缩写词 | 第10-14页 |
中文摘要 | 第14-16页 |
英文摘要 | 第16页 |
0 前言 | 第20-24页 |
1 文献综述 | 第24-42页 |
1.1 植物雄性不育的类型 | 第24-25页 |
1.2 植物雄性不育的生理生化研究 | 第25-30页 |
1.2.1 激素与植物雄性不育 | 第25-28页 |
1.2.1.1 生长素与雄性不育 | 第25页 |
1.2.1.2 GAs与雄性不育 | 第25-26页 |
1.2.1.3 细胞分裂素与雄性不育 | 第26页 |
1.2.1.4 ABA与雄性不育 | 第26页 |
1.2.1.5 乙烯与雄性不育 | 第26-28页 |
1.2.2 物质代谢与植物雄性不育 | 第28-29页 |
1.2.3 植物雄性不育与能量代谢 | 第29-30页 |
1.3 植物雄性不育的细胞学与分子生物学研究 | 第30-38页 |
1.3.1 药壁与雄性不育的关系 | 第30-33页 |
1.3.2 花药发育的特异基因的研究 | 第33-38页 |
1.3.2.1 绒毡层特异性基因的研究 | 第33-35页 |
1.3.2.2 花药发育特异基因的研究 | 第35-38页 |
1.4 cDNA-AFLP技术及其应用 | 第38-42页 |
1.4.1 cDNA-AFLP技术的原理与方法 | 第38-39页 |
1.4.2 cDNA-AFLP技术的特点 | 第39-40页 |
1.4.3 cDNA-AFLP技术的应用 | 第40-42页 |
1.4.3.1 基因表达特性的研究 | 第40页 |
1.4.3.2 遗传标记分析 | 第40页 |
1.4.3.3 分离特异表达的基因 | 第40-42页 |
2 材料与方法 | 第42-54页 |
2.1 白菜核不育两用系生理生化指标的测定 | 第42-44页 |
2.1.1 植物材料 | 第42页 |
2.1.2 植株性状调查 | 第42页 |
2.1.3 可育株与不育株的叶绿素含量、光合作用、呼吸速率和抗氰呼吸强度的测定 | 第42-43页 |
2.1.4 可育株系与不育株系过氧化物酶和细胞色素氧化酶同工酶电泳分析 | 第43页 |
2.1.5 SDS-PAGE凝胶电泳分析 | 第43-44页 |
2.1.6 白菜核雄性不育两用系植株激素的测定 | 第44页 |
2.2 白菜核不育两用系的植株再生 | 第44-46页 |
2.2.1 实验材料 | 第44-45页 |
2.2.2 外植体获得及培养条件 | 第45页 |
2.2.3 外植体消毒 | 第45页 |
2.2.4 培养基的组成 | 第45页 |
2.2.5 外植体愈伤组织形成和芽的再生 | 第45页 |
2.2.6 再生苗的生根培养 | 第45-46页 |
2.3 cDNA-AFLP分析及相关基因的表达特征分析和分离 | 第46-54页 |
2.3.1 实验材料 | 第46-47页 |
2.3.2 RNA的分离及检测 | 第47-48页 |
2.3.3 cDNA-AFLP技术 | 第48-51页 |
2.3.3.1 cDNA的合成 | 第48-49页 |
2.3.3.2 cDNA酶切、连接 | 第49页 |
2.3.3.3 模板的预扩增和选择性扩增 | 第49页 |
2.3.3.4 测序胶电泳 | 第49-50页 |
2.3.3.5 银染方法 | 第50-51页 |
2.3.4 Northern杂交 | 第51页 |
2.3.5 RT-PCR检测 | 第51页 |
2.3.6 差异条带的回收、克隆和测序 | 第51-52页 |
2.3.7 RACE技术扩增基因全长 | 第52-53页 |
2.3.8 cDNA全长序列和基因组全长的获得 | 第53页 |
2.3.9 基因全长的分析 | 第53-54页 |
3 白菜核不育两用系可育株系与不育株系生理生化特性的比较分析 | 第54-58页 |
3.1 不育株系和可育株系植株性状的比较 | 第54页 |
3.2 不育株系与可育株系之间叶绿素、光合强度和呼吸强度的比较 | 第54-56页 |
