摘要 | 第8-11页 |
Abstract | 第11-15页 |
第一章 文献综述 | 第16-26页 |
1 胚胎干细胞的研究进展 | 第16-17页 |
2 iPSCs的研究进展 | 第17-20页 |
2.1 iPSCs的产生 | 第17-18页 |
2.2 iPSCs的发展 | 第18-20页 |
3 piPSCs的研究进展 | 第20-22页 |
3.1 piPSCs的产生 | 第20-21页 |
3.2 piPSCs的发展 | 第21-22页 |
4 iPSCs和piPSCs的用途及面临的挑战 | 第22-23页 |
4.1 iPSCs和piPSCs的用途 | 第22页 |
4.2 iPSCs和piPSCs面临的挑战 | 第22-23页 |
5 超顺磁性氧化铁纳米颗粒(Superparamagnetic iron oxide nanoparticles,SPIONs)的研究进展 | 第23-25页 |
5.1 表面修饰SPIONs的作用 | 第23页 |
5.2 表面修饰物的研究进展 | 第23-25页 |
6 结语与展望 | 第25-26页 |
第二章 试验部分 | 第26-70页 |
试验一 广西巴马小型猪皮肤成纤维细胞的分离方法及培养体系优化 | 第26-38页 |
1 材料 | 第26-28页 |
1.1 实验动物 | 第26页 |
1.2 主要仪器与设备 | 第26-27页 |
1.3 主要药品与试剂 | 第27-28页 |
1.4 主要溶液的配制 | 第28页 |
2 方法 | 第28-31页 |
2.1 广西巴马小型猪耳皮肤成纤维细胞的分离及原代培养优化 | 第28-29页 |
2.2 广西巴马小型猪不同部位组织的皮肤成纤维细胞的分离培养 | 第29-30页 |
2.3 广西巴马小型猪皮肤成纤维细胞的传代培养 | 第30页 |
2.4 广西巴马小型猪皮肤成纤维细胞生长曲线的绘制 | 第30页 |
2.5 广西巴马小型猪皮肤成纤维细胞的冻存与复苏 | 第30页 |
2.6 数据统计分析 | 第30-31页 |
3 结果与分析 | 第31-35页 |
3.1 广西巴马小型猪耳皮肤成纤维细胞的分离及原代培养优化 | 第31-32页 |
3.2 广西巴马小型猪耳皮肤成纤维细胞的组织块培养 | 第32页 |
3.3 广西巴马小型猪不同部位组织的皮肤成纤维细胞的分离培养 | 第32-33页 |
3.4 广西巴马小型猪皮肤成纤维细胞的传代培养 | 第33-34页 |
3.5 广西巴马小型猪皮肤成纤维细胞生长曲线的绘制 | 第34-35页 |
3.6 广西巴马小型猪皮肤成纤维细胞的复苏培养 | 第35页 |
4 讨论 | 第35-38页 |
试验二 三种转染试剂介导重组质粒DNA进入 293T细胞的条件优化 | 第38-60页 |
1 材料 | 第38-41页 |
1.1 细胞 | 第38页 |
1.2 主要仪器与设备 | 第38-39页 |
1.3 主要药品与试剂 | 第39-40页 |
1.4 主要溶液的配制 | 第40-41页 |
2 方法 | 第41-47页 |
2.1 质粒构建 | 第41-42页 |
2.2 质粒DNA的提取 | 第42页 |
2.3 琼脂糖凝胶电泳(质粒DNA酶切验证) | 第42-43页 |
2.4 293T细胞的培养 | 第43页 |
2.5 重组蛋白的真核表达 | 第43-46页 |
2.6 重组蛋白的纯化 | 第46页 |
2.7 重组蛋白的检测 | 第46页 |
2.8 数据统计分析 | 第46-47页 |
3 结果与分析 | 第47-57页 |
3.1 质粒DNA的提取与酶切验证 | 第47-48页 |
3.2 293T细胞培养 | 第48页 |
3.3 Oct4质粒DNA重组蛋白的真核表达 | 第48-56页 |
3.4 重组蛋白的提取与纯化 | 第56-57页 |
4 讨论 | 第57-60页 |
试验三 应用磁性纳米技术介导人源化转录因子重组蛋白重编程广西巴马小型猪耳皮肤成纤维细胞成为iPSCs的可行性研究 | 第60-68页 |
1 材料 | 第60-61页 |
1.1 实验动物及细胞 | 第60页 |
1.2 主要仪器与设备 | 第60页 |
1.3 主要药品与试剂 | 第60-61页 |
1.4 主要溶液的配制 | 第61页 |
2 方法 | 第61-64页 |
2.1 小鼠超数排卵 | 第61-62页 |
2.2 胎鼠成纤维细胞的原代培养 | 第62页 |
2.3 胎鼠成纤维细胞的传代 | 第62页 |
2.4 胎鼠成纤维细胞的冷冻保存 | 第62页 |
2.5 干细胞饲养层的制备 | 第62页 |
2.6 重组蛋白与猪耳成纤维细胞的共孵育 | 第62-63页 |
2.7 iPSCs样克隆的多能性鉴定 | 第63-64页 |
2.8 数据统计分析 | 第64页 |
3 结果与分析 | 第64-65页 |
3.1 iPSCs样克隆的形成 | 第64页 |
3.2 iPSCs样克隆的多能性鉴定 | 第64-65页 |
4 讨论 | 第65-68页 |
试验四 含磁性纳米颗粒iPSCs的定位富集试验 | 第68-70页 |
1 材料 | 第68页 |
2 方法 | 第68-69页 |
2.1 普鲁士蓝染色 | 第68页 |
2.2 iPSCs的定位富集试验 | 第68-69页 |
3 结果与分析 | 第69-70页 |
4 讨论 | 第70页 |
总结 | 第70-72页 |
参考文献 | 第72-78页 |
附录 缩略词表 | 第78-80页 |
致谢 | 第80页 |