猪伪狂犬病病毒HeN1株gE蛋白单克隆抗体的制备及其抗原表位的鉴定
| 符号说明 | 第4-11页 |
| 摘要 | 第11-12页 |
| 英文摘要 | 第12页 |
| 1 文献综述 | 第13-26页 |
| 1.1 伪狂犬病 | 第13页 |
| 1.2 伪狂犬病毒生物学特性 | 第13-15页 |
| 1.2.1 病毒粒子结构 | 第13-14页 |
| 1.2.2 病毒基因组 | 第14-15页 |
| 1.3 囊膜糖蛋白 | 第15-18页 |
| 1.3.1 必需糖蛋白 | 第15-17页 |
| 1.3.2 非必需糖蛋白 | 第17-18页 |
| 1.4 gE糖蛋白的研究进展 | 第18-20页 |
| 1.4.1 gE糖蛋白的分子生物学特性 | 第18-19页 |
| 1.4.2 gE糖蛋白的抗原表位 | 第19页 |
| 1.4.3 gE糖蛋白的功能 | 第19-20页 |
| 1.4.4 gE糖蛋白在伪狂犬病根除计划中的意义 | 第20页 |
| 1.5 单克隆抗体的研究进展 | 第20-21页 |
| 1.5.1 单克隆抗体技术 | 第20-21页 |
| 1.5.2 单克隆抗体的特点 | 第21页 |
| 1.5.3 单克隆抗体的应用 | 第21页 |
| 1.6 伪狂犬病毒抗体的检测方法 | 第21-24页 |
| 1.6.1 中和试验 | 第21-22页 |
| 1.6.2 免疫沉淀试验 | 第22页 |
| 1.6.3 免疫荧光抗体技术 | 第22-23页 |
| 1.6.4 酶联免疫吸附试验 | 第23-24页 |
| 1.6.5 乳胶凝集试验 | 第24页 |
| 1.6.6 血凝抑制试验 | 第24页 |
| 1.6.7 免疫印迹 | 第24页 |
| 1.7 研究的目的及意义 | 第24-26页 |
| 2 材料与方法 | 第26-44页 |
| 2.1 实验材料 | 第26-29页 |
| 2.1.1 实验动物 | 第26页 |
| 2.1.2 病毒、菌株、细胞及质粒 | 第26页 |
| 2.1.3 主要试剂及试剂盒 | 第26-28页 |
| 2.1.4 主要仪器设备 | 第28-29页 |
| 2.2 试验方法 | 第29-44页 |
| 2.2.1 rgE的表达、纯化及鉴定 | 第29-30页 |
| 2.2.2 gE的真核表达 | 第30-31页 |
| 2.2.3 间接免疫荧光（IFA）检测方法的建立 | 第31页 |
| 2.2.4 BALB/c小鼠的免疫 | 第31-32页 |
| 2.2.5 杂交瘤细胞株的筛选 | 第32-34页 |
| 2.2.6 单克隆抗体腹水的制备 | 第34页 |
| 2.2.7 单克隆抗体特异性的鉴定 | 第34-35页 |
| 2.2.8 单克隆抗体效价的测定 | 第35-36页 |
| 2.2.9 单克隆抗体生物学特性的鉴定 | 第36-37页 |
| 2.2.10 抗原表位分析鉴定流程 | 第37-38页 |
| 2.2.11 抗原表位的初步鉴定 | 第38-41页 |
| 2.2.12 抗原表位的精确鉴定 | 第41-43页 |
| 2.2.13 抗原表位的序列比对 | 第43-44页 |
| 3 结果与分析 | 第44-54页 |
| 3.1 rgE的表达鉴定 | 第44页 |
| 3.2 IFA血清鉴定 | 第44-45页 |
| 3.3 细胞融合及阳性杂交瘤株的筛选 | 第45页 |
| 3.4 单克隆抗体特异性的鉴定 | 第45-46页 |
| 3.5 单克隆抗体效价的测定 | 第46-48页 |
| 3.5.1 杂交瘤细胞培养上清的效价测定 | 第46-47页 |
| 3.5.2 腹水的效价测定 | 第47-48页 |
| 3.6 单克隆抗体生物学特性的鉴定 | 第48-50页 |
| 3.6.1 杂交瘤细胞抗体分泌稳定性的鉴定 | 第48-49页 |
| 3.6.2 单克隆抗体Ig亚类的鉴定 | 第49页 |
| 3.6.3 单克隆抗体中和活性的测定 | 第49-50页 |
| 3.7 gE2基因片段的PCR扩增 | 第50页 |
| 3.8 重组质粒的PCR鉴定 | 第50-51页 |
| 3.9 单克隆抗体抗原区域的鉴定 | 第51-53页 |
| 3.9.1 抗原表位的初步鉴定 | 第51页 |
| 3.9.2 抗原表位的精确鉴定 | 第51-53页 |
| 3.10 单克隆抗体抗原表位的序列比对 | 第53-54页 |
| 4 讨论 | 第54-57页 |
| 5 结论 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-68页 |
| 附录 各种培养液及溶液的配制 | 第68-70页 |
| 致谢 | 第70-72页 |
| 个人简历 | 第72页 |
