中文摘要 | 第7-9页 |
ABSTRACT | 第9-10页 |
缩略语表 | 第11-12页 |
1 文献综述 | 第12-18页 |
1.1 土壤中磷的分布与利用现状 | 第12-13页 |
1.2 植物的磷营养及其生理功能 | 第13-14页 |
1.3 植物适应低磷胁迫的机制 | 第14-15页 |
1.4 AP2/ERF基因家族的研究 | 第15-16页 |
1.5 CRF基因家族的研究 | 第16-18页 |
2 研究的目的、意义和内容 | 第18-20页 |
2.1 研究意义 | 第18页 |
2.2 研究目的 | 第18-19页 |
2.3 研究内容 | 第19-20页 |
2.4 技术路线 | 第20页 |
3 基因家族的生物信息学分析 | 第20-43页 |
3.1 材料与方法 | 第20-22页 |
3.1.1 甘蓝型油菜CRF家族基因的查找及染色体定位 | 第20页 |
3.1.2 甘蓝型油菜BnaCRFs蛋白的进化及保守结构域分析 | 第20-21页 |
3.1.3 甘蓝型油菜BnaCRFs蛋白的理化性质分析 | 第21页 |
3.1.4 甘蓝型油菜BnaCRFs蛋白的结构预测 | 第21页 |
3.1.5 甘蓝型油菜BnaCRFs蛋白的亚细胞定位预测 | 第21-22页 |
3.1.6 甘蓝型油菜BnaCRFs蛋白的翻译后修饰及跨膜结构预测 | 第22页 |
3.1.7 甘蓝型油菜BnaCRFs蛋白的功能预测及无序蛋白预测 | 第22页 |
3.2 结果与分析 | 第22-42页 |
3.2.1 甘蓝型油菜BnaCRFs家族基因的基本特征及染色体定位 | 第22-24页 |
3.2.2 甘蓝型油菜BnaCRF蛋白序列的进化及保守结构域 | 第24-29页 |
3.2.3 甘蓝型油菜BnaCRFs蛋白的理化性质 | 第29-31页 |
3.2.4 甘蓝型油菜BnaCRFs蛋白的结构预测 | 第31-34页 |
3.2.5 甘蓝型油菜BnaCRFs蛋白的亚细胞定位预测 | 第34-36页 |
3.2.6 甘蓝型油菜BnaCRFs蛋白的翻译后修饰及跨膜结构预测 | 第36-38页 |
3.2.7 甘蓝型油菜BnaCRFs蛋白的功能预测及无序蛋白预测 | 第38-42页 |
3.3 讨论 | 第42-43页 |
4 甘蓝型油菜BnaCRF8s基因的全长分离及序列分析 | 第43-48页 |
4.1 材料与方法 | 第43-45页 |
4.1.1 转录组数据中BnaCRFs家族成员的基因表达分析 | 第43页 |
4.1.2 引物设计以及目的基因扩增 | 第43-44页 |
4.1.3 目标基因的分离克隆 | 第44-45页 |
4.2 结果与分析 | 第45-48页 |
4.2.1 甘蓝型油菜BnaCRFs家族成员的表达谱 | 第45-46页 |
4.2.2 BnaCRF8s基因序列的同源性分析 | 第46-47页 |
4.2.3 BnaCRF8s的进化分析 | 第47-48页 |
4.3 讨论 | 第48页 |
5.基因的表达模式分析 | 第48-56页 |
5.1 材料与方法 | 第48-51页 |
5.1.1 实验材料 | 第48页 |
5.1.2 实验方法 | 第48-49页 |
5.1.3 植株RNA的提取及逆转录 | 第49-50页 |
5.1.4 半定量RT-PCR检测BnaCRFs基因的表达 | 第50页 |
5.1.5 定量RT-PCR检测BnaCRFs基因的表达 | 第50-51页 |
5.2 结果与分析 | 第51-55页 |
5.2.1 甘蓝型油菜苗期BnaCRF8s基因的表达 | 第51页 |
5.2.2 甘蓝型油菜苗期BnaCRF8s基因在外源添加ACC时的表达 | 第51-53页 |
5.2.3 甘蓝型油菜苗期BnaCRF8s的表达模式分析 | 第53-54页 |
5.2.4 BnaCRF8s基因在油菜成熟期不同组织器官中的表达 | 第54-55页 |
5.3 讨论 | 第55-56页 |
6 BnaCRF8s基因的亚细胞定位 | 第56-61页 |
6.1 材料与方法 | 第56-60页 |
6.1.1 实验材料 | 第56页 |
6.1.2 亚细胞定位载体的构建 | 第56-58页 |
6.1.3 冻融法转化农杆菌 | 第58-59页 |
6.1.4 外源蛋白在烟草叶片瞬时表达 | 第59-60页 |
6.2 结果与分析 | 第60页 |
6.3 讨论 | 第60-61页 |
7 BnaCRF8s基因的转基因功能研究 | 第61-69页 |
7.1 材料与方法 | 第61-63页 |
7.1.1 实验材料 | 第61页 |
7.1.2 BnaCRF8s载体的构建 | 第61-62页 |
7.1.3 拟南芥转化 | 第62页 |
7.1.4 转基因阳性植株的筛选及PCR鉴定 | 第62页 |
7.1.5 琼脂(Agar)培养实验 | 第62-63页 |
7.2 结果与分析 | 第63-68页 |
7.2.1 转基因阳性植株的筛选和PCR鉴定 | 第63页 |
7.2.2 转基因材料的表型分析 | 第63-68页 |
7.3 讨论 | 第68-69页 |
8 总结与展望 | 第69-70页 |
8.1 总结 | 第69页 |
8.2 展望 | 第69-70页 |
参考文献 | 第70-79页 |
致谢 | 第79页 |