| 内容提要 | 第4-5页 |
| 中文摘要 | 第5-9页 |
| Abstract | 第9-13页 |
| 第1章 文献综述 | 第20-30页 |
| 1.1 肿瘤与辐射抗性 | 第20页 |
| 1.2 NRP1 | 第20-22页 |
| 1.2.1. NRP1的生物学特点 | 第20-21页 |
| 1.2.2 NRP1与肿瘤 | 第21页 |
| 1.2.3 NRP1与辐射抗性 | 第21-22页 |
| 1.3 HOX基因 | 第22-25页 |
| 1.3.1 HOX的生物学特点与功能 | 第22-23页 |
| 1.3.2 HOXs基因与MLL基因 | 第23-24页 |
| 1.3.3 HOXs基因与组蛋白修饰 | 第24-25页 |
| 1.3.4 mi RNAs、Lnc RNAs与HOXs基因 | 第25页 |
| 1.4 HOXS基因与肿瘤 | 第25-28页 |
| 1.4.1 HOXs基因与乳腺癌 | 第26页 |
| 1.4.2 HOXs基因与肺癌 | 第26-27页 |
| 1.4.3 HOXs基因与前列腺癌 | 第27页 |
| 1.4.4 HOXs基因与结直肠癌 | 第27-28页 |
| 1.4.5 HOXs基因与其他肿瘤 | 第28页 |
| 1.5 HOXS基因与电离辐射 | 第28页 |
| 1.6 立题依据 | 第28-30页 |
| 第2章 材料与方法 | 第30-48页 |
| 2.1 主要器材与仪器 | 第30-31页 |
| 2.1.1 实验器材 | 第30页 |
| 2.1.2 实验仪器 | 第30-31页 |
| 2.2 主要试剂 | 第31-33页 |
| 2.3 试剂的配制 | 第33-36页 |
| 2.3.1 细胞培养相关试剂的配制 | 第33-34页 |
| 2.3.2 细菌培养相关试剂的配制 | 第34页 |
| 2.3.3 Western blot实验相关试剂的配制 | 第34-35页 |
| 2.3.4 碱裂解法质粒提取相关试剂的配制 | 第35-36页 |
| 2.3.5 感受态制备相关试剂的配制 | 第36页 |
| 2.3.6 磷酸钙转染法相关试剂的配制 | 第36页 |
| 2.4 细胞培养 | 第36-39页 |
| 2.4.1 细胞株 | 第36页 |
| 2.4.2 稳定表达细胞模型的建立 | 第36-39页 |
| 2.4.3 瞬时转染细胞模型的建立 | 第39页 |
| 2.4.4 辐射抗性细胞模型的建立 | 第39页 |
| 2.5 临床肺癌患者组织标本 | 第39页 |
| 2.6 实验动物 | 第39-40页 |
| 2.7 照射条件 | 第40页 |
| 2.7.1 细胞照射 | 第40页 |
| 2.7.2 动物照射 | 第40页 |
| 2.8 转录水平检测 | 第40-42页 |
| 2.9 蛋白表达水平检测 | 第42-44页 |
| 2.10 细胞放射敏感性及细胞表型指标的检测 | 第44-45页 |
| 2.10.1 MTT实验 | 第44页 |
| 2.10.2 细胞周期检测 | 第44-45页 |
| 2.10.3 细胞凋亡率检测：Annexin V／PI双染法 | 第45页 |
| 2.11 免疫组化 | 第45-47页 |
| 2.11.1 DAB二步法 | 第45-46页 |
| 2.11.2 免疫荧光染色 | 第46-47页 |
| 2.12 统计学分析 | 第47-48页 |
| 第3章 实验结果 | 第48-64页 |
| 3.1 NRP1在肺癌细胞辐射抗性中的作用 | 第48-49页 |
| 3.1.1 辐射抗性细胞模型A549-RR的建立及鉴定 | 第48页 |
| 3.1.2 A549-RR细胞中NRP1的m RNA和蛋白水平变化 | 第48-49页 |
| 3.1.3 A549-NRP1low模型的建立及鉴定 | 第49页 |
| 3.2 筛选肺癌细胞辐射抗性中受NRP1调控的下游关键基因 | 第49-50页 |
| 3.2.1 用基因芯片筛选NRP1调控辐射抗性的下游基因- MLL5、HOXA6、HOXA9 | 第49-50页 |
| 3.2.2 基因表达谱芯片结果中NRP1调控辐射抗性的下游基因的验证 | 第50页 |
| 3.3 探讨NRP1与下游关键基因之间的调控关系 | 第50-52页 |
| 3.3.1 NRP1对MLL5、HOXA6、HOXA9的调控规律 | 第50-51页 |
| 3.3.2 MLL5、HOXA6和HOXA9基因干扰模型的建立 | 第51-52页 |
| 3.3.3 MLL5、HOXA6、HOXA9对NRP1的影响 | 第52页 |
| 3.4 电离辐射对NRP1、MLL5、HOXA6、HOXA9表达的影响 | 第52-54页 |
| 3.4.1 电离辐射对不同NRP1水平细胞的MLL5、HOXA6、HOXA9影响 | 第52-53页 |
| 3.4.2 电离辐射后NRP1、MLL5、HOXA6、HOXA9表达水平变化 | 第53-54页 |
| 3.4.3 辐射抗性产生过程中NRP1、MLL5、HOXA6和HOXA基因表达量的变化 | 第54页 |
| 3.5 NRP1及其调控的下游基因对A549细胞辐射效应的影响 | 第54-56页 |
| 3.5.1 电离辐射对si RNA干扰模型细胞增殖活性的影响 | 第54-55页 |
| 3.5.2 电离辐射对各种基因si RNA干扰模型细胞凋亡率的影响 | 第55-56页 |
| 3.5.3 电离辐射对各种基因si RNA干扰模型细胞周期进程的影响 | 第56页 |
| 3.6 整体水平验证NRP1与MLL5、HOXA6、HOXA9在临床NSCLC中的相关性 | 第56-61页 |
| 3.6.1 NRP1及下游关键基因表达水平与NSCLC临床病理分型的相关性 | 第56-59页 |
| 3.6.2 NSCLC组织标本中NRP1与MLL5-HOXA6、HOXA9相关性 | 第59-61页 |
| 3.6.3 NSCLC组织标本中血管生成相关因子的表达水平 | 第61页 |
| 3.7 荷瘤裸鼠模型中辐射对NRP1-MLL5-HOXA6/HOXA9通路的影响 | 第61-64页 |
| 3.7.1 裸鼠荷瘤模型的建立 | 第61-62页 |
| 3.7.2 移植瘤中辐射对NRP1-MLL5-HOXA6/HOXA9通路的影响 | 第62-63页 |
| 3.7.3 移植瘤中辐射对血管生成相关因子表达水平的影响 | 第63-64页 |
| 第4章 讨论 | 第64-69页 |
| 4.1 筛选肺癌细胞辐射抗性中受NRP1调控的下游关键基因 | 第64-65页 |
| 4.2 电离辐射对NRP1和下游关键基因的调控关系 | 第65-66页 |
| 4.3 NRP1及其调控的下游基因对A549细胞辐射效应的影响 | 第66-67页 |
| 4.4 整体水平验证NRP1-MLL5-HOXA6/HOXA9与NSCLC的关系 | 第67-68页 |
| 4.5 荷瘤裸鼠模型中辐射对NRP1-MLL5-HOXA6/HOXA9通路的影响 | 第68-69页 |
| 第5章 结论 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-76页 |
| 作者简介 | 第76-78页 |
| 致谢 | 第78页 |
