| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 第一章 绪论 | 第10-24页 |
| 1.1 淀粉酶概述 | 第10-13页 |
| 1.1.1 淀粉酶分类 | 第10页 |
| 1.1.2 淀粉酶的工业应用 | 第10-13页 |
| 1.1.2.1 在淀粉工业中的应用 | 第11页 |
| 1.1.2.2 在造纸中的应用 | 第11-12页 |
| 1.1.2.3 在纺织退浆中的应用 | 第12页 |
| 1.1.2.4 在酒精工业中的应用 | 第12页 |
| 1.2.2.5 在啤酒酿造中的应用 | 第12-13页 |
| 1.2.2.6 在清洁剂中的应用 | 第13页 |
| 1.2 酸性α-淀粉酶概述 | 第13-21页 |
| 1.2.1 酸性α-淀粉酶的来源 | 第14-15页 |
| 1.2.2 酸性α-淀粉酶的作用机制 | 第15-17页 |
| 1.2.3 酸性淀粉酶的酶学性质特点 | 第17-21页 |
| 1.2.3.1 酸性α-淀粉酶的耐酸性 | 第18-19页 |
| 1.2.3.2 酸性α-淀粉酶的耐热性 | 第19-21页 |
| 1.3 耐酸性高温α-淀粉酶生产菌株育种 | 第21-22页 |
| 1.3.1 直接从自然界筛选 | 第21页 |
| 1.3.2 基因突变与诱变育种 | 第21页 |
| 1.3.3 遗传重组育种 | 第21-22页 |
| 1.3.4 基因工程与定向育种 | 第22页 |
| 1.4 选题的背景和意义 | 第22-24页 |
| 第二章 耐热酸性α-淀粉酶产生菌筛选 | 第24-36页 |
| 2.1 材料与方法 | 第24-27页 |
| 2.1.1 土样 | 第24页 |
| 2.1.2 培养基 | 第24-25页 |
| 2.1.3 筛选方法 | 第25页 |
| 2.1.3.1 平板快速初步筛选步骤 | 第25页 |
| 2.1.3.2 摇瓶复筛步骤 | 第25页 |
| 2.1.4 酶活检测方法 | 第25-26页 |
| 2.1.5 菌种鉴定 | 第26-27页 |
| 2.1.5.1 形态观察和生理生化实验 | 第26页 |
| 2.1.5.2 16S rDNA的分子生物学鉴定 | 第26-27页 |
| 2.2 结果和讨论 | 第27-35页 |
| 2.2.1 平板初步筛选结果 | 第27-29页 |
| 2.2.2 摇瓶复筛的结果 | 第29-32页 |
| 2.2.2.1 淀粉标准曲线测定 | 第29-30页 |
| 2.2.2.2 摇瓶复筛的结果 | 第30-32页 |
| 2.2.3 酸性淀粉酶高产菌株SF-8菌种鉴定 | 第32-35页 |
| 2.2.3.1 菌体形态观测 | 第32页 |
| 2.2.3.2 SF-8菌16s rDNA鉴定 | 第32-35页 |
| 2.3 小结 | 第35-36页 |
| 第三章 产酶发酵条件优化及酸性α-淀粉酶酶学特性研究 | 第36-50页 |
| 3.1 材料与方法 | 第36-40页 |
| 3.1.1 菌株 | 第36页 |
| 3.1.2 发酵条件对酶产量的影响 | 第36-37页 |
| 3.1.2.1 碳氮源浓度对酶产量的影响 | 第36页 |
| 3.1.2.2 接种量对酶产量的影响 | 第36-37页 |
| 3.1.2.3 发酵时间对酶量的影响 | 第37页 |
| 3.1.3 粗酶的分离纯化 | 第37页 |
| 3.1.4 酶的相关特性研究 | 第37-40页 |
| 3.1.4.1 酶活测定及酶活定义 | 第37页 |
| 3.1.4.2 酶反应的最适pH和最适温度测定 | 第37-38页 |
| 3.1.4.3 金属离子对酶活性的影响 | 第38页 |
| 3.1.4.4 酶的稳定性和热稳定性测定 | 第38页 |
| 3.1.4.5 酶分子量测定 | 第38-40页 |
| 3.1.4.6 酶促反应产物薄层分析 | 第40页 |
| 3.2 结果与讨论 | 第40-49页 |
| 3.2.1 发酵条件对酶产量的影响 | 第40-43页 |
| 3.2.1.1 碳氮源浓度对酶产量的影响 | 第40-42页 |
| 3.2.1.2 接种量对酶产量的影响 | 第42页 |
| 3.2.1.3 发酵时间对淀粉酶产量的影响 | 第42-43页 |
| 3.2.2 粗酶的分离纯化 | 第43-44页 |
| 3.2.3 酶特性研究 | 第44-49页 |
| 3.2.3.1 酶反应的最适pH | 第44-45页 |
| 3.2.3.2 酶反应的最适温度 | 第45-46页 |
| 3.2.3.3 金属离子对酶活性的影响 | 第46页 |
| 3.2.3.4 酶的稳定性和热稳定性测定 | 第46-48页 |
| 3.2.3.5 酶分子量的测定 | 第48页 |
| 3.2.3.6 酶促反应产物薄层分析结果 | 第48-49页 |
| 3.3 小结 | 第49-50页 |
| 第四章 酸性α-淀粉酶高产菌株SF-8基因组文库构建 | 第50-55页 |
| 4.1 材料和方法 | 第50-53页 |
| 4.1.1 菌株 | 第50页 |
| 4.1.2 主要药品和试剂 | 第50页 |
| 4.1.3 方法 | 第50-53页 |
| 4.1.3.1 酸性α-淀粉酶高产菌株培养 | 第50-51页 |
| 4.1.3.2 酸性α-淀粉酶高产菌株SF-8基因组DNA提取 | 第51页 |
| 4.1.3.3 菌株SF-8基因组DNA的纯化 | 第51-52页 |
| 4.1.3.4 菌株SF-8基因组DNA酶切 | 第52页 |
| 4.1.3.5 PUC19质粒提取和酶切 | 第52页 |
| 4.1.3.6 菌株SF-8基因组DNA去磷酸化 | 第52-53页 |
| 4.1.3.7 菌株SF-8基因组DNA与PUC19质粒连接转化 | 第53页 |
| 4.1.3.8 重组子转化 | 第53页 |
| 4.2 结果和讨论 | 第53-54页 |
| 4.3 小结 | 第54-55页 |
| 第五章 实验结果和展望 | 第55-57页 |
| 参考文献 | 第57-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 研究生阶段发表论文情况 | 第62页 |
