缩略语表 | 第5-7页 |
中文摘要 | 第7-10页 |
ABSTRACT | 第10-12页 |
前言 | 第13-15页 |
文献回顾 | 第15-22页 |
第一部分 抑制SPHK1可减轻急性心肌梗死小鼠的心肌损伤 | 第22-42页 |
引言 | 第22页 |
1 材料 | 第22-25页 |
1.1 实验动物 | 第22页 |
1.2 主要试剂 | 第22-24页 |
1.3 主要仪器 | 第24页 |
1.4 常用液体配制 | 第24-25页 |
2 方法 | 第25-34页 |
2.1 小鼠皮下植入胶囊渗透压泵 | 第25-26页 |
2.2 小鼠心肌梗死模型制备 | 第26页 |
2.3 动物分组 | 第26页 |
2.4 标本取材与处理 | 第26-27页 |
2.5 心肌组织HE染色 | 第27页 |
2.6 心肌组织Masson染色 | 第27-28页 |
2.7 心肌组织免疫组化染色 | 第28页 |
2.8 酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清肌钙蛋白(cTnT)水平 | 第28-29页 |
2.9 蛋白免疫印迹(Western Blot)实验 | 第29-31页 |
2.10 实时荧光定量PCR | 第31-33页 |
2.11 统计学分析 | 第33-34页 |
3 结果 | 第34-39页 |
3.1 心梗后小鼠心肌组织SPHK1 /p-SPHK1蛋白表达上调 | 第34页 |
3.2 SK1-I干预对小鼠心梗后心肌损伤的影响 | 第34-36页 |
3.3 抑制SPHK1对急性心肌梗死后心脏组织中巨噬细胞浸润及炎症因子表达的影响 | 第36-37页 |
3.4 Masson染色观察心肌梗死后小鼠心肌纤维化程度 | 第37-39页 |
4 讨论 | 第39-42页 |
第二部分 SPHK1影响巨噬细胞的迁移和炎症应答 | 第42-55页 |
引言 | 第42页 |
1 材料 | 第42-44页 |
1.1 细胞系 | 第42页 |
1.2 主要试剂 | 第42-43页 |
1.3 主要仪器 | 第43页 |
1.4 主要试剂配制 | 第43-44页 |
2 方法 | 第44-47页 |
2.1 细胞培养 | 第44-45页 |
2.2 细胞药物处理 | 第45页 |
2.3 Transwell小室检测Ana-1 细胞迁移 | 第45页 |
2.4 ELISA检测细胞培养液中炎症因子(TNF-α、IL-1β、IL-6)的含量 | 第45-46页 |
2.5 实时荧光定量PCR | 第46页 |
2.6 蛋白质免疫印记实验 | 第46页 |
2.7 统计学分析 | 第46-47页 |
3 结果 | 第47-53页 |
3.1 LPS诱导Ana-1 巨噬细胞高表达SPHK1/p-SPHK1、S1P3以及AKT/p-AKT | 第47-48页 |
3.2 抑制 SPHK1 及 S1P3 后对 LPS 诱导的 Ana-1 巨噬细胞迁移的影响 | 第48-50页 |
3.3 抑制SPHK1及S1P3对LPS诱导的Ana-1 巨噬细胞表达炎症因子水平的影响 | 第50-52页 |
3.4 抑制S1P3可下调LPS诱导的巨噬细胞AKT/p-AKT蛋白表达 | 第52-53页 |
4 讨论 | 第53-55页 |
小结 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-66页 |
个人简历和研究成果 | 第66-67页 |
致谢 | 第67-68页 |