3.3 不育株系与可育株系的生化特性比较 | 第56-58页 |
3.3.1 不育株系与可育株系过氧化物同工酶和细胞色素氧化酶同工酶分析 | 第56页 |
3.3.2 不育株系与可育株系可溶性蛋白SDS-PAGE电泳分析 | 第56-57页 |
3.3.3 不育株系与可育株系激素含量分析 | 第57-58页 |
4 白菜核不育两用系可育株与不育株外植体再生差异比较 | 第58-64页 |
4.1 不同消毒处理对花柄外植体消毒的影响 | 第58-59页 |
4.2 6-BA和NAA配比对花柄外植体芽再生的影响 | 第59-60页 |
4.3 再生芽(苗)的玻璃化和现蕾开花 | 第60-61页 |
4.4 添加AgNO_3和NAA对花柄外植体再生苗诱导生根的影响 | 第61页 |
4.5 可育株系与不育株系花茎组织培养的比较 | 第61-64页 |
5 利用cDNA-AFLP技术分析白菜核不育两用系的表达差异 | 第64-70页 |
5.1 RNA的提取与检测 | 第64-65页 |
5.2 cDNA的合成 | 第65页 |
5.3 cDNA-AFLP技术预扩增和选择性扩增体系的优化 | 第65-67页 |
5.3.1 预扩增退火温度的选择 | 第65-66页 |
5.3.2 预扩增循环次数的选择 | 第66页 |
5.3.3 cDNA-AFLP技术预扩增和选择性扩增体系中Mg~(2+)浓度的选择 | 第66-67页 |
5.4 cDNA-AFLP技术对白菜核不育两用系表达差异的分析 | 第67-68页 |
5.4.1 cDNA-AFLP技术分析分析育性相关基因在不同器官的表达差异 | 第67页 |
5.4.2 可育株系与不育株系不同时期花蕾的cDNA-AFLP分析 | 第67-68页 |
5.4.3 表达特异条带的Northern分析 | 第68页 |
5.5 不同发育时期不同部位基因表达差异分析 | 第68-70页 |
6 白菜小孢子发育相关基因BCMF1的表达特征、分离和分析 | 第70-86页 |
6.1 可育株系特异BCMF-A15T17基因片段的获得 | 第70页 |
6.2 BCMF-A15T17基因片段的回收与克隆 | 第70-71页 |
6.3 与BCMF-A15T17片段相关基因在不同发育时期、不同器官的表达分析 | 第71-72页 |
6.4 与BCMF-A15T17片段相关的基因的cDNA全长的获得 | 第72-78页 |
6.4.1 BCMF-A15T17测序 | 第72页 |
6.4.2 与BCMF-A15T17片段相关的基因的cDNA的3’末端的获得 | 第72-73页 |
6.4.3 与BCMF-A15T17片段相关基因的cDNA的5’末端的获得 | 第73-74页 |
6.4.4 与BCMF-A15T17片段相关的基因(BCMF1)的cDNA的全长序列的拼接 | 第74-77页 |
6.4.5 BCMF1 cDNA全长序列的PCR扩增 | 第77-78页 |
6.5 基因组中BCMF1基因全长的获得 | 第78-79页 |
6.6 BCMF1基因序列分析 | 第79-86页 |
6.6.1 BCMF1基因DNA序列与cDNA序列的对比分析 | 第79-81页 |
6.6.2 BCMF1的ORF及其氨基酸序列的预测 | 第81页 |
6.6.3 BCMF1编码的蛋白质同源性搜索 | 第81-83页 |
6.6.4 BCMF1编码的蛋白质的定位分析 | 第83-84页 |
6.6.5 BCMF1编码的蛋白质的基本特征分析 | 第84-86页 |
7 白菜小孢子发育相关基因BCMF2的表达特征、分离和分析 | 第86-96页 |
7.1 可育株系特异BCMF-A18T16-1基因片段的获得 | 第86页 |
7.2 BCMF-A18T16-1基因片段的回收与克隆 | 第86-87页 |
7.3 与BCMF-A18T16-1片段相关的基因在不同发育时期、不同器官的表达分析 | 第87-88页 |
7.4 与BCMF-A18T16-1片段相关的基因的cDNA全长的获得 | 第88-91页 |
