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应用磁性纳米颗粒介导人源化转录因子重组蛋白重编程广西巴马小型猪耳成纤维细胞为诱导性多能干细胞(iPSCs)的研究

摘要第8-11页
Abstract第11-15页
第一章 文献综述第16-26页
    1 胚胎干细胞的研究进展第16-17页
    2 iPSCs的研究进展第17-20页
        2.1 iPSCs的产生第17-18页
        2.2 iPSCs的发展第18-20页
    3 piPSCs的研究进展第20-22页
        3.1 piPSCs的产生第20-21页
        3.2 piPSCs的发展第21-22页
    4 iPSCs和piPSCs的用途及面临的挑战第22-23页
        4.1 iPSCs和piPSCs的用途第22页
        4.2 iPSCs和piPSCs面临的挑战第22-23页
    5 超顺磁性氧化铁纳米颗粒(Superparamagnetic iron oxide nanoparticles,SPIONs)的研究进展第23-25页
        5.1 表面修饰SPIONs的作用第23页
        5.2 表面修饰物的研究进展第23-25页
    6 结语与展望第25-26页
第二章 试验部分第26-70页
    试验一 广西巴马小型猪皮肤成纤维细胞的分离方法及培养体系优化第26-38页
        1 材料第26-28页
            1.1 实验动物第26页
            1.2 主要仪器与设备第26-27页
            1.3 主要药品与试剂第27-28页
            1.4 主要溶液的配制第28页
        2 方法第28-31页
            2.1 广西巴马小型猪耳皮肤成纤维细胞的分离及原代培养优化第28-29页
            2.2 广西巴马小型猪不同部位组织的皮肤成纤维细胞的分离培养第29-30页
            2.3 广西巴马小型猪皮肤成纤维细胞的传代培养第30页
            2.4 广西巴马小型猪皮肤成纤维细胞生长曲线的绘制第30页
            2.5 广西巴马小型猪皮肤成纤维细胞的冻存与复苏第30页
            2.6 数据统计分析第30-31页
        3 结果与分析第31-35页
            3.1 广西巴马小型猪耳皮肤成纤维细胞的分离及原代培养优化第31-32页
            3.2 广西巴马小型猪耳皮肤成纤维细胞的组织块培养第32页
            3.3 广西巴马小型猪不同部位组织的皮肤成纤维细胞的分离培养第32-33页
            3.4 广西巴马小型猪皮肤成纤维细胞的传代培养第33-34页
            3.5 广西巴马小型猪皮肤成纤维细胞生长曲线的绘制第34-35页
            3.6 广西巴马小型猪皮肤成纤维细胞的复苏培养第35页
        4 讨论第35-38页
    试验二 三种转染试剂介导重组质粒DNA进入 293T细胞的条件优化第38-60页
        1 材料第38-41页
            1.1 细胞第38页
            1.2 主要仪器与设备第38-39页
            1.3 主要药品与试剂第39-40页
            1.4 主要溶液的配制第40-41页
        2 方法第41-47页
            2.1 质粒构建第41-42页
            2.2 质粒DNA的提取第42页
            2.3 琼脂糖凝胶电泳(质粒DNA酶切验证)第42-43页
            2.4 293T细胞的培养第43页
            2.5 重组蛋白的真核表达第43-46页
            2.6 重组蛋白的纯化第46页
            2.7 重组蛋白的检测第46页
            2.8 数据统计分析第46-47页
        3 结果与分析第47-57页
            3.1 质粒DNA的提取与酶切验证第47-48页
            3.2 293T细胞培养第48页
            3.3 Oct4质粒DNA重组蛋白的真核表达第48-56页
            3.4 重组蛋白的提取与纯化第56-57页
        4 讨论第57-60页
    试验三 应用磁性纳米技术介导人源化转录因子重组蛋白重编程广西巴马小型猪耳皮肤成纤维细胞成为iPSCs的可行性研究第60-68页
        1 材料第60-61页
            1.1 实验动物及细胞第60页
            1.2 主要仪器与设备第60页
            1.3 主要药品与试剂第60-61页
            1.4 主要溶液的配制第61页
        2 方法第61-64页
            2.1 小鼠超数排卵第61-62页
            2.2 胎鼠成纤维细胞的原代培养第62页
            2.3 胎鼠成纤维细胞的传代第62页
            2.4 胎鼠成纤维细胞的冷冻保存第62页
            2.5 干细胞饲养层的制备第62页
            2.6 重组蛋白与猪耳成纤维细胞的共孵育第62-63页
            2.7 iPSCs样克隆的多能性鉴定第63-64页
            2.8 数据统计分析第64页
        3 结果与分析第64-65页
            3.1 iPSCs样克隆的形成第64页
            3.2 iPSCs样克隆的多能性鉴定第64-65页
        4 讨论第65-68页
    试验四 含磁性纳米颗粒iPSCs的定位富集试验第68-70页
        1 材料第68页
        2 方法第68-69页
            2.1 普鲁士蓝染色第68页
            2.2 iPSCs的定位富集试验第68-69页
        3 结果与分析第69-70页
        4 讨论第70页
总结第70-72页
参考文献第72-78页
附录 缩略词表第78-80页
致谢第80页

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