摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-8页 |
第一章 引言 | 第12-20页 |
1.1 几种重要的对虾病原 | 第12-14页 |
1.1.1 白斑综合征病毒(WSSV) | 第12-13页 |
1.1.2 致急性肝胰腺坏死病副溶血弧菌(VPAHPND) | 第13页 |
1.1.3 传染性皮下及造血组织坏死病毒(IHHNV) | 第13页 |
1.1.4 黄头病毒(yellow head virus,YHV) | 第13-14页 |
1.2 分子生物学方法在白斑综合征病毒检测中的应用 | 第14-16页 |
1.2.1 等温扩增技术 | 第14-16页 |
1.2.2 聚合酶链反应技术(Polymerase Chain Reaction,PCR) | 第16页 |
1.3 环介导等温扩增产物几种鉴定方法 | 第16-20页 |
1.3.1 染料法 | 第16-18页 |
1.3.2 pH法 | 第18页 |
1.3.3 探针法 | 第18-19页 |
1.3.4 电泳法 | 第19-20页 |
第二章 基于LAMP技术的对虾白斑综合征病毒现场快速高灵敏度检测试剂盒的评价 | 第20-33页 |
2.1 材料与方法 | 第21-26页 |
2.1.1 对虾和病料及仪器 | 第21页 |
2.1.2 对虾白斑综合征病毒现场快速高灵敏度检测试剂盒 | 第21页 |
2.1.3 标准参考组织样品DNA提取 | 第21-22页 |
2.1.4 标准参考组织样品感染状况确定 | 第22-23页 |
2.1.5 WSSV标准DNA样品的制备 | 第23页 |
2.1.6 参考组织样品试剂盒的检测 | 第23-24页 |
2.1.7 试剂盒性能参数的评价 | 第24-26页 |
2.2 实验结果 | 第26-30页 |
2.2.1 分析灵敏度 | 第26-27页 |
2.2.2 分析特异性 | 第27-28页 |
2.2.3 诊断灵敏度和诊断特异性 | 第28-29页 |
2.2.4 重复性 | 第29页 |
2.2.5 储存条件下的稳定性 | 第29-30页 |
2.2.6 运输条件下的稳定性 | 第30页 |
2.3 讨论 | 第30-33页 |
第三章 检测试剂盒可视化染料的筛选 | 第33-42页 |
3.1 材料与方法 | 第33-36页 |
3.1.1 引物设计 | 第33-34页 |
3.1.2 标准品的制备 | 第34-35页 |
3.1.3 可视化WSSV-LAMP反应条件 | 第35-36页 |
3.1.4 HNB浓度的优化 | 第36页 |
3.1.5 Caclein/MnCl2浓度的优化 | 第36页 |
3.1.6 两种染料的WSSV-LAMP体系分析灵敏度比较 | 第36页 |
3.2 实验结果 | 第36-39页 |
3.2.1 HNB浓度的优化结果 | 第36-37页 |
3.2.2 Caclein/MnCl2浓度的优化 | 第37-38页 |
3.2.3 不同可视化染料试剂盒分析灵敏度比较 | 第38页 |
3.2.4 其它 | 第38-39页 |
3.3 讨论 | 第39-42页 |
第四章 探针法双重LAMP的建立 | 第42-50页 |
4.1 材料与方法 | 第42-44页 |
4.1.1 探针的建立 | 第42-43页 |
4.1.2 duplex-LAMP反应体系和程序 | 第43-44页 |
4.1.3 duplex-LAMP分析灵敏度验证 | 第44页 |
4.1.4 duplex-LAMP分析特异性验证 | 第44页 |
4.2 实验结果 | 第44-47页 |
4.2.1 duplex-LAMP分析灵敏度验证 | 第44-45页 |
4.2.2 duplex-LAMP分析特异性验证 | 第45-46页 |
4.2.3 探针法与染料法分析灵敏度对比 | 第46-47页 |
4.3 讨论 | 第47-50页 |
参考文献 | 第50-57页 |
致谢 | 第57页 |