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噻呋酰胺对斑马鱼的毒性及作用机制研究

摘要第3-5页
ABSTRACT第5-7页
第一章 绪论第15-35页
    1.1 农药对环境的副作用第15-17页
        1.1.1 农药的再评价问题第15-16页
        1.1.2 农药对环境的影响分类第16-17页
        1.1.3 农药毒性预警的必要性第17页
    1.2 酰胺类杀菌剂第17-21页
        1.2.1 酰胺类杀菌剂简介第17-19页
        1.2.2 酰胺类杀菌剂对环境生物的毒性第19-20页
        1.2.3 噻呋酰胺简介第20-21页
    1.3 斑马鱼简介第21-29页
        1.3.1 基本生物学特性第21页
        1.3.2 生命阶段第21-27页
        1.3.3 优势及应用第27-29页
    1.4 毒理学评价方法第29-32页
        1.4.1 毒性试验方法第29页
        1.4.2 毒性评价指标第29-32页
    1.5 问题的提出及论文设计思路第32-35页
        1.5.1 研究意义第32页
        1.5.2 研究内容第32-34页
        1.5.3 技术路线第34-35页
第二章 噻呋酰胺对斑马鱼的急性毒性与发育毒性第35-44页
    2.1. 仪器与材料第35-36页
        2.1.1 仪器第35页
        2.1.2 材料第35-36页
    2.2. 试验方法第36-37页
        2.2.1 胚胎毒性试验第36页
        2.2.2 仔鱼毒性试验第36页
        2.2.3 成鱼毒性试验第36页
        2.2.4 成鱼14d长期暴露试验第36-37页
        2.2.5 溶液中噻呋酰胺实际含量测定第37页
        2.2.6 数据处理第37页
    2.3. 试验结果与分析第37-43页
        2.3.1 水样分析结果第37页
        2.3.2 急性毒性试验结果第37-38页
        2.3.3 胚胎发育毒性第38-40页
        2.3.4 仔鱼发育毒性第40-42页
        2.3.5 成鱼发育毒性第42-43页
    2.4 讨论第43-44页
第三章 噻呋酰胺对斑马鱼胚胎毒性的作用机制第44-63页
    3.1 仪器与材料第44-46页
        3.1.1 仪器设备第44-45页
        3.1.2 试验材料第45-46页
    3.2 试验方法第46-54页
        3.2.1 暴露方法第46页
        3.2.2 组织切片制作与观察第46页
        3.2.3 透射电镜观察第46-47页
        3.2.4 SDH,SOD,CAT, GPx活性以及MDA含量测定第47-49页
        3.2.5 caspase-3、caspase-9活性检测第49-50页
        3.2.6 IL-8含量测定第50页
        3.2.7 蛋白含量测定第50页
        3.2.8 噻呋酰胺对线粒体、氧化、凋亡、免疫相关基因的影响第50-54页
        3.2.9 数据处理第54页
    3.3 试验结果与分析第54-61页
        3.3.1 水样分析结果第54页
        3.3.2 胚胎切片观察第54-56页
        3.3.3 斑马鱼胚胎亚细胞结构观察第56-58页
        3.3.4 噻呋酰胺对SDH,SOD,CAT,GPx活性以及MDA含量的影响第58-59页
        3.3.5 噻呋酰胺对胚胎caspases活性以及IL-8含量的影响第59-60页
        3.3.6 噻呋酰胺对胚胎线粒体相关基因的影响第60页
        3.3.7 噻呋酰胺对胚胎氧化相关基因、凋亡相关基因、免疫相关基因的影响第60-61页
    3.4 讨论第61-63页
第四章 噻呋酰胺对斑马鱼成鱼毒性的作用机制第63-73页
    4.1 仪器与材料第63-64页
        4.1.1 仪器设备第63页
        4.1.2 试验材料第63-64页
    4.2 试验方法第64-67页
        4.2.1 暴露方法第64页
        4.2.2 组织切片制作第64页
        4.2.3 透射电镜观察第64页
        4.2.4 肝脏中SDH活性检测第64页
        4.2.5 肝脏中呼吸链复合体Ⅰ-Ⅳ活性检测第64-66页
        4.2.6 蛋白含量测定第66页
        4.2.7 噻呋酰胺对凋亡、免疫相关基因的影响第66-67页
