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癌间质细胞在子宫内膜癌发生、发展中作用机制的研究

英文缩略词表第9-11页
中文摘要第11-20页
ABSTRACT第20-33页
前言第34-36页
实验流程图第36-37页
实验材料和方法第37-89页
    实验材料第37-45页
        1. 主要试剂与材料第37-39页
        2. 主要仪器第39-41页
        3. 主要试剂的配制第41-45页
    实验方法第45-89页
        1 样本的收集及原代细胞分离培养第45-51页
            1.1 材料与方法第45-48页
                1.1.1 临床组织样本的获取第45页
                1.1.2 原代细胞分离培养第45-46页
                1.1.3 细胞传代培养第46-47页
                1.1.4 免疫细胞化学第47页
                1.1.5 统计学分析第47-48页
            1.2 结果第48-49页
                1.2.1 原代细胞分离培养第48页
                1.2.2 免疫细胞化学鉴定第48-49页
            1.3 讨论第49-51页
        2 子宫内膜腺癌间质细胞对正常子宫内膜上皮细胞增殖的影响第51-69页
            2.1 材料与方法第51-60页
                2.1.1 细胞共培养第51页
                2.1.2 细胞生长曲线的测定第51页
                2.1.3 BrdU掺入分析第51-52页
                2.1.4 细胞RNA提取第52-53页
                2.1.5 RNA逆转录cDNA第53-54页
                2.1.6 实时定量PCR第54-56页
                2.1.7 蛋白质印迹Western Blot第56-59页
                2.1.8 流式细胞术分析细胞周期第59页
                2.1.9 裸鼠皮下成瘤实验第59-60页
                2.1.10 统计学分析第60页
            2.2 结果第60-66页
                2.2.1 子宫内膜腺癌间质细胞旁分泌作用促进上皮细胞增殖第60页
                2.2.2 子宫内膜腺癌间质细胞旁分泌作用促进上皮细胞BrdU掺入第60-61页
                2.2.3 癌间质细胞对上皮细胞PTEN和K-Ras基因表达的影响第61-62页
                2.2.4 癌间质细胞对上皮细胞PTEN和K-Ras蛋白表达的影响第62-63页
                2.2.5 细胞周期第63-64页
                2.2.6 下游基因CyclinD1检测第64-65页
                2.2.7 下游基因p21、p27基因表达水平检测第65页
                2.2.8 癌间质细胞共培养上皮细胞裸鼠皮下移植瘤增殖速度快第65-66页
            2.3 讨论第66-69页
        3 子宫内膜腺癌间质细胞的旁分泌作用第69-78页
            3.1 材料与方法第69-74页
                3.1.1 酶联免疫吸附(ELISA)实验第69页
                3.1.2 荧光定量PCR和蛋白质印迹WB第69-73页
                3.1.3 免疫组化第73-74页
                3.1.4 CCK-8第74页
                3.1.5 统计学分析第74页
            3.2 结果第74-77页
                3.2.1 培养上清细胞因子水平检测第75页
                3.2.2 间质细胞中HGF基因和蛋白表达水平检测第75-76页
                3.2.3 子宫内膜腺癌移植瘤HGF表达检测第76页
                3.2.4 子宫内膜组织HGF表达检测第76-77页
                3.2.5 细胞因子HGF能够促进正常子宫内膜上皮细胞生长第77页
            3.3 讨论第77-78页
        4 HGF在上皮细胞增殖中的作用机制第78-89页
            4.1 材料与方法第78-83页
                4.1.1 蛋白质印迹(Western Blot,WB)第78-81页
                4.1.2 Met抑制剂加入蛋白质印迹和细胞生长曲线的测定第81-82页
                4.1.3 裸鼠瘤体蛋白质印迹第82页
                4.1.4 实时定量PCR第82-83页
                4.1.5 统计学分析第83页
            4.2 结果第83-86页
                4.2.1 信号通路节点的筛选第83-84页
                4.2.2 Met抑制剂能够逆转癌间质细胞的促增殖作用第84-85页
                4.2.3 裸鼠移植瘤样本中Akt磷酸化水平升高第85-86页
                4.2.4 裸鼠移植瘤内下游基因CyclinD1检测第86页
            4.3 讨论第86-89页
小结第89-90页
讨论第90-96页
结论第96-97页
参考文献第97-102页
综述第102-118页
    REFERENCES第110-118页
附录第118-119页
致谢第119-120页

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