摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
第1章 绪论 | 第11-18页 |
1 乌鳢的养殖情况和其研究意义 | 第11页 |
2 鱼类的性别决定 | 第11-14页 |
2.1 鱼类的性别及性染色体 | 第12页 |
2.2 鱼类性别决定相关因素 | 第12-14页 |
3 Dmrt 基因的研究现状 | 第14-16页 |
3.1 Dmrt 基因的发现 | 第14-15页 |
3.2 鱼类 Dmrt 基因的研究现状 | 第15-16页 |
4 本论文的研究意义 | 第16-18页 |
4.1 理论意义 | 第16-17页 |
4.2 生产意义 | 第17-18页 |
第2章 实验材料与方法 | 第18-32页 |
1 实验材料 | 第18-20页 |
1.1 实验用鱼 | 第18页 |
1.2 实验药品与仪器 | 第18-19页 |
1.2.1 主要实验仪器 | 第18页 |
1.2.2 主要实验药品和配制方法 | 第18-19页 |
1.3 引物设计与合成 | 第19-20页 |
1.3.1 DM 区的引物 | 第19页 |
1.3.2 3′RACE 引物 | 第19页 |
1.3.3 5′RACE 引物 | 第19-20页 |
1.3.4 验证 Dmrt1 全长的引物 | 第20页 |
1.3.5 用于定量分析的引物 | 第20页 |
2 实验方法 | 第20-32页 |
2.1 乌鳢基因组 DNA 的提取 | 第20-21页 |
2.2 乌鳢精巢总 RNA 的提取 | 第21-22页 |
2.3 琼脂糖凝胶电泳 | 第22页 |
2.4 琼脂糖凝胶中回收 DNA | 第22-23页 |
2.5 PCR 扩增 DM 结构域 | 第23页 |
2.6 乌鳢总 RNA 的反转录 | 第23-24页 |
2.7 3′RACE 扩增 Dmrt 的 3′端 | 第24-26页 |
2.8 5′RACE 扩增 Dmrt 的 5′端 | 第26-30页 |
2.9 PCR 产物的连接反应 | 第30页 |
2.10 重组质粒的筛选 | 第30-31页 |
2.11 菌种的保存 | 第31-32页 |
第3章 实验结果 | 第32-41页 |
1 乌鳢基因组 DNA 的提取 | 第32页 |
2 乌鳢精巢总 RNA 的提取 | 第32-33页 |
3 DM-domain 区的扩增 | 第33页 |
4 Dmrt1 基因的序列分析 | 第33-39页 |
4.1 Dmrt1 保守域的比对 | 第33-34页 |
4.2 乌鳢Dmrt1基因的3′RACE和5′RACE | 第34-36页 |
4.3 乌鳢 Dmrt1 氨基酸的同源性分析 | 第36-37页 |
4.4 乌鳢 Dmrt1 系统树的分析 | 第37-38页 |
4.5 Dmrt1 基因在成体乌鳢不同组织的表达 | 第38-39页 |
5 Dmrt4 基因的序列分析 | 第39-41页 |
5.1 Dmrt4 保守域的对比 | 第39-40页 |
5.2 乌鳢 Dmrt4 基因的 5′RACE | 第40-41页 |
第4章 讨论 | 第41-45页 |
1 乌鳢 Dmrt1 基因结构、表达 | 第41-42页 |
2 乌鳢 Dmrt4 基因结构 | 第42页 |
3 Dmrt 家族的特点 | 第42-43页 |
4 系统发育树的构建 | 第43-45页 |
结语 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-50页 |
致谢 | 第50页 |