| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 前言 | 第10-14页 |
| 缩略词表 | 第14-18页 |
| 材料与方法 | 第18-40页 |
| 1 实验材料 | 第18-21页 |
| 1.1 仪器设备 | 第18-19页 |
| 1.2 耗材 | 第19-21页 |
| 1.3 其他 | 第21页 |
| 2 实验方法 | 第21-40页 |
| 2.1 细胞培养及处理 | 第21-23页 |
| 2.2 胰岛分离和培养 | 第23-25页 |
| 2.3 GSIS和KSIS功能实验及胰岛素含量抽提 | 第25页 |
| 2.4 细胞总蛋白质的提取及Western Blot检测 | 第25-27页 |
| 2.5 RNA提取和相对定量分析 | 第27-30页 |
| 2.6 质粒构建 | 第30-35页 |
| 2.7 双荧光素酶报告基因实验 | 第35-36页 |
| 2.8 WST-1实验 | 第36页 |
| 2.9 细胞增殖实验 | 第36-38页 |
| 2.10 流式细胞术 | 第38页 |
| 2.11 高脂喂养小鼠的模型建立及表型鉴定 | 第38-39页 |
| 2.12 统计学分析 | 第39-40页 |
| 结果 | 第40-69页 |
| 1、糖尿病状态下胰岛β细胞中miR-24表达增加 | 第40-43页 |
| 2、过表达miR-24导致胰岛β细胞的增殖抑制及功能障碍 | 第43-47页 |
| 3、miR-24介导的细胞增殖抑制依赖于Cdk4和Ccnd3蛋白水平的降低 | 第47-50页 |
| 4、芯片结果分析 | 第50-54页 |
| 5、鉴定miR-24的靶基因 | 第54-60页 |
| 6、miR-24通过下调Hnf1a和Neurod1的表达进而抑制胰岛β细胞的增殖与GSIS功能 | 第60-64页 |
| 7、抑制miR-24的表达能够部分恢复HFD小鼠胰岛的GSIS功能 | 第64-67页 |
| 8、氧化应激诱导miR-24的表达 | 第67-69页 |
| 讨论 | 第69-76页 |
| 小结 | 第76-78页 |
| 参考文献 | 第78-90页 |
| 文献综述 | 第90-111页 |
| 参考文献 | 第99-111页 |
| 附录 | 第111-151页 |
| 附录1 基因芯片显示至少1.5倍下调的基因 | 第111-132页 |
| 附录2 实时荧光定量PCR引物序列 | 第132-137页 |
| 附录3 克隆引物序列 | 第137-142页 |
| 附录4 溶液及培养基配方 | 第142-148页 |
| 附录5 克隆载体 | 第148-150页 |
| 附录6 抗体稀释度 | 第150-151页 |
| 攻读学位期间发表文章情况 | 第151-152页 |
| 致谢 | 第152页 |
