| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 1. 引言 | 第10-14页 |
| 1.1 土壤有效磷缺乏是限制大豆产量提高的重要因素 | 第10页 |
| 1.2 酸性磷酸酶促进了土壤有机磷分解及植株体内磷再利用 | 第10-11页 |
| 1.3 耐低磷转录因子提高了植物磷素利用效率 | 第11-12页 |
| 1.4 农杆菌介导子叶节与花粉管通道转化技术 | 第12页 |
| 1.5 无标记表达载体 pX6-GFP 及其应用 | 第12-13页 |
| 1.6 本研究的目的意义 | 第13-14页 |
| 2. 材料与方法 | 第14-25页 |
| 2.1 试验材料 | 第14页 |
| 2.1.1 供试大豆品种 | 第14页 |
| 2.1.2 生化试剂 | 第14页 |
| 2.1.3 载体和菌株 | 第14页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第14页 |
| 2.2 试验方法 | 第14-25页 |
| 2.2.1 PCR 引物 | 第14-15页 |
| 2.2.2 中间载体转化农杆菌 | 第15-17页 |
| 2.2.3 农杆菌介导大豆遗传转化 | 第17-18页 |
| 2.2.4 花粉管通道法转化大豆 | 第18-20页 |
| 2.2.5 转基因植株的检测 | 第20-23页 |
| 2.2.6 磷胁迫下转基因大豆根系分泌酸性磷酸酶活性检测 | 第23-24页 |
| 2.2.7 β-雌二醇诱导 PX6 载体去标记 | 第24页 |
| 2.2.8 数据分析 | 第24-25页 |
| 3. 结果与分析 | 第25-42页 |
| 3.1 农杆菌介导子叶节遗传转化影响因素分析 | 第25-28页 |
| 3.1.1 萌发时间和预培养时间对抗性芽诱导率的影响 | 第25-26页 |
| 3.1.2 不同农杆菌菌株种类对抗性芽诱导率的影响 | 第26页 |
| 3.1.3 菌液和侵染液浓度对抗性芽诱导率的影响 | 第26-27页 |
| 3.1.4 不同卡那霉素浓度对丛生芽诱导率和死亡率的影响 | 第27页 |
| 3.1.5 不同大豆基因型对抗性芽诱导率的影响 | 第27-28页 |
| 3.2 酸性磷酸酶 GmPAP4 转化与转基因材料创制 | 第28-35页 |
| 3.2.1 转 GmPAP4 超表达载体农杆菌菌株获得 | 第28页 |
| 3.2.2 农杆菌介导转化酸性磷酸酶 GmPAP4 与材料获得 | 第28-32页 |
| 3.2.3 花粉管通道技术转化 GmPAP4 与新材料获得 | 第32-34页 |
| 3.2.4 转 GmPAP4 新材料根系酸性磷酸酶活性分析 | 第34-35页 |
| 3.3 转录因子 AtPHR1 转化大豆与转基因材料创制 | 第35-40页 |
| 3.3.1 转 px6-AtPHR1 表达载体农杆菌菌株获得 | 第35页 |
| 3.3.2 农杆菌介导转化转录因子 AtPHR1 与新材料获得 | 第35-36页 |
| 3.3.3 花粉管通道技术转化 AtPHR1 与新材料获得 | 第36-39页 |
| 3.3.4 β-雌二醇诱导 PX6 载体去标记与无标记植株获得 | 第39-40页 |
| 3.4 GmPAP4 与 AtPHR1 共转化大豆与转基因材料创制 | 第40-42页 |
| 4. 讨论 | 第42-47页 |
| 4.1 转化体系优化是提高转化效率的重要环节 | 第42-43页 |
| 4.2 筛选适宜基因型是加快大豆遗传转化的关键 | 第43-44页 |
| 4.3 选择适宜转化方法可提高转化效率 | 第44页 |
| 4.4 无标记表达载体是转基因育种的发展方向 | 第44-45页 |
| 4.5 多个目的基因的共转化技术及其应用 | 第45-46页 |
| 4.6 后续工作 | 第46-47页 |
| 5. 结论 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-54页 |
| 在读期间发表的学术论文 | 第54-55页 |
| 作者简历 | 第55-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 附录 试验中所用培养基配方和载体图 | 第57-60页 |
