| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 1 绪论 | 第10-18页 |
| 1.1 机械应力在细胞内的信号转导途径 | 第10页 |
| 1.2 力在细胞内的物理传导机制 | 第10-14页 |
| 1.2.1 力在细胞内的传递途径 | 第11-13页 |
| 1.2.2 剪切应力和牵张力的应力物理传递异同 | 第13-14页 |
| 1.3 研究细胞内应力物理传导的方法 | 第14-17页 |
| 1.3.1 早期的研究方法 | 第14-15页 |
| 1.3.2 荧光共振能量转移技术 | 第15-17页 |
| 1.4 本文的研究目的 | 第17-18页 |
| 2 膜表面张力FRET荧光探针的设计与制备 | 第18-33页 |
| 2.1 FRET探针设计 | 第18-20页 |
| 2.1.1 原理 | 第18-19页 |
| 2.1.2 MSS设计以及KMSS对照设计 | 第19-20页 |
| 2.2 材料 | 第20-23页 |
| 2.2.1 引物 | 第20-21页 |
| 2.2.2 试剂 | 第21页 |
| 2.2.3 仪器 | 第21-22页 |
| 2.2.4 溶液 | 第22-23页 |
| 2.3 方法 | 第23-28页 |
| 2.3.1 PCR扩增 | 第24页 |
| 2.3.2 核酸纯化 | 第24-25页 |
| 2.3.2.1 琼脂糖凝胶电泳 | 第24-25页 |
| 2.3.2.2 凝胶回收提纯 | 第25页 |
| 2.3.3 限制性酶切 | 第25页 |
| 2.3.4 连接 | 第25-26页 |
| 2.3.5 质粒转导 | 第26页 |
| 2.3.6 质粒提取 | 第26-27页 |
| 2.3.7 细胞培养与转染 | 第27页 |
| 2.3.8 FRET显微拍照与图像分析 | 第27-28页 |
| 2.4 结果 | 第28-31页 |
| 2.4.1 测序结果 | 第28-29页 |
| 2.4.2 细胞转染荧光验证 | 第29-30页 |
| 2.4.3 质粒功能验证 | 第30-31页 |
| 2.5 讨论 | 第31-33页 |
| 3 剪切应力作用下的细胞膜表面的张力变化 | 第33-51页 |
| 3.1 材料和方法 | 第33-39页 |
| 3.1.1 试剂 | 第33页 |
| 3.1.2 仪器 | 第33-34页 |
| 3.1.3 细胞力学加载系统的构建 | 第34-36页 |
| 3.1.3.1 剪切应力加载装置 | 第34-35页 |
| 3.1.3.2 细胞应力加载 | 第35-36页 |
| 3.1.4 实验设计 | 第36-37页 |
| 3.1.4.1 实验分组 | 第36页 |
| 3.1.4.2 实验试剂配制 | 第36-37页 |
| 3.1.4.3 实验步骤 | 第37页 |
| 3.1.5 图像分析 | 第37-38页 |
| 3.1.6 数据处理与分析 | 第38-39页 |
| 3.2 结果 | 第39-48页 |
| 3.2.1 不同大小的剪切应力作用下细胞膜表面张力的变化 | 第39-42页 |
| 3.2.2 细胞膜流动性对剪切应力作用下细胞膜表面张力分布的影响 | 第42-45页 |
| 3.2.3 细胞骨架对剪切应力作用下细胞膜表面张力分布的影响 | 第45-48页 |
| 3.3 讨论 | 第48-51页 |
| 4 结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-58页 |
| 攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第58-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
