| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 英文缩写注解 | 第13-15页 |
| 第一章 靶向EBV-LMP1的脱氧核酶DZ1通过JNK/HIF-1信号通路抑制肿瘤血管生成 | 第15-37页 |
| 一、前言 | 第15-20页 |
| 二、材料与方法 | 第20-25页 |
| 1、实验材料 | 第20-22页 |
| 1.1 细胞系 | 第21页 |
| 1.2 主要抗体 | 第21页 |
| 1.3 主要试剂和试剂盒 | 第21页 |
| 1.4 靶向EBV-LMP1脱氧核酶DZ1与对照寡核苷酸CDN | 第21-22页 |
| 1.5 主要仪器 | 第22页 |
| 2、主要实验方法 | 第22-25页 |
| 2.1 细胞培养 | 第22-23页 |
| 2.2 微血管内皮细胞微管形成实验 | 第23页 |
| 2.3 LipofectamineTM 2000 transfection reagent瞬时转染 | 第23页 |
| 2.4 细胞总蛋白的抽提及蛋白质浓度的测定 | 第23页 |
| 2.5 Western Blotting分析 | 第23-24页 |
| 2.6 LipofectamineTM 2000 transfection reagent瞬间转染及DLR报告基因检测 | 第24页 |
| 2.7 组织病理学实验 | 第24-25页 |
| 2.8 统计学方法 | 第25页 |
| 三、实验结果 | 第25-36页 |
| 1、EBV-LMP1促进VEGF分泌增强肿瘤细胞血管形成能力,靶向EBV-LMP1的脱氧核酶DZ1通过下调VEGF分泌影响体外血管生成 | 第25-28页 |
| 2、CNE1-LMP1细胞中LMP1介导JNK磷酸化对HIF-1、VEGF的活化 | 第28-35页 |
| 2.1 二氯化钴抑制CNEl-LMP1细胞HIF-1a降解的条件 | 第28-29页 |
| 2.2 荧光素酶双报告基因确定影响HIF-1转录活性的信号通路 | 第29-30页 |
| 2.3 靶向EBV-LMPl的脱氧核酶DZ1抑制HIF-1转录活性 | 第30-31页 |
| 2.4 蛋白水平筛选LMP1影响HIF-1α、VEGF表达的信号通路 | 第31-32页 |
| 2.5 明确特异性靶向EBV-LMP1的脱氧核酶影响HIF-1和VEGF表达的信号通路 | 第32-35页 |
| 3、鼻咽癌病人样本中LMP1、p-JNK、HIF-1α、VEGF的表达 | 第35-36页 |
| 四、小结 | 第36-37页 |
| 第二章 靶向EBV-LMP1的脱氧核酶DZ1抑制肿瘤血管形成增强肿瘤的放射敏感性 | 第37-61页 |
| 一、前言 | 第37-39页 |
| 二、实验材料与方法 | 第39-44页 |
| 1、实验材料 | 第39-41页 |
| 1.1 细胞系 | 第39页 |
| 1.2 主要抗体 | 第39-40页 |
| 1.3 主要试剂和试剂盒 | 第40页 |
| 1.4 靶向EBV-LMP1脱氧核酶DZ1与对照寡核苷酸CDN | 第40页 |
| 1.5 主要仪器 | 第40-41页 |
| 2、主要实验方法 | 第41-44页 |
| 2.1 细胞培养 | 第41页 |
| 2.2 LipofectamineTM 2000 transfection reagent瞬时转染 | 第41页 |
| 2.3 平板克隆形成试验 | 第41-42页 |
| 2.4 细胞总蛋白的抽提及蛋白质浓度的测定 | 第42页 |
| 2.5 Western Blotting分析 | 第42页 |
| 2.6 荧光素酶报告基因检测 | 第42页 |
| 2.7 动物实验 | 第42-43页 |
| 2.8 MRI检查方法和DCE-MRI数据后处理 | 第43-44页 |
| 2.9 生物发光检测 | 第44页 |
| 2.10 组织病理学实验 | 第44页 |
| 2.11 统计学方法 | 第44页 |
| 三、实验结果 | 第44-59页 |
| 1、EBV-LMP1促进CNE1-LMP1细胞放疗抵抗,脱氧核酶DZ1抑制CNE1-LMP1细胞克隆形成能力,增强其放疗敏感性 | 第44-47页 |
| 2、脱氧核酶DZ1通过抑制肿瘤血管形成增强肿瘤的放射敏感性抑制裸鼠移植瘤的生长 | 第47-58页 |
| 2.1 CNE1-LMP1-Luc-DsRed2-E裸鼠移植瘤生长检测 | 第48-51页 |
| 2.2 活体内生物学发光检测实时监测脱氧核酶以及脱氧核酶与放疗联合应用对裸鼠移植瘤生长的影响 | 第51-53页 |
| 2.3 脱氧核酶DZ1对裸鼠移植瘤微血管渗透性及血管形成的作用 | 第53-58页 |
| 3、体内实验确定特异性靶向LMP1的脱氧核酶DZ1能够抑制VEGF的表达 | 第58-59页 |
| 四、小结 | 第59-61页 |
| 分析与讨论 | 第61-65页 |
| 总结论 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-73页 |
| 综述 | 第73-82页 |
| 参考文献 | 第79-82页 |
| 攻读学位期间的主要成果 | 第82-83页 |
| 致谢 | 第83页 |