7.4.1 pBCMF-A18T16-1的克隆测序 | 第88页 |
7.4.2 与BCMF-A18T16-1片段相关的基因的cDNA的3’末端的获得 | 第88-89页 |
7.4.3 与BCMF-A18T16-1片段相关的基因的cDNA的5’末端的获得 | 第89-90页 |
7.4.4 与BCMF-A18T16-1片段相关的基因(BCMF2)的cDNA的全长序列的拼接 | 第90-91页 |
7.5 BCMF2基因的cDNA全长序列的分析 | 第91-94页 |
7.6 BCMF2编码的蛋白质的基本特征分析 | 第94-96页 |
8 白菜小孢子发育相关基因BCMF3的表达特征、分离和分析 | 第96-108页 |
8.1 可育株系特异BCMF-A18T16-2基因片段的获得 | 第96页 |
8.2 BCMF-A18T16-2基因片段的回收与克隆 | 第96-97页 |
8.3 与BCMF-A18T16-2片段相关的基因的cDNA全长的获得 | 第97-101页 |
8.3.1 pBCMF-A18T16-2的克隆测序 | 第97页 |
8.3.2 与BCMF-A18T16-2片段相关的基因的cDNA的3’末端的获得 | 第97-98页 |
8.3.3 与BCMF-A18T16-2片段相关的基因的cDNA的5’末端的获得 | 第98-100页 |
8.3.4 与BCMF-A18T16-2片段相关的基因(BCMF3)的cDNA全长序列的拼接 | 第100-101页 |
8.4 BCMF3基因不同发育时期、不同器官的表达分析 | 第101-102页 |
8.5 BCMF3基因的cDNA全长序列分析 | 第102-105页 |
8.6 BCMF3编码的蛋白质的基本特征分析 | 第105-108页 |
9 白菜小孢子发育相关基因BCMF4的表达特征、分离和分析 | 第108-116页 |
9.1 可育株系特异条带BCMF-A17T14的获得 | 第108页 |
9.2 BCMF-A17T14基因片段的回收与克隆 | 第108-109页 |
9.3 与BCMF-A17T14片段相关的基因在不同发育时期、不同器官的表达分析 | 第109-110页 |
9.4 与BCMF-A17T14片段相关的基因的cDNA全长的获得 | 第110-112页 |
9.4.1 pBCMF4克隆测序 | 第110页 |
9.4.2 与BCMF-A17T14片段相关的基因3’末端的获得 | 第110-111页 |
9.4.3 与BCMF-A17T14片段相关的基因5’末端的获得 | 第111-112页 |
9.4.4 与BCMF-A15T17片段相关的基因(BCMF4)cDNA全长的拼接 | 第112页 |
9.5 BCMF4基因序列分析 | 第112-114页 |
9.6 BCMF4编码的蛋白质的基本特征 | 第114-116页 |
10 讨论 | 第116-126页 |
10.1 植物雄性不育株高与抗氰呼吸的关系 | 第116页 |
10.2 植物雄性不育与激素的关系 | 第116页 |
10.3 植物雄性不育与过氧化物同工酶和细胞色素氧化酶同工酶的关系 | 第116-117页 |
10.4 激素配比对不育株与可育株花茎愈伤组织分化和花柄外植体芽再生的影响 | 第117-118页 |
10.5 白菜再生芽(苗)的玻璃化现象 | 第118页 |
10.6 白菜再生苗的现蕾开花现象 | 第118-119页 |
10.7 利用cDNA-AFLP技术分析基因的表达差异的可行性 | 第119页 |
10.8 BCMF1基因剪接及其功能推测 | 第119-120页 |
10.9 BCMF2基因与小孢子发育的关系 | 第120-121页 |
10.10 BCMF3与小孢子发育的关系 | 第121页 |
10.11 BCMF4与小孢子发育的关系 | 第121-122页 |
10.12 BCMF1、BCMF2、BCMF3和BCMF4与白菜小孢子发育的关系 | 第122-126页 |
参考文献 | 第126-136页 |
博士期间发表的论文及论著 | 第136页 |