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白菜核不育两用系育性基因表达特征分析及其小孢子发育相关基因的分离

缩写词第10-14页
中文摘要第14-16页
英文摘要第16页
0 前言第20-24页
1 文献综述第24-42页
    1.1 植物雄性不育的类型第24-25页
    1.2 植物雄性不育的生理生化研究第25-30页
        1.2.1 激素与植物雄性不育第25-28页
            1.2.1.1 生长素与雄性不育第25页
            1.2.1.2 GAs与雄性不育第25-26页
            1.2.1.3 细胞分裂素与雄性不育第26页
            1.2.1.4 ABA与雄性不育第26页
            1.2.1.5 乙烯与雄性不育第26-28页
        1.2.2 物质代谢与植物雄性不育第28-29页
        1.2.3 植物雄性不育与能量代谢第29-30页
    1.3 植物雄性不育的细胞学与分子生物学研究第30-38页
        1.3.1 药壁与雄性不育的关系第30-33页
        1.3.2 花药发育的特异基因的研究第33-38页
            1.3.2.1 绒毡层特异性基因的研究第33-35页
            1.3.2.2 花药发育特异基因的研究第35-38页
    1.4 cDNA-AFLP技术及其应用第38-42页
        1.4.1 cDNA-AFLP技术的原理与方法第38-39页
        1.4.2 cDNA-AFLP技术的特点第39-40页
        1.4.3 cDNA-AFLP技术的应用第40-42页
            1.4.3.1 基因表达特性的研究第40页
            1.4.3.2 遗传标记分析第40页
            1.4.3.3 分离特异表达的基因第40-42页
2 材料与方法第42-54页
    2.1 白菜核不育两用系生理生化指标的测定第42-44页
        2.1.1 植物材料第42页
        2.1.2 植株性状调查第42页
        2.1.3 可育株与不育株的叶绿素含量、光合作用、呼吸速率和抗氰呼吸强度的测定第42-43页
        2.1.4 可育株系与不育株系过氧化物酶和细胞色素氧化酶同工酶电泳分析第43页
        2.1.5 SDS-PAGE凝胶电泳分析第43-44页
        2.1.6 白菜核雄性不育两用系植株激素的测定第44页
    2.2 白菜核不育两用系的植株再生第44-46页
        2.2.1 实验材料第44-45页
        2.2.2 外植体获得及培养条件第45页
        2.2.3 外植体消毒第45页
        2.2.4 培养基的组成第45页
        2.2.5 外植体愈伤组织形成和芽的再生第45页
        2.2.6 再生苗的生根培养第45-46页
    2.3 cDNA-AFLP分析及相关基因的表达特征分析和分离第46-54页
        2.3.1 实验材料第46-47页
        2.3.2 RNA的分离及检测第47-48页
        2.3.3 cDNA-AFLP技术第48-51页
            2.3.3.1 cDNA的合成第48-49页
            2.3.3.2 cDNA酶切、连接第49页
            2.3.3.3 模板的预扩增和选择性扩增第49页
            2.3.3.4 测序胶电泳第49-50页
            2.3.3.5 银染方法第50-51页
        2.3.4 Northern杂交第51页
        2.3.5 RT-PCR检测第51页
        2.3.6 差异条带的回收、克隆和测序第51-52页
        2.3.7 RACE技术扩增基因全长第52-53页
        2.3.8 cDNA全长序列和基因组全长的获得第53页
        2.3.9 基因全长的分析第53-54页
3 白菜核不育两用系可育株系与不育株系生理生化特性的比较分析第54-58页
    3.1 不育株系和可育株系植株性状的比较第54页
    3.2 不育株系与可育株系之间叶绿素、光合强度和呼吸强度的比较第54-56页
    3.3 不育株系与可育株系的生化特性比较第56-58页
        3.3.1 不育株系与可育株系过氧化物同工酶和细胞色素氧化酶同工酶分析第56页
        3.3.2 不育株系与可育株系可溶性蛋白SDS-PAGE电泳分析第56-57页
        3.3.3 不育株系与可育株系激素含量分析第57-58页
4 白菜核不育两用系可育株与不育株外植体再生差异比较第58-64页
    4.1 不同消毒处理对花柄外植体消毒的影响第58-59页
    4.2 6-BA和NAA配比对花柄外植体芽再生的影响第59-60页
    4.3 再生芽(苗)的玻璃化和现蕾开花第60-61页
    4.4 添加AgNO_3和NAA对花柄外植体再生苗诱导生根的影响第61页
    4.5 可育株系与不育株系花茎组织培养的比较第61-64页
5 利用cDNA-AFLP技术分析白菜核不育两用系的表达差异第64-70页
    5.1 RNA的提取与检测第64-65页
    5.2 cDNA的合成第65页
    5.3 cDNA-AFLP技术预扩增和选择性扩增体系的优化第65-67页
        5.3.1 预扩增退火温度的选择第65-66页
        5.3.2 预扩增循环次数的选择第66页
        5.3.3 cDNA-AFLP技术预扩增和选择性扩增体系中Mg~(2+)浓度的选择第66-67页
    5.4 cDNA-AFLP技术对白菜核不育两用系表达差异的分析第67-68页
        5.4.1 cDNA-AFLP技术分析分析育性相关基因在不同器官的表达差异第67页
        5.4.2 可育株系与不育株系不同时期花蕾的cDNA-AFLP分析第67-68页
        5.4.3 表达特异条带的Northern分析第68页
