摘要 | 第3-5页 |
ABSTRACT | 第5-7页 |
第一章 绪论 | 第15-35页 |
1.1 农药对环境的副作用 | 第15-17页 |
1.1.1 农药的再评价问题 | 第15-16页 |
1.1.2 农药对环境的影响分类 | 第16-17页 |
1.1.3 农药毒性预警的必要性 | 第17页 |
1.2 酰胺类杀菌剂 | 第17-21页 |
1.2.1 酰胺类杀菌剂简介 | 第17-19页 |
1.2.2 酰胺类杀菌剂对环境生物的毒性 | 第19-20页 |
1.2.3 噻呋酰胺简介 | 第20-21页 |
1.3 斑马鱼简介 | 第21-29页 |
1.3.1 基本生物学特性 | 第21页 |
1.3.2 生命阶段 | 第21-27页 |
1.3.3 优势及应用 | 第27-29页 |
1.4 毒理学评价方法 | 第29-32页 |
1.4.1 毒性试验方法 | 第29页 |
1.4.2 毒性评价指标 | 第29-32页 |
1.5 问题的提出及论文设计思路 | 第32-35页 |
1.5.1 研究意义 | 第32页 |
1.5.2 研究内容 | 第32-34页 |
1.5.3 技术路线 | 第34-35页 |
第二章 噻呋酰胺对斑马鱼的急性毒性与发育毒性 | 第35-44页 |
2.1. 仪器与材料 | 第35-36页 |
2.1.1 仪器 | 第35页 |
2.1.2 材料 | 第35-36页 |
2.2. 试验方法 | 第36-37页 |
2.2.1 胚胎毒性试验 | 第36页 |
2.2.2 仔鱼毒性试验 | 第36页 |
2.2.3 成鱼毒性试验 | 第36页 |
2.2.4 成鱼14d长期暴露试验 | 第36-37页 |
2.2.5 溶液中噻呋酰胺实际含量测定 | 第37页 |
2.2.6 数据处理 | 第37页 |
2.3. 试验结果与分析 | 第37-43页 |
2.3.1 水样分析结果 | 第37页 |
2.3.2 急性毒性试验结果 | 第37-38页 |
2.3.3 胚胎发育毒性 | 第38-40页 |
2.3.4 仔鱼发育毒性 | 第40-42页 |
2.3.5 成鱼发育毒性 | 第42-43页 |
2.4 讨论 | 第43-44页 |
第三章 噻呋酰胺对斑马鱼胚胎毒性的作用机制 | 第44-63页 |
3.1 仪器与材料 | 第44-46页 |
3.1.1 仪器设备 | 第44-45页 |
3.1.2 试验材料 | 第45-46页 |
3.2 试验方法 | 第46-54页 |
3.2.1 暴露方法 | 第46页 |
3.2.2 组织切片制作与观察 | 第46页 |
3.2.3 透射电镜观察 | 第46-47页 |
3.2.4 SDH,SOD,CAT, GPx活性以及MDA含量测定 | 第47-49页 |
3.2.5 caspase-3、caspase-9活性检测 | 第49-50页 |
3.2.6 IL-8含量测定 | 第50页 |
3.2.7 蛋白含量测定 | 第50页 |
3.2.8 噻呋酰胺对线粒体、氧化、凋亡、免疫相关基因的影响 | 第50-54页 |
3.2.9 数据处理 | 第54页 |
3.3 试验结果与分析 | 第54-61页 |
3.3.1 水样分析结果 | 第54页 |
3.3.2 胚胎切片观察 | 第54-56页 |
3.3.3 斑马鱼胚胎亚细胞结构观察 | 第56-58页 |
3.3.4 噻呋酰胺对SDH,SOD,CAT,GPx活性以及MDA含量的影响 | 第58-59页 |
3.3.5 噻呋酰胺对胚胎caspases活性以及IL-8含量的影响 | 第59-60页 |
3.3.6 噻呋酰胺对胚胎线粒体相关基因的影响 | 第60页 |
3.3.7 噻呋酰胺对胚胎氧化相关基因、凋亡相关基因、免疫相关基因的影响 | 第60-61页 |
3.4 讨论 | 第61-63页 |
第四章 噻呋酰胺对斑马鱼成鱼毒性的作用机制 | 第63-73页 |
4.1 仪器与材料 | 第63-64页 |
4.1.1 仪器设备 | 第63页 |
4.1.2 试验材料 | 第63-64页 |
4.2 试验方法 | 第64-67页 |
4.2.1 暴露方法 | 第64页 |
4.2.2 组织切片制作 | 第64页 |
4.2.3 透射电镜观察 | 第64页 |
4.2.4 肝脏中SDH活性检测 | 第64页 |
4.2.5 肝脏中呼吸链复合体Ⅰ-Ⅳ活性检测 | 第64-66页 |
4.2.6 蛋白含量测定 | 第66页 |
4.2.7 噻呋酰胺对凋亡、免疫相关基因的影响 | 第66-67页 |
4.2.8 数据处理 | 第67页 |
