摘要 | 第4-5页 |
ABSTRACT | 第5-6页 |
前言 | 第9-12页 |
第1章 材料与方法 | 第12-20页 |
1.1 实验材料 | 第12-15页 |
1.1.1 实验对象与受试物 | 第12页 |
1.1.2 实验仪器 | 第12页 |
1.1.3 实验试剂 | 第12-13页 |
1.1.4 主要试剂的配制 | 第13-15页 |
1.2 实验方法 | 第15-20页 |
1.2.1 小鼠胚胎干细胞的培养与传代 | 第15页 |
1.2.2 mES细胞细胞毒性试验 | 第15页 |
1.2.3 3T3细胞细胞毒性试验 | 第15-16页 |
1.2.4 mES细胞神经分化实验 | 第16页 |
1.2.5 免疫荧光实验检测神经细胞特性标志物的表达 | 第16-17页 |
1.2.6 mES细胞神经分化抑制试验 | 第17页 |
1.2.7 实时荧光定量PCR检测特异性标志物的表达 | 第17-19页 |
1.2.8 质量控制 | 第19页 |
1.2.9 代入预测模型判定胚胎发育毒性分级 | 第19页 |
1.2.10 统计学分析 | 第19-20页 |
第2章 结果 | 第20-29页 |
2.1 胚胎干细胞细胞毒性IC50 ES的测定 | 第20页 |
2.2 鼠胚成纤维细胞 3T3细胞毒性IC503T3的测定 | 第20-21页 |
2.3 小鼠胚胎干细胞分化为神经细胞方法的建立及鉴定 | 第21-24页 |
2.3.1 神经分化诱导时mES细胞的接种密度 | 第21-22页 |
2.3.2 神经细胞培养液培养时间 | 第22-23页 |
2.3.3 细胞分化过程中的形态学改变 | 第23页 |
2.3.4 免疫荧光实验检测神经细胞特性标志物的表达 | 第23-24页 |
2.4 小鼠胚胎干细胞神经分化抑制ID50 ES的测定 | 第24-27页 |
2.4.1 BPA胚胎干细胞神经分化抑制实验 | 第24-25页 |
2.4.2 CdCl_2胚胎干细胞神经分化抑制实验 | 第25-26页 |
2.4.3 5-Fu胚胎干细胞神经分化抑制实验 | 第26-27页 |
2.4.4 Penicillin-G胚胎干细胞神经分化抑制实验 | 第27页 |
2.5 代入预测模型并判定毒性分级 | 第27-29页 |
第3章 讨论 | 第29-34页 |
3.1 胚胎干细胞诱导神经分化方法的探索 | 第29-31页 |
3.2 BPA的胚胎发育毒性的测定 | 第31-32页 |
3.3 CdCl_2的胚胎发育毒性的测定 | 第32-33页 |
3.4 结果与方法评价 | 第33-34页 |
第4章 结论与展望 | 第34-35页 |
参考文献 | 第35-40页 |
综述 | 第40-50页 |
参考文献 | 第46-50页 |
致谢 | 第50-51页 |
附录1 攻读硕士学位期间发表的文章 | 第51-52页 |
附录2 攻读硕士学位期间参加的科研项目 | 第52页 |