摘要 | 第2-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
符号说明 | 第9-10页 |
1 文献综述 | 第10-17页 |
1.1 叶色突变体的种类 | 第10页 |
1.2 叶色突变体的来源 | 第10-11页 |
1.3 叶色突变的遗传规律 | 第11-12页 |
1.4 叶色变异的分子机理 | 第12-14页 |
1.5 叶色突变体的实际应用 | 第14-15页 |
1.6 水稻叶色突变体的分子遗传学研究 | 第15-16页 |
1.6.1 分子标记、基因定位和图位克隆 | 第15页 |
1.6.2 水稻叶色突变体的基因定位 | 第15-16页 |
1.6.3 水稻叶色相关基因的克隆 | 第16页 |
1.7 本研究的目的和意义 | 第16-17页 |
2 材料与方法 | 第17-25页 |
2.1 实验材料 | 第17页 |
2.1.1 水稻材料 | 第17页 |
2.1.2 常用分子生物学试剂和药品 | 第17页 |
2.1.3 主要的实验设备 | 第17页 |
2.2 实验方法 | 第17-25页 |
2.2.1 农艺性状的测定 | 第17页 |
2.2.2 叶绿素含量的测定 | 第17-18页 |
2.2.3 透射电镜分析 | 第18-19页 |
2.2.4 水稻的光合指标的测定 | 第19页 |
2.2.5 水稻DNA的提取 | 第19页 |
2.2.6 普通PCR反应体系和程序 | 第19-20页 |
2.2.7 遗传群体的构建 | 第20页 |
2.2.8 目的基因的初步定位 | 第20页 |
2.2.9 目的基因的精细定位 | 第20-21页 |
2.2.10 生物信息学分析 | 第21页 |
2.2.11 琼脂糖凝胶回收DNA片段 | 第21页 |
2.2.12 RNA的抽提 | 第21-22页 |
2.2.13 RNA的纯化和反转录cDNA第一条链 | 第22-23页 |
2.2.14 半定量RT-PCR和荧光定量PCR(Real-time PCR)分析 | 第23页 |
2.2.15 水稻原生质体转化 | 第23页 |
2.2.16 目的蛋白的原核表达 | 第23-24页 |
2.2.17 载体构建和转基因水稻的获得 | 第24页 |
2.2.18 蒽酮比色法测定碳水化合物含量 | 第24-25页 |
3 结果与分析 | 第25-36页 |
3.1 黄叶突变体的叶色和农艺性状鉴定 | 第25-26页 |
3.2 黄叶突变体的叶绿体超显微结构观察 | 第26-27页 |
3.3 黄叶基因的初步定位 | 第27页 |
3.4 黄叶基因的精细定位 | 第27页 |
3.5 候选基因分析与确认 | 第27-28页 |
3.6 突变体yl1的转基因互补分析和敲除分析 | 第28-29页 |
3.7 目的基因YL1基因的组织特异性表达检测 | 第29-30页 |
3.8 YL1基因的亚细胞定位观察 | 第30-31页 |
3.9 光合作用和叶绿体发育相关基因的表达检测 | 第31页 |
3.10 突变体的光合作用生理指标的测定 | 第31-32页 |
3.11 YL1基因在不同物种中的系统进化树构建 | 第32-33页 |
3.12 YL1的编码区在水稻中进化过程中很保守 | 第33-34页 |
3.13 YL1可能是一个37KD大小的尿苷酸激酶 | 第34页 |
3.14 叶片碳水化合物合成和转运受到影响 | 第34-36页 |
4 讨论与小结 | 第36-38页 |
4.1 黄叶突变体y11的类囊体发育受阻 | 第36页 |
4.2 YL1是核编码的影响叶绿体发育的关键基因 | 第36页 |
4.3 叶绿体发育受阻负反馈调节核基因的表达 | 第36-37页 |
4.4 YL1中突变的精氨酸对该基因的功能起到关键作用 | 第37页 |
4.5 YL1的表达受光照调控 | 第37页 |
4.6 YL1基因是已报道的YGL8的等位基因 | 第37-38页 |
参考文献 | 第38-42页 |
附录 | 第42-44页 |
致谢 | 第44-45页 |