    5.5 不同发育时期不同部位基因表达差异分析第68-70页
6 白菜小孢子发育相关基因BCMF1的表达特征、分离和分析第70-86页
    6.1 可育株系特异BCMF-A15T17基因片段的获得第70页
    6.2 BCMF-A15T17基因片段的回收与克隆第70-71页
    6.3 与BCMF-A15T17片段相关基因在不同发育时期、不同器官的表达分析第71-72页
    6.4 与BCMF-A15T17片段相关的基因的cDNA全长的获得第72-78页
        6.4.1 BCMF-A15T17测序第72页
        6.4.2 与BCMF-A15T17片段相关的基因的cDNA的3’末端的获得第72-73页
        6.4.3 与BCMF-A15T17片段相关基因的cDNA的5’末端的获得第73-74页
        6.4.4 与BCMF-A15T17片段相关的基因(BCMF1)的cDNA的全长序列的拼接第74-77页
        6.4.5 BCMF1 cDNA全长序列的PCR扩增第77-78页
    6.5 基因组中BCMF1基因全长的获得第78-79页
    6.6 BCMF1基因序列分析第79-86页
        6.6.1 BCMF1基因DNA序列与cDNA序列的对比分析第79-81页
        6.6.2 BCMF1的ORF及其氨基酸序列的预测第81页
        6.6.3 BCMF1编码的蛋白质同源性搜索第81-83页
        6.6.4 BCMF1编码的蛋白质的定位分析第83-84页
        6.6.5 BCMF1编码的蛋白质的基本特征分析第84-86页
7 白菜小孢子发育相关基因BCMF2的表达特征、分离和分析第86-96页
    7.1 可育株系特异BCMF-A18T16-1基因片段的获得第86页
    7.2 BCMF-A18T16-1基因片段的回收与克隆第86-87页
    7.3 与BCMF-A18T16-1片段相关的基因在不同发育时期、不同器官的表达分析第87-88页
    7.4 与BCMF-A18T16-1片段相关的基因的cDNA全长的获得第88-91页
        7.4.1 pBCMF-A18T16-1的克隆测序第88页
        7.4.2 与BCMF-A18T16-1片段相关的基因的cDNA的3’末端的获得第88-89页
        7.4.3 与BCMF-A18T16-1片段相关的基因的cDNA的5’末端的获得第89-90页
        7.4.4 与BCMF-A18T16-1片段相关的基因(BCMF2)的cDNA的全长序列的拼接第90-91页
    7.5 BCMF2基因的cDNA全长序列的分析第91-94页
    7.6 BCMF2编码的蛋白质的基本特征分析第94-96页
8 白菜小孢子发育相关基因BCMF3的表达特征、分离和分析第96-108页
    8.1 可育株系特异BCMF-A18T16-2基因片段的获得第96页
    8.2 BCMF-A18T16-2基因片段的回收与克隆第96-97页
    8.3 与BCMF-A18T16-2片段相关的基因的cDNA全长的获得第97-101页
        8.3.1 pBCMF-A18T16-2的克隆测序第97页
        8.3.2 与BCMF-A18T16-2片段相关的基因的cDNA的3’末端的获得第97-98页
        8.3.3 与BCMF-A18T16-2片段相关的基因的cDNA的5’末端的获得第98-100页
        8.3.4 与BCMF-A18T16-2片段相关的基因(BCMF3)的cDNA全长序列的拼接第100-101页
    8.4 BCMF3基因不同发育时期、不同器官的表达分析第101-102页
    8.5 BCMF3基因的cDNA全长序列分析第102-105页
    8.6 BCMF3编码的蛋白质的基本特征分析第105-108页
9 白菜小孢子发育相关基因BCMF4的表达特征、分离和分析第108-116页
    9.1 可育株系特异条带BCMF-A17T14的获得第108页
    9.2 BCMF-A17T14基因片段的回收与克隆第108-109页
    9.3 与BCMF-A17T14片段相关的基因在不同发育时期、不同器官的表达分析第109-110页
    9.4 与BCMF-A17T14片段相关的基因的cDNA全长的获得第110-112页
        9.4.1 pBCMF4克隆测序第110页
        9.4.2 与BCMF-A17T14片段相关的基因3’末端的获得第110-111页
        9.4.3 与BCMF-A17T14片段相关的基因5’末端的获得第111-112页
        9.4.4 与BCMF-A15T17片段相关的基因(BCMF4)cDNA全长的拼接第112页
    9.5 BCMF4基因序列分析第112-114页
    9.6 BCMF4编码的蛋白质的基本特征第114-116页
10 讨论第116-126页
    10.1 植物雄性不育株高与抗氰呼吸的关系第116页
    10.2 植物雄性不育与激素的关系第116页
    10.3 植物雄性不育与过氧化物同工酶和细胞色素氧化酶同工酶的关系第116-117页
    10.4 激素配比对不育株与可育株花茎愈伤组织分化和花柄外植体芽再生的影响第117-118页
    10.5 白菜再生芽(苗)的玻璃化现象第118页
    10.6 白菜再生苗的现蕾开花现象第118-119页
    10.7 利用cDNA-AFLP技术分析基因的表达差异的可行性第119页
    10.8 BCMF1基因剪接及其功能推测第119-120页
    10.9 BCMF2基因与小孢子发育的关系第120-121页
    10.10 BCMF3与小孢子发育的关系第121页
    10.11 BCMF4与小孢子发育的关系第121-122页
    10.12 BCMF1、BCMF2、BCMF3和BCMF4与白菜小孢子发育的关系第122-126页
参考文献第126-136页
博士期间发表的论文及论著第136页

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