| 摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-23页 |
| 1 PRV特征 | 第11-12页 |
| 2 PRV的主要糖蛋白及其相关功能 | 第12-15页 |
| 3 PRV主要酶类 | 第15-16页 |
| 4 PRV的生物学特性 | 第16-17页 |
| 4.1 流行病学特点 | 第16页 |
| 4.2 发病机制 | 第16-17页 |
| 4.3 临床症状及病理变化 | 第17页 |
| 5 诊断方法 | 第17-18页 |
| 6 天然免疫机制的研究 | 第18-21页 |
| 6.1 模式识别受体与天然免疫机制简介 | 第18-19页 |
| 6.2 诱导产生干扰素(IFNs)的核酸感受器 | 第19-20页 |
| 6.2.1 诱导产生干扰素(IFNs)的RNA感受器 | 第19页 |
| 6.2.2 诱导产生干扰素(IFNs)的DNA感受器 | 第19-20页 |
| 6.3 介导产生Ⅰ型干扰素(IFN-I)的核心信号通路 | 第20页 |
| 6.4 Ⅰ型干扰素(IFN-I)诱导的下游免疫调控机制 | 第20-21页 |
| 6.5 PRV与宿主天然免疫的研究 | 第21页 |
| 7 研究目的和意义 | 第21-23页 |
| 第二章 PRV NP株的分离鉴定 | 第23-33页 |
| 1 材料与方法 | 第23-29页 |
| 1.1 病料采集处理 | 第23页 |
| 1.2 主要试验试剂 | 第23-24页 |
| 1.3 主要试验仪器 | 第24页 |
| 1.4 试验动物及细胞 | 第24页 |
| 1.5 引物设计 | 第24-25页 |
| 1.6 伪狂犬病病毒NP株核酸提取及目的基因的PCR扩增 | 第25-27页 |
| 1.6.1 目的基因PCR扩增 | 第25-26页 |
| 1.6.2 PCR产物回收 | 第26-27页 |
| 1.7 细胞培养 | 第27页 |
| 1.7.1 细胞传代 | 第27页 |
| 1.7.2 细胞冻存 | 第27页 |
| 1.7.3 细胞复苏 | 第27页 |
| 1.8 病毒的分离 | 第27-28页 |
| 1.8.1 PRV NP株接种MDCK细胞 | 第27-28页 |
| 1.8.2 PRV NP株空斑纯化 | 第28页 |
| 1.8.3 PRV NP株TCID_(50)测定 | 第28页 |
| 1.9 PRV NP株感染小鼠试验 | 第28-29页 |
| 1.10 PRV NP株感染家兔试验 | 第29页 |
| 2 结果 | 第29-32页 |
| 2.1 病毒的分离结果 | 第29页 |
| 2.1.1 病毒gE基因的PCR检测结果 | 第29页 |
| 2.2 分离株特性的研究 | 第29-30页 |
| 2.2.1 病毒在MDCK细胞的增殖 | 第29-30页 |
| 2.2.2 病毒TCID_(50)的测定 | 第30页 |
| 2.3 动物感染试验 | 第30-32页 |
| 2.3.1 小鼠感染试验 | 第30-31页 |
| 2.3.2 家兔感染试验 | 第31-32页 |
| 3 讨论 | 第32-33页 |
| 第三章 PRV NP株gE,gI,TK基因的克隆及序列分析 | 第33-46页 |
| 1 材料与方法 | 第33-36页 |
| 1.1 材料 | 第33页 |
| 1.1.1 主要试验试剂 | 第33页 |
| 1.1.2 菌种、毒株和质粒 | 第33页 |
| 1.2 方法 | 第33-36页 |
| 1.2.1 引物设计 | 第33-34页 |
| 1.2.2 病毒基因组的提取、目的基因的扩增与克隆 | 第34-36页 |
| 1.2.3 目的基因的序列测定与分析 | 第36页 |
| 2 结果 | 第36-43页 |
| 2.1 病毒gE,gI,TK基因的PCR结果 | 第36-37页 |
| 2.2 重组质粒的酶切鉴定 | 第37页 |
| 2.3 基因序列的测定分析 | 第37页 |
| 2.4 同源性分析结果 | 第37-40页 |
| 2.4.1 不同毒株PRV gE,g,TK基因核苷酸及氨基酸同源性分析 | 第37-40页 |
| 2.5 遗传进化树分析 | 第40-41页 |
| 2.5.1 gE,gI,TK基因的遗传进化树分析 | 第40-41页 |
| 2.6 gE,gI,TK基因推导的氨基酸序列分析 | 第41-43页 |
| 2.6.1 gE基因推导的氨基酸序列分析 | 第41-42页 |
| 2.6.2 gI基因推导的氨基酸序列分析 | 第42-43页 |
| 2.6.3 TK基因推导的氨基酸序列分析 | 第43页 |
| 3 讨论 | 第43-46页 |
| 第四章 WT及IFNR~(-/-)小鼠对PRV Min-A株天然抵抗力的对比分析 | 第46-58页 |
| 1 材料与方法 | 第46-51页 |
| 1.1 试验材料 | 第46页 |
| 1.1.2 毒株、试验动物 | 第46页 |
| 1.1.3 试验试剂 | 第46页 |
| 1.1.4 试验仪器 | 第46页 |
| 1.2 试验方法 | 第46-51页 |
| 1.2.1 PRVMin-A株的扩增 | 第46-47页 |
| 1.2.2 PRV Min-A株TCID_(50)测定 | 第47页 |
| 1.2.3 小鼠细胞因子引物设计 | 第47页 |
| 1.2.4 C57BL/6小鼠试验 | 第47-51页 |
| 2 结果 | 第51-56页 |
| 2.1 PRV Min-A株TCID_(50)测定结果 | 第51页 |
| 2.2 野生型C57BL/6小鼠注射不同浓度的PRV Min-A株病毒液后发病死亡结果统计 | 第51-52页 |
| 2.3 临床症状对比结果 | 第52页 |
| 2.4 脑和肺组织石蜡切片HE染色结果 | 第52-55页 |
| 2.5 检测小鼠脑组织中PRV Min-A株gE的表达量 | 第55页 |
| 2.6 小鼠生存率结果 | 第55-56页 |
| 3 讨论 | 第56-58页 |
| 全文结论 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-67页 |
| 附录 | 第67-69页 |
| 英文缩略词表 | 第69-71页 |
| 致谢 | 第71页 |
