| 前言 | 第11-13页 |
| 第一篇 文献综述 | 第13-37页 |
| 第一章 流感病毒诱导细胞凋亡的研究进展 | 第13-20页 |
| 第二章 A 型流感病毒NS1A 蛋白的研究进展 | 第20-27页 |
| 第三章 流感病毒非结构蛋白NS1 胞内抗病毒反应研究进展 | 第27-37页 |
| 第二篇 研究内容 | 第37-98页 |
| 第一章 H9N2亚型禽流感病毒非结构蛋白NS1A基因的克隆与序列分析 | 第37-62页 |
| 1 材料与方法 | 第38-48页 |
| 1.1 材料 | 第38-40页 |
| 1.2 方法 | 第40-48页 |
| 2 结果 | 第48-57页 |
| 2.1 总RNA 提取 | 第48页 |
| 2.2 RT-PCR 扩增结果 | 第48-49页 |
| 2.3 NS1A 重组质粒酶切鉴定 | 第49-50页 |
| 2.4 重组克隆载体pMD-18-T-NS1A 序列测定与分析 | 第50-57页 |
| 3 讨论 | 第57-61页 |
| 3.1 RNA 提取 | 第57页 |
| 3.2 RT-PCR 反应 | 第57-59页 |
| 3.3 克隆载体的选择 | 第59-60页 |
| 3.4 阳性物筛选与鉴定 | 第60-61页 |
| 3.5 NS1A 基因克隆方法的选择 | 第61页 |
| 3.6 同源性分析 | 第61页 |
| 4 小结 | 第61-62页 |
| 第二章 NS1A 在大肠杆菌中的表达及其多克隆抗体的制备 | 第62-78页 |
| 1 材料与方法 | 第62-67页 |
| 1.1 材料 | 第62-63页 |
| 1.2 方法 | 第63-67页 |
| 2 结果 | 第67-71页 |
| 2.1 重组质粒的酶切 | 第67页 |
| 2.2 NS1A 基因在宿主菌中的表达 | 第67-69页 |
| 2.3 包涵体的制备与纯化 | 第69-71页 |
| 2.4 间接ELISA 检测抗体效价 | 第71页 |
| 2.5 Western blot 检测 | 第71页 |
| 3 讨论 | 第71-76页 |
| 3.1 NS1A 基因在原核系统中的表达 | 第71-72页 |
| 3.2 表达条件的优化 | 第72-73页 |
| 3.3 包涵体的制备与纯化 | 第73-74页 |
| 3.4 多克隆抗血清的制备 | 第74-75页 |
| 3.5 抗体效价及特异性的检测 | 第75-76页 |
| 4 小结 | 第76-78页 |
| 第三章 NS1A 真核表达载体的构建及真核转染对Hela 细胞的影响 | 第78-98页 |
| 1 材料与方法 | 第78-88页 |
| 1.1 材料 | 第78页 |
| 1.2 方法 | 第78-88页 |
| 2 结果 | 第88-93页 |
| 2.1 NS1A 真核表达载体的构建 | 第88-89页 |
| 2.2 NS1A 转染HeLa 细胞系的ELISA 检测 | 第89页 |
| 2.3 NS1A 转染HeLa 细胞系的普通光学显微镜观察 | 第89页 |
| 2.4 NS1A 转染HeLa 细胞系的细胞计数 | 第89页 |
| 2.5 NS1A 转染HeLa 细胞系的MTT 检测 | 第89-90页 |
| 2.6 NS1A 转染HeLa 细胞系的荧光显微镜观察 | 第90-91页 |
| 2.7 NS1A 真核表达产物的Western blot 检测 | 第91-92页 |
| 2.8 NS1A 真核转染HeLa 细胞的流式细胞仪检测 | 第92-93页 |
| 3 讨论 | 第93-97页 |
| 3.1 NS1A 真核表达载体的构建及在HeLa 细胞中的表达 | 第93-94页 |
| 3.2 NS1A 蛋白对HeLa 细胞凋亡的影响 | 第94-95页 |
| 3.3 NS1A 蛋白诱导HeLa 细胞凋亡的可能机制分析 | 第95-97页 |
| 4 小结 | 第97-98页 |
| 结论 | 第98-99页 |
| 参考文献 | 第99-109页 |
| 附录 | 第109-110页 |
| 攻博期间发表的学术论文及其他成果 | 第110-111页 |
| 中文摘要 | 第111-113页 |
| 英文摘要 | 第113页 |
| 个人简历 | 第116-118页 |
| 致谢 | 第118页 |
