NPR1基因的克隆及西瓜的遗传转化的研究
| 中文摘要 | 第2-3页 |
| 英文摘要 | 第3页 |
| 前言 | 第7-8页 |
| 一 综述 | 第8-24页 |
| (一) 植物抗病基因工程研究 | 第8-12页 |
| 1. 基因对基因假说 | 第8页 |
| 2. 系统获得性抗性 | 第8-10页 |
| 3. 植物抗病的物质基础 | 第10-12页 |
| (二) 植物抗病的基因工程策略 | 第12-17页 |
| 1. 抗病毒病的基因工程策略 | 第12-15页 |
| 2. 抗真菌病害的基因工程策略 | 第15-17页 |
| 3. 细菌病害的基因工程 | 第17页 |
| (三) 植物抗病基因工程的转化方法 | 第17-20页 |
| 1. 载体介导的转化系统 | 第17-18页 |
| 2. 直接转化系统 | 第18-20页 |
| 3. 种质系统转化法 | 第20页 |
| (四) 西瓜的基因工程研究进展 | 第20-23页 |
| 1. 西瓜的生产及病害情况 | 第20-21页 |
| 2. 西瓜组织培养研究进展 | 第21-22页 |
| 3. 西瓜遗传转化现状 | 第22-23页 |
| (五) 研究目的及意义 | 第23-24页 |
| 二 材料与方法 | 第24-30页 |
| (一) 材料 | 第24页 |
| 1. 植物材料 | 第24页 |
| 2. 菌株与质粒 | 第24页 |
| (二) 主要试剂和仪器 | 第24页 |
| 1. 试剂 | 第24页 |
| 2. 仪器 | 第24页 |
| (三) 培养基与溶液 | 第24-25页 |
| 1 .植物培养基 | 第24页 |
| 2. 细菌培养 | 第24-25页 |
| 3. 常用溶液的配置 | 第25页 |
| (四) 实验方法 | 第25-30页 |
| 1.N PR1 基因的克隆及表达载体的构件 | 第25-27页 |
| 1.1 NPR1 基因的克隆 | 第25-26页 |
| 1.2 表达载体的构件 | 第26-27页 |
| 1.3 三亲交配法将中间载体导入农杆菌 | 第27页 |
| 2. 西瓜再生体系的建立 | 第27-28页 |
| 3. 农杆菌介导的西瓜遗传转化体系的建立 | 第28-29页 |
| 4. 转基因植物的 PCR 检测 | 第29-30页 |
| 三 结果分析 | 第30-38页 |
| (一) NPR1 基因的克隆及表达载体的构建 | 第30-32页 |
| 1. NPR1 基因的 PCR 扩增 | 第30页 |
| 2. DNA 扩增片段的序列分析 | 第30-31页 |
| 3. NPR1 基因表达载体的构建 | 第31-32页 |
| 4. 农杆菌菌株的获得 | 第32页 |
| (二) 西瓜再生体系的建立 | 第32-34页 |
| 1. 外植体的选择 | 第32-33页 |
| 2. 苗龄对西瓜子叶不定芽分化的影响 | 第33页 |
| 3. 不同激素组合对西瓜子叶不定芽诱导的影响 | 第33-34页 |
| 4. BA浓度对西瓜子叶再生芽的影响 | 第34页 |
| 5. 再生植株的伸长,生根及移栽 | 第34页 |
| (三) 遗传转化体系的建立 | 第34-37页 |
| 1. 潮酶素选择压的确定 | 第34-36页 |
| 2. 影响遗传转化因素的探讨 | 第36-37页 |
| 3. 抗性芽的生根筛选 | 第37页 |
| (四) 转基因植物的检测 | 第37-38页 |
| 四 讨论 | 第38-40页 |
| 1. NPR1基因的克隆及表达载体的构建 | 第38页 |
| 2. 西瓜再生系统的建立 | 第38-39页 |
| 3. 农杆菌介导的植物遗传转化 | 第39-40页 |
| 4. 存在问题及展望 | 第40页 |
| 五 小结 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-46页 |
| 缩写词 | 第46-47页 |
| 图版说明 | 第47-49页 |
| 致谢 | 第49页 |
