胞形态 | 第43-46页 |
| 3.4.2 光学显微镜下人肺癌 A549 细胞形态 | 第46-51页 |
| 3.5 荧光显微镜下细胞形态 | 第51-59页 |
| 3.5.1 荧光显微镜下人胃癌 SGC-7901 细胞的形态 | 第51-55页 |
| 3.5.2 荧光显微镜下人肺癌 A549 细胞的形态 | 第55-59页 |
| 3.6 透射电镜下细胞的形态结构 | 第59-67页 |
| 3.6.1 透射电镜下人胃癌 SGC-7901 细胞的形态结构 | 第59-64页 |
| 3.6.2 透射电镜下人肺癌 A549 细胞的形态结构 | 第64-67页 |
| 3.7 细胞 DNA 生化特征 | 第67-69页 |
| 3.7.1 人胃癌 SGC-7901 细胞 DNA 的片段化 | 第67-68页 |
| 3.7.2 人肺癌 A549 细胞 DNA 的片段化 | 第68-69页 |
| 3.8 Annexin V-FITC/PI 凋亡检测 | 第69-79页 |
| 3.8.1 人胃腺癌 SGC-7901 细胞 Annexin V-FITC/PI 的凋亡检测 | 第69-74页 |
| 3.8.2 人肺腺癌 A549 细胞 Annexin V-FITC/PI 的凋亡检测 | 第74-79页 |
| 3.9 线粒体跨膜电位检测 | 第79-82页 |
| 3.9.1 人胃腺癌 SGC-7901 细胞ΔΨm 的变化 | 第79-81页 |
| 3.9.2 人肺腺癌 A549 细胞ΔΨm 的变化 | 第81-82页 |
| 3.10 流式细胞术检测细胞周期的变化 | 第82-85页 |
| 3.11 Real Time RT-PCR 检测 bax/bcl-2 基因 mRNA 的表达情况 | 第85-90页 |
| 3.12 Western blot 检测 Bax、Bcl-2 蛋白表达水平 | 第90-94页 |
| 4 讨论 | 第94-98页 |
| 4.1 台盼蓝拒染法测定药物的半数抑制浓度（IC50） | 第94页 |
| 4.2 莪术油诱导细胞凋亡的形态学观察 | 第94-95页 |
| 4.3 莪术油对 SGC-7901 细胞和 A549 细胞凋亡的生化特征 | 第95页 |
| 4.4 流式细胞术检测细胞凋亡 | 第95-96页 |
| 4.4.1 Annexin V-FITC/PI 检测细胞凋亡 | 第95页 |
| 4.4.2 细胞线粒体膜电位变化 | 第95-96页 |
| 4.4.3 流式细胞术检测细胞周期的变化 | 第96页 |
| 4.5 Real Time RT-PCR 检测 bax/bcl-2 基因 mRNA 的表达情况 | 第96页 |
| 4.6 Western blot 检测 Bax、Bcl-2 蛋白表达水平 | 第96-98页 |
| 结论 | 第98-99页 |
| 参考文献 | 第99-103页 |
| 附录 A 附录内容名称 | 第103-104页 |
| 攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第104-105页 |
| 致谢 | 第105-106页 |