4.3 试验结果与分析 | 第67-72页 |
4.3.1 水样分析结果 | 第67-68页 |
4.3.2 噻呋酰胺对斑马鱼肝脏和肾脏的损伤 | 第68-69页 |
4.3.3 噻呋酰胺对SDH和呼吸链复合体Ⅰ-Ⅳ活性的影响 | 第69-70页 |
4.3.4 噻呋酰胺对斑马鱼成鱼肝脏线粒体的影响 | 第70-71页 |
4.3.5 噻呋酰胺对成鱼肝脏凋亡、免疫相关基因表达的影响 | 第71-72页 |
4.4 讨论 | 第72-73页 |
第五章 噻呋酰胺对斑马鱼成鱼脂代谢的影响 | 第73-85页 |
5.1 仪器与材料 | 第73-74页 |
5.1.1 仪器设备 | 第73页 |
5.1.2 实验材料 | 第73-74页 |
5.2 试验方法 | 第74-78页 |
5.2.1 暴露方法 | 第74页 |
5.2.2 肥满度以及肝体指数测定 | 第74-75页 |
5.2.3 甘油三酯和总胆固醇含量 | 第75页 |
5.2.4 组织病理学观察 | 第75-76页 |
5.2.5 脂代谢相关酶的活性测定 | 第76-77页 |
5.2.6 噻呋酰胺对脂类代谢相关基因的影响 | 第77-78页 |
5.2.7 数据处理 | 第78页 |
5.3 试验结果以及分析 | 第78-83页 |
5.3.1 噻呋酰胺对斑马鱼成鱼肥满度以及肝体指数的影响 | 第78页 |
5.3.2 噻呋酰胺对斑马鱼肝脏甘油三酯和总胆固醇含量的影响 | 第78-79页 |
5.3.3 斑马鱼肝脏病理学变化 | 第79-80页 |
5.3.4 噻呋酰胺对斑马鱼脂类代谢相关酶活性的影响 | 第80-82页 |
5.3.5 噻呋酰胺对斑马鱼脂类代谢相关基因表达的影响 | 第82-83页 |
5.4 讨论 | 第83-85页 |
第六章 噻呋酰胺对斑马鱼成鱼糖代谢的影响 | 第85-97页 |
6.1 仪器与材料 | 第85-86页 |
6.1.1 仪器设备 | 第85页 |
6.1.2 实验材料 | 第85-86页 |
6.2 试验方法 | 第86-90页 |
6.2.1 暴露方法 | 第86页 |
6.2.2 肝糖原分布情况鉴定 | 第86-87页 |
6.2.3 肝糖原含量测定 | 第87页 |
6.2.4 血糖含量测定 | 第87页 |
6.2.5 G6PDH活性、LDH活性以及丙酮酸,乳酸含量检测 | 第87-89页 |
6.2.6 噻呋酰胺对糖代谢相关基因表达的影响 | 第89-90页 |
6.2.7 数据处理 | 第90页 |
6.3 试验结果与分析 | 第90-95页 |
6.3.1 肝糖原分布以及密度测定 | 第90-91页 |
6.3.2 肝糖原含量 | 第91-92页 |
6.3.3 血糖含量 | 第92-93页 |
6.3.4 G6PDH活性 | 第93-94页 |
6.3.5 LDH活性以及丙酮酸、乳酸含量 | 第94-95页 |
6.3.6 糖代谢相关基因表达分析 | 第95页 |
6.4 讨论 | 第95-97页 |
第七章 转录组学分析 | 第97-107页 |
7.1 实验材料 | 第97页 |
7.1.1 试剂与材料 | 第97页 |
7.1.2 仪器与软件 | 第97页 |
7.2 试验方法 | 第97-100页 |
7.2.1 总RNA提取和质量检测 | 第97-98页 |
7.2.2 文库构建 | 第98页 |
7.2.3 文库质量检测 | 第98-99页 |
7.2.4 Illumina测序 | 第99页 |
7.2.5 数据处理与分析 | 第99页 |
7.2.6 qRT-PCR验证 | 第99-100页 |
7.3 试验结果 | 第100-106页 |
7.3.1 总RNA质量检测 | 第100-101页 |
7.3.2 测序数据质量评估 | 第101页 |
7.3.3 差异表达分析 | 第101-102页 |
7.3.4 差异基因GO富集分析 | 第102-103页 |
7.3.5 差异基因KEGG富集分析 | 第103-104页 |
7.3.6 qRT-PCR验证结果 | 第104-106页 |
7.4 讨论 | 第106-107页 |
第八章 结论 | 第107-108页 |
第九章 创新点与展望 | 第108-109页 |
9.1 创新点 | 第108页 |
9.2 展望 | 第108-109页 |
参考文献 | 第109-123页 |
附录 | 第123-125页 |
致谢 | 第125-126页 |
作者简介 | 第126页 |
教育背景: | 第126页 |
攻读博士期间发表文章: | 第126页 |