采用花序浸染法将线性基因表达框导入拟南芥
| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-11页 |
| 引言 | 第11-12页 |
| 1 文献综述 | 第12-24页 |
| ·转基因植物的发展现状和安全性争议 | 第12-14页 |
| ·转基因植物的发展现状 | 第12页 |
| ·转基因植物的安全性争议 | 第12-13页 |
| ·可能影响转基因植物安全性的因素 | 第13-14页 |
| ·解决转基因植物安全性隐患的策略 | 第14-18页 |
| ·选择标记安全性隐患的解决策略 | 第14-16页 |
| ·载体骨架序列安全性隐患的解决策略 | 第16-17页 |
| ·无载体无标记的线性DNA直接转化 | 第17-18页 |
| ·拟南芥的遗传转化研究 | 第18-22页 |
| ·拟南芥在遗传学研究中的应用 | 第18-19页 |
| ·拟南芥的遗传转化方法的发展 | 第19-20页 |
| ·农杆菌介导的花序浸染法的转化机理 | 第20-22页 |
| ·本实验研究的目的和意义 | 第22-24页 |
| 2 拟南芥花序浸染法转化体系的建立 | 第24-47页 |
| ·实验材料 | 第24-26页 |
| ·实验材料 | 第24页 |
| ·实验仪器 | 第24-25页 |
| ·实验试剂 | 第25-26页 |
| ·引物 | 第26页 |
| ·实验方法 | 第26-38页 |
| ·工程菌的保存、培养和鉴定 | 第26-27页 |
| ·拟南芥的培养 | 第27-28页 |
| ·拟南芥的卡那霉素敏感性测试 | 第28页 |
| ·农杆菌介导的花序浸染法转化拟南芥 | 第28-29页 |
| ·卡那霉素筛选T_0代种子 | 第29页 |
| ·阳性植株移栽方法改进 | 第29页 |
| ·T_0代抗性植株的GUS组织化学染色 | 第29-30页 |
| ·T_0代抗性植株的PCR检测 | 第30-32页 |
| ·拟南芥Southern杂交体系建立与优化 | 第32-37页 |
| ·T_1代转基因植株Southern杂交检测 | 第37-38页 |
| ·T_1代转基因植株遗传分析 | 第38页 |
| ·结果与分析 | 第38-45页 |
| ·工程菌的鉴定 | 第38-39页 |
| ·拟南芥对卡那霉素的敏感性 | 第39-40页 |
| ·转化率统计与分析 | 第40页 |
| ·阳性植株移栽方法改进 | 第40-41页 |
| ·T_0代抗性植株的GUS组织化学染色 | 第41页 |
| ·T_0代抗性植株的PCR检测 | 第41-42页 |
| ·拟南芥Southern杂交体系优化 | 第42-43页 |
| ·T_1代转基因植株Southern杂交检测 | 第43-45页 |
| ·T_1代转基因植株遗传分析 | 第45页 |
| ·讨论 | 第45-46页 |
| ·小结 | 第46-47页 |
| 3 采用花序浸染法将质粒导入拟南芥 | 第47-55页 |
| ·实验材料 | 第47页 |
| ·实验材料 | 第47页 |
| ·实验仪器和试剂 | 第47页 |
| ·实验方法 | 第47-49页 |
| ·工程菌的保存、培养和鉴定 | 第47页 |
| ·转化用质粒大量提取 | 第47-48页 |
| ·通过花序浸染法将质粒DNA转化拟南芥 | 第48页 |
| ·卡那霉素筛选T_0代种子 | 第48页 |
| ·T_0代抗性植株叶片GUS组织化学染色 | 第48页 |
| ·T_0代抗性植株PCR检测 | 第48页 |
| ·T_1代转基因植株Southern杂交检测 | 第48-49页 |
| ·T_1代转基因植株遗传分析 | 第49页 |
| ·结果与分析 | 第49-53页 |
| ·工程菌的鉴定 | 第49页 |
| ·转化所用质粒 | 第49-50页 |
| ·转化率统计与分析 | 第50页 |
| ·抗性植株叶片GUS组织化学染色 | 第50-51页 |
| ·T_0代抗性植株PCR检测 | 第51页 |
| ·T_1代转基因植株Southern杂交检测 | 第51-52页 |
| ·T_1代转基因植株遗传分析 | 第52-53页 |
| ·讨论 | 第53-54页 |
| ·小结 | 第54-55页 |
| 4 采用花序浸染法将NPTⅡ基因表达框导入拟南芥 | 第55-64页 |
| ·实验材料 | 第55页 |
| ·实验方法 | 第55-57页 |
| ·引物的设计和合成 | 第55页 |
| ·构建和制备NPTⅡ基因表达框 | 第55-56页 |
| ·NPTⅡ基因表达框导入拟南芥 | 第56-57页 |
| ·转化率统计与分析 | 第57页 |
| ·T_0代抗性植株叶片GUS组织化学染色 | 第57页 |
| ·T_0代抗性植株PCR检测 | 第57页 |
| ·T_1代转基因植株Southern杂交检测 | 第57页 |
| ·T_1代转基因植株遗传分析 | 第57页 |
| ·结果与分析 | 第57-62页 |
| ·NPTⅡ基因表达框的制备 | 第57-58页 |
| ·转化率统计与分析 | 第58-59页 |
| ·T_0代抗性植株叶片GUS组织化学染色 | 第59-60页 |
| ·T_0代抗性植株的PCR检测 | 第60页 |
| ·T_1代转基因植株Southern杂交检测 | 第60-61页 |
| ·T_1代转基因植株遗传分析 | 第61-62页 |
| ·讨论 | 第62-63页 |
| ·小结 | 第63-64页 |
| 结论 | 第64-65页 |
| 展望 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-71页 |
| 附录A 营养液配方 | 第71-73页 |
| 附录B 缩略语 | 第73-74页 |
| 附录C 电泳用DNA Marker | 第74-75页 |
| 攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第75-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
