摘要 | 第2-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
引言 | 第8-10页 |
第一章 转染与未转染HOXB4基因人脐带间充质干细胞滋养层的建立 | 第10-21页 |
1 实验材料 | 第10-12页 |
1.1 试剂 | 第10-11页 |
1.2 仪器 | 第11页 |
1.3 主要试剂的配制 | 第11-12页 |
2 方法 | 第12-17页 |
2.1 人脐带间充质干细胞的培养 | 第12-13页 |
2.2 丝裂霉素C处理人脐带间充质干细胞预实验 | 第13-14页 |
2.3 慢病毒转染HOXB4基因至人脐带间充质干细胞 | 第14页 |
2.4 RT-PCR检测转染后HOXB4基因mRNA表达情况 | 第14-16页 |
2.5 HUCMSC与HOXB4-HUCMSC滋养层的制备 | 第16-17页 |
2.6 统计学分析 | 第17页 |
3 结果 | 第17-20页 |
3.1 CCK-8法检测MMC对人脐带间充质干细胞的抑制作用 | 第17页 |
3.2 慢病毒感染人脐带间充质干细胞后HOXB4基因的表达情况 | 第17-18页 |
3.3 HOXB4基因mRNA表达的检测 | 第18-19页 |
3.4 HUCMSC与HOXB4-HUCMSC滋养层的制备 | 第19-20页 |
4 讨论 | 第20-21页 |
第二章 转染HOXB4基因的人脐带间充质干细胞对造血干细胞体外扩增的影响 | 第21-37页 |
1 实验材料 | 第21-22页 |
1.1 试剂 | 第21页 |
1.2 仪器 | 第21页 |
1.3 主要试剂的配制 | 第21-22页 |
2 方法 | 第22-26页 |
2.1 人脐血单个核细胞的分离 | 第23页 |
2.2 脐血CD34~+细胞的分选 | 第23-24页 |
2.3 分选前后细胞形态学观察及CD34表型分析 | 第24页 |
2.4 不同培养条件下脐血CD34~+细胞的体外培养 | 第24-25页 |
2.5 流式细胞仪分析各组扩增后CD34~+比例、根据有核细胞数计算CD34~+细胞数 | 第25页 |
2.6 细胞周期分析 | 第25-26页 |
2.7 甲基纤维素半固体培养基集落培养 | 第26页 |
2.8 统计学分析 | 第26页 |
3 结果 | 第26-35页 |
3.1 脐血的收集、CD34~+细胞的分离纯化产率 | 第26-27页 |
3.2 转染H0XB4基因肢血CD34+细胞的鉴定 | 第27-29页 |
3.3 体外培养有核细胞扩增情况 | 第29-31页 |
3.4 扩增过程中CD34~+细胞的比例变化 | 第31-32页 |
3.5 CD34~+细胞的扩增效率 | 第32页 |
3.6 扩增后细胞周期分析 | 第32-33页 |
3.7 扩增后脐血CD34细胞的集落形成能力 | 第33-35页 |
4 讨论 | 第35-36页 |
5 结论 | 第36-37页 |
参考文献 | 第37-40页 |
综述 HOXB4基因对造血调控作用的研究进展 | 第40-50页 |
参考文献 | 第46-50页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第50-51页 |
致谢 | 第51-52页 |