| 摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 英文缩略表 | 第11-12页 |
| 第一章 PI3K/AKT信号通路研究进展 | 第12-19页 |
| 1.1 PI3K/AKT信号通路发现简史 | 第12页 |
| 1.2 PI3K/AKT的结构组成 | 第12-14页 |
| 1.2.1 PI3K/AKT的蛋白结构 | 第12-13页 |
| 1.2.2 AKT的变体 | 第13页 |
| 1.2.3 AKT的分布 | 第13-14页 |
| 1.3 PI3K/AKT信号通路的活化 | 第14页 |
| 1.4 PI3K/AKT的生物学功能 | 第14-16页 |
| 1.4.1 细胞增殖 | 第14-15页 |
| 1.4.2 细胞糖代谢 | 第15页 |
| 1.4.3 细胞保护 | 第15-16页 |
| 1.5 PI3K/AKT信号通路与肿瘤疾病 | 第16-18页 |
| 1.5.1 AKT与肿瘤增殖 | 第17页 |
| 1.5.2 AKT与肿瘤细胞凋亡 | 第17页 |
| 1.5.3 AKT与肿瘤迁移 | 第17-18页 |
| 1.6 PI3K/AKT信号通路与心脏疾病 | 第18-19页 |
| 第二章 ARC研究进展 | 第19-25页 |
| 2.1 ARC发现简史 | 第19页 |
| 2.2 ARC的定位 | 第19-20页 |
| 2.3 ARC结构 | 第20-21页 |
| 2.4 ARC与肿瘤疾病 | 第21-22页 |
| 2.4.1 ARC在肿瘤组织以及肿瘤细胞系的定位 | 第21页 |
| 2.4.2 ARC在肿瘤组织以及肿瘤细胞系的生物学功能 | 第21-22页 |
| 2.5 ARC与心脏疾病 | 第22-23页 |
| 2.6 ARC转录以及翻译后修饰 | 第23页 |
| 2.7 ARC抗凋亡的分子机制 | 第23-25页 |
| 第三章 鸡胚心肌细胞分离培养研究 | 第25-32页 |
| 3.1 研究背景 | 第25页 |
| 3.2 材料与方法 | 第25-28页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第25页 |
| 3.2.2 实验药品 | 第25-26页 |
| 3.2.3 实验仪器 | 第26页 |
| 3.2.4 原代鸡胚心肌细胞分离培养方法 | 第26-27页 |
| 3.2.5 Hela，293T细胞传代培养 | 第27页 |
| 3.2.6 心肌细胞的形态学观察 | 第27页 |
| 3.2.7 免疫细胞化学染色鉴定 | 第27-28页 |
| 3.3 结果 | 第28-30页 |
| 3.3.1 原代鸡胚心肌细胞培养的形态学观察 | 第28-29页 |
| 3.3.2 原代鸡胚心肌细胞免疫细胞化学染色鉴定 | 第29页 |
| 3.3.3 原代鸡胚心肌间接免疫荧光鉴定 | 第29-30页 |
| 3.3.4 Hela，293T细胞传代培养 | 第30页 |
| 3.4 讨论 | 第30-32页 |
| 第四章 ARC真核表达质粒的克隆与构建 | 第32-43页 |
| 4.1 研究背景 | 第32-33页 |
| 4.2 材料与方法 | 第33-39页 |
| 4.2.1 实验动物 | 第33页 |
| 4.2.2 实验材料 | 第33页 |
| 4.2.3 实验仪器 | 第33-34页 |
| 4.2.4 ARC基因的克隆 | 第34-36页 |
| 4.2.5 真核表达质粒P-IRES2-ARC-EGFP构建 | 第36-37页 |
| 4.2.6 大肠杆菌感受态的制备 | 第37-38页 |
| 4.2.7 真核表达质粒P-IRES2-ARC-EGFP转化 | 第38页 |
| 4.2.8 真核表达质粒P-IRES2-ARC-EGFP鉴定 | 第38页 |
| 4.2.9 真核表达质粒P-IRES2-ARC-EGFP、PEGFP-N1 中提 | 第38-39页 |
| 4.3 结果 | 第39-42页 |
| 4.3.1 ARC基因的克隆与鉴定 | 第39页 |
| 4.3.2 采用菌落PCR鉴定真核表达质粒P-IRES2-ARC-EGFP | 第39-40页 |
| 4.3.3 采用双酶切鉴定真核表达质粒P-IRES2-ARC-EGFP | 第40-41页 |
| 4.3.4 采用测序方法鉴定真核表达质粒P-IRES2-ARC-EGFP | 第41页 |
| 4.3.5 真核表达质粒P-IRES2-ARC-EGFP提取 | 第41-42页 |
| 4.4 讨论 | 第42-43页 |
| 第五章 PI3K/AKT信号通路在ARC保护细胞氧化损伤中的作用机制研究 | 第43-69页 |
| 5.1 研究背景 | 第43-44页 |
| 5.2 材料与方法 | 第44-50页 |
| 5.2.1 实验材料 | 第44-45页 |
| 5.2.2 原代鸡胚心肌细胞培养 | 第45页 |
| 5.2.3 Hela，293T细胞传代培养 | 第45页 |
| 5.2.4 H_2O_2诱导细胞氧化损伤模型的建立 | 第45-46页 |
| 5.2.5 细胞活力检测 | 第46页 |
| 5.2.6 真核表达质粒P-IRES2-ARC-EGFP转染方法及步骤 | 第46-47页 |
| 5.2.7 真核表达质粒P-IRES2-ARC-EGFP转染效率检测 | 第47-49页 |
| 5.2.8 实时荧光定量PCR | 第49-50页 |
| 5.2.9 蛋白免疫印迹 | 第50页 |
| 5.2.10 数据分析 | 第50页 |
| 5.3 结果 | 第50-65页 |
| 5.3.1 原代鸡胚心肌细胞培养 | 第50-51页 |
| 5.3.2 Hela，293T细胞传代培养 | 第51页 |
| 5.3.3 H_2O_2诱导细胞氧化损伤模型的建立 | 第51-53页 |
| 5.3.4 真核表达质粒P-IRES2-ARC-EGFP转染效率检测 | 第53-56页 |
| 5.3.5 ARC保护细胞氧化损伤 | 第56-58页 |
| 5.3.6 PI3K/AKT信号通路 | 第58-65页 |
| 5.4 讨论 | 第65-69页 |
| 5.4.1 ARC保护细胞氧化损伤 | 第65-66页 |
| 5.4.2 PI3K/AKT信号通路保护细胞氧化损伤 | 第66-67页 |
| 5.4.3 PI3K/AKT信号通路与ARC保护细胞氧化损伤的作用机制 | 第67-69页 |
| 参考文献 | 第69-83页 |
| 附录：溶液配制 | 第83-86页 |
| 致谢 | 第86页 |
