摘要 | 第4-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
前言 | 第12-15页 |
1 材料与试剂 | 第15-20页 |
1.1 主要材料 | 第15页 |
1.2 主要试剂 | 第15-16页 |
1.3 主要试剂配制 | 第16-18页 |
1.4 仪器与设备 | 第18-20页 |
2 实验方法 | 第20-33页 |
2.1 spink 8-shRNA片段的设计 | 第20-21页 |
2.2 重组质粒pGenesil-SPINK8的制备 | 第21-25页 |
2.3 细胞培养 | 第25-26页 |
2.4 EC9706细胞的转染及筛选 | 第26-27页 |
2.5 半定量RT-PCR检测mRNA的变化 | 第27-29页 |
2.6 Western Blotting分析食管癌EC9706细胞中蛋白的变化 | 第29-31页 |
2.7 MTT法测定细胞生长曲线 | 第31页 |
2.8 平板克隆形成实验 | 第31-32页 |
2.9 划痕实验 | 第32-33页 |
3 实验结果 | 第33-40页 |
3.1 目的基因的退火片段 | 第33页 |
3.2 pGenesil-SPINK8重组质粒的构建结果 | 第33-34页 |
3.3 重组质粒的测序结果 | 第34-35页 |
3.4 EC9706细胞转染重组质粒的结果 | 第35页 |
3.5 EC9706细胞中spink8 mRNA水平分析 | 第35-36页 |
3.6 EC9706细胞中SPINK8蛋白水平分析 | 第36-37页 |
3.7 MTT实验检测细胞的体外增殖能力 | 第37-38页 |
3.8 平板克隆形成实验检测细胞的克隆形成能力结果 | 第38页 |
3.9 划痕实验检测细胞的体外迁移能力 | 第38-40页 |
4 讨论 | 第40-46页 |
5 结论 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-53页 |
综述 | 第53-67页 |
参考文献 | 第60-67页 |
缩略词 | 第67-68页 |
致谢 | 第68-69页 |
个人简历 | 第69页 |