| 摘要 | 第4-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 常见英文缩写一览表（按照字母顺序） | 第14-16页 |
| 1 引言 | 第16-23页 |
| 1.1 DC肿瘤疫苗抗黑色素瘤治疗 | 第16-18页 |
| 1.2 TLR受体激动剂与DC肿瘤疫苗 | 第18-20页 |
| 1.3 HP-NAP简介 | 第20-21页 |
| 1.4 目的及意义 | 第21页 |
| 1.5 研究内容与方法 | 第21-22页 |
| 1.6 课题技术路线 | 第22-23页 |
| 2 HP-NAP对DC成熟的影响 | 第23-41页 |
| 2.1 仪器与材料 | 第23-26页 |
| 2.1.1 仪器设备 | 第23-24页 |
| 2.1.2 试剂与药品 | 第24页 |
| 2.1.3 细胞株 | 第24-25页 |
| 2.1.4 实验动物 | 第25页 |
| 2.1.5 工作液的配制 | 第25-26页 |
| 2.2 实验方法 | 第26-32页 |
| 2.2.1 HP-NAP的诱导表达及纯化 | 第26-27页 |
| 2.2.2 骨髓来源树突状细胞制备 | 第27-28页 |
| 2.2.3 流式细胞术检测DC表面成熟Marker表达 | 第28页 |
| 2.2.4 流式细胞术检测DC细胞内吞能力 | 第28-29页 |
| 2.2.5 B16F10细胞的复苏、培养、冻存及B16F10细胞裂解物的制备 | 第29页 |
| 2.2.6 qRT-PCR法检测DC细胞因子及MHC-I/II表达 | 第29-31页 |
| 2.2.7 统计学分析 | 第31-32页 |
| 2.3 实验结果 | 第32-38页 |
| 2.3.1 HP-NAP表达纯化 | 第32页 |
| 2.3.2 HP-NAP通过TLR2刺激DC成熟 | 第32-34页 |
| 2.3.3 HP-NAP增强荷载B16F10-TCL的DC表面共刺激分子的表达 | 第34-35页 |
| 2.3.4 HP-NAP上调荷载B16F10-TCL的DC表面CCR7的表达并下调抗 原吞噬 | 第35-37页 |
| 2.3.5 HP-NAP增强荷载B16F10-TCL的DC合成促炎因子的能力 | 第37-38页 |
| 2.4 结果讨论 | 第38-41页 |
| 3 HP-NAP增强荷载B16F10-TCL的DC介导T细胞增殖及活化的作用 | 第41-52页 |
| 3.1 仪器与材料 | 第41-43页 |
| 3.1.1 仪器设备 | 第41-42页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第42页 |
| 3.1.3 细胞株 | 第42页 |
| 3.1.4 实验动物 | 第42-43页 |
| 3.2 实验方法 | 第43-47页 |
| 3.2.1 分离纯化T细胞 | 第43-44页 |
| 3.2.2 T细胞纯度鉴定 | 第44页 |
| 3.2.3 MTT法检测脾脏及T细胞增殖 | 第44-45页 |
| 3.2.4 流式细胞术检测T细胞活化 | 第45页 |
| 3.2.5 ELISA检测T细胞细胞因子分泌 | 第45-46页 |
| 3.2.6 qRT-PCR法检测T细胞细胞因子的表达 | 第46页 |
| 3.2.7 统计学分析 | 第46-47页 |
| 3.3 实验结果 | 第47-50页 |
| 3.3.1 T细胞纯化条件的优化 | 第47-48页 |
| 3.3.2 HP-NAP增强荷载B16F10-TCL的DC刺激脾脏细胞和T细胞增殖的能力 | 第48页 |
| 3.3.3 HP-NAP增强荷载B16F10-TCL的DC活化T细胞的作用 | 第48-49页 |
| 3.3.4 HP-NAP促进荷载B16F10-TCL的DC介导Th1型免疫反应 | 第49-50页 |
| 3.4 结果讨论 | 第50-52页 |
| 4 HP-NAP对荷载B16F10-TCL的DC介导抗原特异性细胞毒性T细胞杀伤作用的影响 | 第52-60页 |
| 4.1 仪器与材料 | 第52-53页 |
| 4.1.1 仪器设备 | 第52-53页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第53页 |
| 4.1.3 细胞株 | 第53页 |
| 4.1.4 实验动物 | 第53页 |
| 4.2 实验方法 | 第53-55页 |
| 4.2.1 靶细胞数目优化 | 第53-54页 |
| 4.2.2 小鼠免疫及抗原特异性T细胞的制备 | 第54页 |
| 4.2.3 qRT-PCR法检测颗粒酶及穿孔素的合成 | 第54页 |
| 4.2.4 LDH法检测细胞毒性T细胞杀伤作用 | 第54-55页 |
| 4.2.5 统计学分析 | 第55页 |
| 4.3 实验结果 | 第55-57页 |
| 4.3.1 HP-NAP上调荷载B16F10-TCL的DC介导T细胞分泌IFN-γ | 第55-56页 |
| 4.3.2 HP-NAP增强荷载B16F10-TCL的DC介导细胞毒性T细胞的杀伤作用 | 第56-57页 |
| 4.3.3 HP-NAP增强荷载B16F10-TCL的DC介导T细胞合成Granzyme B及Perforine的能力 | 第57页 |
| 4.4 讨论 | 第57-60页 |
| 5 全文结论 | 第60-62页 |
| 参考文献 | 第62-71页 |
| 个人简历、在学期间发表的学术论文和研究成果 | 第71-72页 |
| 致谢 | 第72页 |
