| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-9页 |
| 1 引言 | 第9-17页 |
| ·植物耐低温研究进展 | 第9-15页 |
| ·低温胁迫对植物细胞膜的影响 | 第9-11页 |
| ·低温胁迫对植物光合作用的影响 | 第11-12页 |
| ·低温胁迫对植物内源激素的影响 | 第12-13页 |
| ·低温胁迫对植物体内渗透调节物质的影响 | 第13-14页 |
| ·低温胁迫引起的下游信号转导 | 第14-15页 |
| ·抑制性差减杂交技术简介 | 第15-17页 |
| ·SSH 技术的原理 | 第15页 |
| ·SSH 技术的优缺点 | 第15-16页 |
| ·SSH 技术在植物上的研究进展 | 第16-17页 |
| ·SSH 在植物抗寒研究中的应用 | 第17页 |
| 2 研究目标、研究内容与技术路线 | 第17-18页 |
| ·研究意义 | 第17-18页 |
| ·研究目标 | 第18页 |
| ·本实验的研究方法 | 第18页 |
| 3 一种有效的柠条锦鸡儿总RNA 提取方法的建立 | 第18-25页 |
| ·实验材料 | 第18-19页 |
| ·植物材料 | 第18页 |
| ·试剂及耗材 | 第18页 |
| ·试剂配制 | 第18-19页 |
| ·RNA 的提取方法 | 第19页 |
| ·RNA 的质量检测 | 第19页 |
| ·电泳检测 | 第19页 |
| ·260／280 和260／230 比值 | 第19页 |
| ·RT-PCR 检测 | 第19页 |
| ·RNA 提取中去除多糖的研究 | 第19-21页 |
| ·低浓度乙醇去除多糖污染 | 第20页 |
| ·LiCl 过夜沉淀去除多糖污染 | 第20页 |
| ·高盐法去除多糖污染 | 第20页 |
| ·将低浓度乙醇和醋酸钾两种方法结合去除多糖污染 | 第20-21页 |
| ·结果分析 | 第21-25页 |
| ·RNA 电泳检测 | 第21页 |
| ·260／280 和260／230 比值 | 第21页 |
| ·RT-PCR 检测 | 第21-22页 |
| ·RNA 提取中多糖去除的摸索性研究结果及分析 | 第22-25页 |
| 4 柠条锦鸡儿低温胁迫抑制性差减杂交(SSH)文库的构建 | 第25-38页 |
| ·材料 | 第25-27页 |
| ·植物材料 | 第25页 |
| ·植物培养 | 第25-26页 |
| ·菌种及克隆载体 | 第26页 |
| ·试剂盒 | 第26页 |
| ·实验所用的引物和接头序列 | 第26-27页 |
| ·试剂 | 第27页 |
| ·采用QIAGEN MRNA MIDI KIT 分离MRNA | 第27-28页 |
| ·抑制性差减杂交法构建差减文库 | 第28-35页 |
| ·cDNA 第一链的合成 | 第28页 |
| ·cDNA 第二链合成 | 第28-29页 |
| ·RsaⅠ消化 | 第29-30页 |
| ·Adaptor 连接 | 第30-31页 |
| ·接头连接效率分析 | 第31页 |
| ·第一次杂交 | 第31-32页 |
| ·第二次杂交 | 第32-33页 |
| ·PCR 扩增 | 第33-35页 |
| ·差减文库的克隆 | 第35页 |
| ·结果与分析 | 第35-38页 |
| ·双链cDNA 的合成和Rsa I 酶切 | 第35-36页 |
| ·接头连接效率检测 | 第36-37页 |
| ·两轮PCR 扩增 | 第37-38页 |
| ·差减cDNA 片段的克隆和阳性克隆的PCR 鉴定 | 第38页 |
| 5 EST 生物信息学分析 | 第38-43页 |
| ·差减CDNA 文库测序 | 第38-39页 |
| ·分析 | 第39-43页 |
| ·渗透调节物质合成相关基因 | 第39页 |
| ·光合作用相关基因 | 第39-40页 |
| ·调节基因 | 第40-42页 |
| ·细胞抗氧化及活性氧清除相关基因 | 第42页 |
| ·其他 | 第42-43页 |
| 6 结论 | 第43-44页 |
| 致谢 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-51页 |
| 作者简介 | 第51页 |
