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基于等温扩增技术的对虾白斑综合征病毒现场快速高灵敏度检测试剂盒的评价及优化

摘要第4-6页
ABSTRACT第6-8页
第一章 引言第12-20页
    1.1 几种重要的对虾病原第12-14页
        1.1.1 白斑综合征病毒(WSSV)第12-13页
        1.1.2 致急性肝胰腺坏死病副溶血弧菌(VPAHPND)第13页
        1.1.3 传染性皮下及造血组织坏死病毒(IHHNV)第13页
        1.1.4 黄头病毒(yellow head virus,YHV)第13-14页
    1.2 分子生物学方法在白斑综合征病毒检测中的应用第14-16页
        1.2.1 等温扩增技术第14-16页
        1.2.2 聚合酶链反应技术(Polymerase Chain Reaction,PCR)第16页
    1.3 环介导等温扩增产物几种鉴定方法第16-20页
        1.3.1 染料法第16-18页
        1.3.2 pH法第18页
        1.3.3 探针法第18-19页
        1.3.4 电泳法第19-20页
第二章 基于LAMP技术的对虾白斑综合征病毒现场快速高灵敏度检测试剂盒的评价第20-33页
    2.1 材料与方法第21-26页
        2.1.1 对虾和病料及仪器第21页
        2.1.2 对虾白斑综合征病毒现场快速高灵敏度检测试剂盒第21页
        2.1.3 标准参考组织样品DNA提取第21-22页
        2.1.4 标准参考组织样品感染状况确定第22-23页
        2.1.5 WSSV标准DNA样品的制备第23页
        2.1.6 参考组织样品试剂盒的检测第23-24页
        2.1.7 试剂盒性能参数的评价第24-26页
    2.2 实验结果第26-30页
        2.2.1 分析灵敏度第26-27页
        2.2.2 分析特异性第27-28页
        2.2.3 诊断灵敏度和诊断特异性第28-29页
        2.2.4 重复性第29页
        2.2.5 储存条件下的稳定性第29-30页
        2.2.6 运输条件下的稳定性第30页
    2.3 讨论第30-33页
第三章 检测试剂盒可视化染料的筛选第33-42页
    3.1 材料与方法第33-36页
        3.1.1 引物设计第33-34页
        3.1.2 标准品的制备第34-35页
        3.1.3 可视化WSSV-LAMP反应条件第35-36页
        3.1.4 HNB浓度的优化第36页
        3.1.5 Caclein/MnCl2浓度的优化第36页
        3.1.6 两种染料的WSSV-LAMP体系分析灵敏度比较第36页
    3.2 实验结果第36-39页
        3.2.1 HNB浓度的优化结果第36-37页
        3.2.2 Caclein/MnCl2浓度的优化第37-38页
        3.2.3 不同可视化染料试剂盒分析灵敏度比较第38页
        3.2.4 其它第38-39页
    3.3 讨论第39-42页
第四章 探针法双重LAMP的建立第42-50页
    4.1 材料与方法第42-44页
        4.1.1 探针的建立第42-43页
        4.1.2 duplex-LAMP反应体系和程序第43-44页
        4.1.3 duplex-LAMP分析灵敏度验证第44页
        4.1.4 duplex-LAMP分析特异性验证第44页
    4.2 实验结果第44-47页
        4.2.1 duplex-LAMP分析灵敏度验证第44-45页
        4.2.2 duplex-LAMP分析特异性验证第45-46页
        4.2.3 探针法与染料法分析灵敏度对比第46-47页
    4.3 讨论第47-50页
参考文献第50-57页
致谢第57页

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