英文缩略词表 | 第9-11页 |
中文摘要 | 第11-20页 |
ABSTRACT | 第20-33页 |
前言 | 第34-36页 |
实验流程图 | 第36-37页 |
实验材料和方法 | 第37-89页 |
实验材料 | 第37-45页 |
1. 主要试剂与材料 | 第37-39页 |
2. 主要仪器 | 第39-41页 |
3. 主要试剂的配制 | 第41-45页 |
实验方法 | 第45-89页 |
1 样本的收集及原代细胞分离培养 | 第45-51页 |
1.1 材料与方法 | 第45-48页 |
1.1.1 临床组织样本的获取 | 第45页 |
1.1.2 原代细胞分离培养 | 第45-46页 |
1.1.3 细胞传代培养 | 第46-47页 |
1.1.4 免疫细胞化学 | 第47页 |
1.1.5 统计学分析 | 第47-48页 |
1.2 结果 | 第48-49页 |
1.2.1 原代细胞分离培养 | 第48页 |
1.2.2 免疫细胞化学鉴定 | 第48-49页 |
1.3 讨论 | 第49-51页 |
2 子宫内膜腺癌间质细胞对正常子宫内膜上皮细胞增殖的影响 | 第51-69页 |
2.1 材料与方法 | 第51-60页 |
2.1.1 细胞共培养 | 第51页 |
2.1.2 细胞生长曲线的测定 | 第51页 |
2.1.3 BrdU掺入分析 | 第51-52页 |
2.1.4 细胞RNA提取 | 第52-53页 |
2.1.5 RNA逆转录cDNA | 第53-54页 |
2.1.6 实时定量PCR | 第54-56页 |
2.1.7 蛋白质印迹Western Blot | 第56-59页 |
2.1.8 流式细胞术分析细胞周期 | 第59页 |
2.1.9 裸鼠皮下成瘤实验 | 第59-60页 |
2.1.10 统计学分析 | 第60页 |
2.2 结果 | 第60-66页 |
2.2.1 子宫内膜腺癌间质细胞旁分泌作用促进上皮细胞增殖 | 第60页 |
2.2.2 子宫内膜腺癌间质细胞旁分泌作用促进上皮细胞BrdU掺入 | 第60-61页 |
2.2.3 癌间质细胞对上皮细胞PTEN和K-Ras基因表达的影响 | 第61-62页 |
2.2.4 癌间质细胞对上皮细胞PTEN和K-Ras蛋白表达的影响 | 第62-63页 |
2.2.5 细胞周期 | 第63-64页 |
2.2.6 下游基因CyclinD1检测 | 第64-65页 |
2.2.7 下游基因p21、p27基因表达水平检测 | 第65页 |
2.2.8 癌间质细胞共培养上皮细胞裸鼠皮下移植瘤增殖速度快 | 第65-66页 |
2.3 讨论 | 第66-69页 |
3 子宫内膜腺癌间质细胞的旁分泌作用 | 第69-78页 |
3.1 材料与方法 | 第69-74页 |
3.1.1 酶联免疫吸附(ELISA)实验 | 第69页 |
3.1.2 荧光定量PCR和蛋白质印迹WB | 第69-73页 |
3.1.3 免疫组化 | 第73-74页 |
3.1.4 CCK-8 | 第74页 |
3.1.5 统计学分析 | 第74页 |
3.2 结果 | 第74-77页 |
3.2.1 培养上清细胞因子水平检测 | 第75页 |
3.2.2 间质细胞中HGF基因和蛋白表达水平检测 | 第75-76页 |
3.2.3 子宫内膜腺癌移植瘤HGF表达检测 | 第76页 |
3.2.4 子宫内膜组织HGF表达检测 | 第76-77页 |
3.2.5 细胞因子HGF能够促进正常子宫内膜上皮细胞生长 | 第77页 |
3.3 讨论 | 第77-78页 |
4 HGF在上皮细胞增殖中的作用机制 | 第78-89页 |
4.1 材料与方法 | 第78-83页 |
4.1.1 蛋白质印迹(Western Blot,WB) | 第78-81页 |
4.1.2 Met抑制剂加入蛋白质印迹和细胞生长曲线的测定 | 第81-82页 |
4.1.3 裸鼠瘤体蛋白质印迹 | 第82页 |
4.1.4 实时定量PCR | 第82-83页 |
4.1.5 统计学分析 | 第83页 |
4.2 结果 | 第83-86页 |
4.2.1 信号通路节点的筛选 | 第83-84页 |
4.2.2 Met抑制剂能够逆转癌间质细胞的促增殖作用 | 第84-85页 |
4.2.3 裸鼠移植瘤样本中Akt磷酸化水平升高 | 第85-86页 |
4.2.4 裸鼠移植瘤内下游基因CyclinD1检测 | 第86页 |
4.3 讨论 | 第86-89页 |
小结 | 第89-90页 |
讨论 | 第90-96页 |
结论 | 第96-97页 |
参考文献 | 第97-102页 |
综述 | 第102-118页 |
REFERENCES | 第110-118页 |
附录 | 第118-119页 |
致谢 | 第119-120页 |