摘要 | 第6-7页 |
abstract | 第7-8页 |
第一章 引言 | 第13-19页 |
1.1 多头带绦虫及脑多头蚴病概述 | 第13-14页 |
1.2 寄生性蠕虫转录组研究进展 | 第14-17页 |
1.2.1 转录组概述 | 第14页 |
1.2.2 转录组研究方法 | 第14-15页 |
1.2.3 寄生性蠕虫转录组研究现状 | 第15-17页 |
1.3 寄生虫蛋白激酶A | 第17-18页 |
1.4 研究的目的与意义 | 第18-19页 |
第二章 多头带绦虫不同发育时期差异转录组学分析 | 第19-39页 |
2.1 材料 | 第19-20页 |
2.1.1 主要试剂 | 第19页 |
2.1.2 样品的准备 | 第19-20页 |
2.2 方法 | 第20-24页 |
2.2.1 虫体Total RNA提取 | 第20-21页 |
2.2.2 转录组cDNA文库的构建和上机测序 | 第21-22页 |
2.2.3 转录组原始数据处理 | 第22页 |
2.2.4 转录组序列比对到参考基因组 | 第22页 |
2.2.5 基因表达水平分析 | 第22-23页 |
2.2.6 差异表达基因的筛选及功能注释 | 第23页 |
2.2.7 差异表达基因的qRT-PCR验证 | 第23-24页 |
2.3 结果 | 第24-36页 |
2.3.1 总RNA提取 | 第24-25页 |
2.3.2 RNA-Seq原始测序数据质量评估及过滤 | 第25页 |
2.3.3 转录组数据比对到参考基因组 | 第25-26页 |
2.3.4 基因表达水平分析 | 第26页 |
2.3.5 差异表达基因及其功能注释 | 第26-34页 |
2.3.6 差异表达基因的qRT-PCR验证 | 第34-36页 |
2.4 讨论 | 第36-39页 |
第三章 多头带绦虫TmPKA-C基因的克隆及序列分析 | 第39-51页 |
3.1 材料与方法 | 第39-41页 |
3.1.1 虫株、质粒和菌株 | 第39页 |
3.1.2 主要试剂 | 第39页 |
3.1.3 TmPKA-C基因的克隆 | 第39-40页 |
3.1.4 TmPKA-C基因序列分析 | 第40页 |
3.1.5 TmPKA-C的生物信息学分析 | 第40-41页 |
3.2 结果 | 第41-49页 |
3.2.1 4 个TmPKA-C基因的克隆 | 第41-42页 |
3.2.2 4 个TmPKA-C基因的ORF序列分析 | 第42-45页 |
3.2.3 4 个TmPKA-C蛋白序列的生物信息学分析 | 第45-49页 |
3.3 讨论 | 第49-51页 |
第四章 TmPKA-C的原核表达及反应原性鉴定 | 第51-59页 |
4.1 材料与方法 | 第51-52页 |
4.1.1 质粒、菌株和血清 | 第51页 |
4.1.2 主要试剂 | 第51页 |
4.1.3 重组表达载体的构建 | 第51页 |
4.1.4 重组蛋白的表达 | 第51-52页 |
4.1.5 重组蛋白的纯化 | 第52页 |
4.1.6 重组蛋白的反应原性鉴定 | 第52页 |
4.2 结果 | 第52-57页 |
4.2.1 重组表达质粒的构建 | 第52-53页 |
4.2.2 重组蛋白的诱导表达及表达形式鉴定 | 第53-55页 |
4.2.3 重组蛋白的纯化 | 第55页 |
4.2.4 重组蛋白的反应原性鉴定 | 第55-57页 |
4.3 讨论 | 第57-59页 |
第五章 全文结论 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-67页 |
附录 | 第67-158页 |
致谢 | 第158-159页 |
作者简历 | 第159页 |