        4.2.8 数据处理第67页
    4.3 试验结果与分析第67-72页
        4.3.1 水样分析结果第67-68页
        4.3.2 噻呋酰胺对斑马鱼肝脏和肾脏的损伤第68-69页
        4.3.3 噻呋酰胺对SDH和呼吸链复合体Ⅰ-Ⅳ活性的影响第69-70页
        4.3.4 噻呋酰胺对斑马鱼成鱼肝脏线粒体的影响第70-71页
        4.3.5 噻呋酰胺对成鱼肝脏凋亡、免疫相关基因表达的影响第71-72页
    4.4 讨论第72-73页
第五章 噻呋酰胺对斑马鱼成鱼脂代谢的影响第73-85页
    5.1 仪器与材料第73-74页
        5.1.1 仪器设备第73页
        5.1.2 实验材料第73-74页
    5.2 试验方法第74-78页
        5.2.1 暴露方法第74页
        5.2.2 肥满度以及肝体指数测定第74-75页
        5.2.3 甘油三酯和总胆固醇含量第75页
        5.2.4 组织病理学观察第75-76页
        5.2.5 脂代谢相关酶的活性测定第76-77页
        5.2.6 噻呋酰胺对脂类代谢相关基因的影响第77-78页
        5.2.7 数据处理第78页
    5.3 试验结果以及分析第78-83页
        5.3.1 噻呋酰胺对斑马鱼成鱼肥满度以及肝体指数的影响第78页
        5.3.2 噻呋酰胺对斑马鱼肝脏甘油三酯和总胆固醇含量的影响第78-79页
        5.3.3 斑马鱼肝脏病理学变化第79-80页
        5.3.4 噻呋酰胺对斑马鱼脂类代谢相关酶活性的影响第80-82页
        5.3.5 噻呋酰胺对斑马鱼脂类代谢相关基因表达的影响第82-83页
    5.4 讨论第83-85页
第六章 噻呋酰胺对斑马鱼成鱼糖代谢的影响第85-97页
    6.1 仪器与材料第85-86页
        6.1.1 仪器设备第85页
        6.1.2 实验材料第85-86页
    6.2 试验方法第86-90页
        6.2.1 暴露方法第86页
        6.2.2 肝糖原分布情况鉴定第86-87页
        6.2.3 肝糖原含量测定第87页
        6.2.4 血糖含量测定第87页
        6.2.5 G6PDH活性、LDH活性以及丙酮酸,乳酸含量检测第87-89页
        6.2.6 噻呋酰胺对糖代谢相关基因表达的影响第89-90页
        6.2.7 数据处理第90页
    6.3 试验结果与分析第90-95页
        6.3.1 肝糖原分布以及密度测定第90-91页
        6.3.2 肝糖原含量第91-92页
        6.3.3 血糖含量第92-93页
        6.3.4 G6PDH活性第93-94页
        6.3.5 LDH活性以及丙酮酸、乳酸含量第94-95页
        6.3.6 糖代谢相关基因表达分析第95页
    6.4 讨论第95-97页
第七章 转录组学分析第97-107页
    7.1 实验材料第97页
        7.1.1 试剂与材料第97页
        7.1.2 仪器与软件第97页
    7.2 试验方法第97-100页
        7.2.1 总RNA提取和质量检测第97-98页
        7.2.2 文库构建第98页
        7.2.3 文库质量检测第98-99页
        7.2.4 Illumina测序第99页
        7.2.5 数据处理与分析第99页
        7.2.6 qRT-PCR验证第99-100页
    7.3 试验结果第100-106页
        7.3.1 总RNA质量检测第100-101页
        7.3.2 测序数据质量评估第101页
        7.3.3 差异表达分析第101-102页
        7.3.4 差异基因GO富集分析第102-103页
        7.3.5 差异基因KEGG富集分析第103-104页
        7.3.6 qRT-PCR验证结果第104-106页
    7.4 讨论第106-107页
第八章 结论第107-108页
第九章 创新点与展望第108-109页
    9.1 创新点第108页
    9.2 展望第108-109页
参考文献第109-123页
附录第123-125页
致谢第125-126页
作者简介第126页
    教育背景:第126页
    攻读博士期间发表文章:第126页

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