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TGF-β1信号通路调节睾丸间质细胞分泌雌激素的机制

缩略语表第6-8页
中文摘要第8-11页
ABSTRACT第11-14页
前言第15-17页
文献回顾第17-32页
实验一 TGF-β1 信号通路对睾丸间质细胞CYP19基因相关转录因子表达的影响第32-53页
    1 材料第32-37页
        1.1 实验动物第32-33页
        1.2 实验细胞第33页
        1.3 实验主要试剂第33-35页
        1.4 实验主要自配缓冲液和试剂第35-36页
        1.5 实验主要仪器第36-37页
    2 方法第37-45页
        2.1 原代大鼠睾丸间质细胞的分离纯化第37-39页
        2.2 细胞处理第39页
        2.3 动物处理第39-40页
        2.4 组织固定、包埋、切片第40页
        2.5 蛋白提取及定量第40-42页
        2.6 Western Blot第42-43页
        2.7 免疫荧光细胞染色第43页
        2.8 免疫荧光组织化学双标染色第43-44页
        2.9 睾丸间质液雌二醇含量检测第44页
        2.10 统计学分析第44-45页
    3 结果第45-51页
        3.1 TGF-β1 对大鼠睾丸间质细胞Cyp19基因转录因子表达的影响第45-48页
        3.2 TGF-β1 受体ALK5在调控SF-1 和LRH-1 表达中的作用第48-51页
        3.3 Smad2在TGF-β1 作用下明显激活第51页
    4 讨论第51-53页
实验二 TGF-β1 信号通路对CYP19基因启动子转录活性的影响第53-61页
    1 材料第53-55页
        1.1 实验细胞第53页
        1.2 实验主要试剂第53-54页
        1.3 实验所用质粒(西安东澳生物协助构建)第54页
        1.4 实验主要自配缓冲液和试剂第54页
        1.5 实验主要仪器第54-55页
    2 方法第55-58页
        2.1 质粒提取第55-56页
        2.2 细胞转染第56-57页
        2.3 双荧光素酶报告基因实验第57-58页
        2.4 统计学分析第58页
    3 结果第58-59页
        3.1 TGF-β1 对SF-1/LRH-1 诱导下Cyp19基因启动子转录活性的影响第58页
        3.2 Smad2对SF-1/LRH-1 诱导下Cyp19基因启动子转录活性的影响第58-59页
    4 讨论第59-61页
实验三 MIRNA参与TGF-β1 对CYP19基因和SF-1/LRH-1 表达的调节第61-72页
    1 材料第61-63页
        1.1 实验细胞及处理第61页
        1.2 实验主要试剂第61-62页
        1.3 实验所用引物第62页
        1.4 实验主要仪器第62-63页
    2 方法第63-66页
        2.1 总RNA提取第63页
        2.2 miRNA表达谱测序分析第63-64页
        2.3 miRNA逆转录第64-65页
        2.4 Quantitative reverse transcription PCR (qRT-PCR)第65页
        2.5 统计学分析第65-66页
    3 结果第66-69页
        3.1 R2C细胞小RNA序列分析第66-67页
        3.2 TGF-β1 作用下表达差异显著的miRNA及其靶基因功能分析第67-68页
        3.3 以SF-1 或LRH-1 为靶基因的miRNA的表达变化第68-69页
    4 讨论第69-72页
小结第72-73页
参考文献第73-84页
个人简历和研究成果第84-86页
致谢第86页

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