| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-9页 |
| 1 前言 | 第9-24页 |
| ·布鲁菌病的概述 | 第9页 |
| ·病原学 | 第9-12页 |
| ·布鲁菌的形态与特征 | 第9-10页 |
| ·布鲁菌生长及培养特性 | 第10页 |
| ·生物学特性 | 第10-12页 |
| ·布鲁菌致病性、致病机制及免疫性 | 第12-13页 |
| ·致病性 | 第12页 |
| ·致病机制 | 第12-13页 |
| ·免疫力原性 | 第13页 |
| ·流行病学及临床症状 | 第13-15页 |
| ·流行病学 | 第13-14页 |
| ·临床症状 | 第14-15页 |
| ·特异性布病实验室诊断 | 第15-16页 |
| ·病原学诊断 | 第15页 |
| ·血清学诊断 | 第15-16页 |
| ·治疗原则 | 第16页 |
| ·抗菌疗法 | 第16页 |
| ·特异性脱敏疗法 | 第16页 |
| ·中医中药疗法 | 第16页 |
| ·监测 | 第16-17页 |
| ·人间布鲁菌病的监测 | 第17页 |
| ·畜间布鲁菌病的监测 | 第17页 |
| ·防控措施 | 第17-18页 |
| ·控制传染源 | 第17-18页 |
| ·切断传播途径也是重要措施之一 | 第18页 |
| ·提高人群免疫力 | 第18页 |
| ·展望 | 第18页 |
| ·荧光定量PCR 方法的原理、方法、应用 | 第18-24页 |
| ·实时荧光PCR 原理 | 第19-20页 |
| ·荧光化学 | 第20-22页 |
| ·实时荧光定量 PCR 技术的应用 | 第22-23页 |
| ·实时荧光定量PCR 技术在布鲁菌快速检测中存在的问题及应用前景 | 第23-24页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第24页 |
| 2 材料与方法 | 第24-36页 |
| ·材料 | 第24-30页 |
| ·试验菌株 | 第24-29页 |
| ·主要实验仪器 | 第29页 |
| ·试验试剂 | 第29-30页 |
| ·方法 | 第30-36页 |
| ·实时荧光 PCR 引物和探针的设计及合成 | 第30-31页 |
| ·细菌、血清染色体DNA 的提取 | 第31页 |
| ·实时多重荧光PCR 体系的建立 | 第31页 |
| ·试验参数的优化 | 第31-32页 |
| ·BCSP31、ALKB 和BME11162 基因的单重荧光 PCR 反应条件建立 | 第32页 |
| ·BCSP31、ALKB 和BME11162 基因的实时多重荧光PCR 反应建立 | 第32页 |
| ·试验用阳性标准品的制备及标准曲线的制作 | 第32-35页 |
| ·特异性检测试验 | 第35页 |
| ·灵敏性检测试验 | 第35页 |
| ·多重实时荧光PCR 在临床样本中的应用 | 第35-36页 |
| 3 试验结果 | 第36-49页 |
| ·试验参数优化结果 | 第36-39页 |
| ·引物浓度优化结果 | 第36页 |
| ·探针浓度优化结果 | 第36-37页 |
| ·退火温度优化结果 | 第37-39页 |
| ·标准品的制备和标准曲线的制作结果 | 第39-42页 |
| ·荧光PCR 扩增结果 | 第39页 |
| ·阳性克隆的PCR 鉴定结果 | 第39页 |
| ·三个基因克隆的测序结果 | 第39-41页 |
| ·质粒拷贝数的计算结果 | 第41页 |
| ·标准曲线的制作结果 | 第41-42页 |
| ·特异性检测试验结果 | 第42-43页 |
| ·灵敏性检测试验结果 | 第43-45页 |
| ·单重实时荧光PCR 的灵敏性检测试验结果 | 第43-44页 |
| ·多重实时荧光PCR 的灵敏性检测试验结果 | 第44-45页 |
| ·实时多重荧光PCR 在临床样本中的应用 | 第45-49页 |
| 4 讨论 | 第49-52页 |
| 5 结论 | 第52-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-58页 |
| 作者简介 | 第58页 |
