| 摘要 | 第6-7页 |
| abstract | 第7-8页 |
| 英文缩略表 | 第12-13页 |
| 第一章 引言 | 第13-19页 |
| 1.1 WNV分子生物学特性 | 第13-14页 |
| 1.1.1 WNV物理特性及基因组结构 | 第13页 |
| 1.1.2 WNV的结构蛋白与非结构蛋白的功能与特点 | 第13-14页 |
| 1.1.3 WNV致病机理 | 第14页 |
| 1.2 WNV流行病学及防控 | 第14-16页 |
| 1.2.1 WNV的流行病学及危害 | 第14-15页 |
| 1.2.2 WNV的诊断方法 | 第15页 |
| 1.2.3 WNV的治疗药物和疫苗研究 | 第15-16页 |
| 1.3 WNV复制子研究 | 第16-18页 |
| 1.4 研究目的和意义 | 第18-19页 |
| 第二章 复制子及辅助质粒瞬时转染包装系统的建立 | 第19-27页 |
| 2.1 实验材料 | 第19页 |
| 2.1.1 质粒、细胞、血清及抗体 | 第19页 |
| 2.1.2 主要试剂、材料 | 第19页 |
| 2.1.3 主要实验仪器 | 第19页 |
| 2.2 实验方法 | 第19-21页 |
| 2.2.1 WNV复制子构建 | 第19-20页 |
| 2.2.2 质粒pCAG-WNV-C构建 | 第20页 |
| 2.2.3 转染 | 第20-21页 |
| 2.2.4 单轮感染能力 | 第21页 |
| 2.2.5 非结构蛋白NS1蛋白检测 | 第21页 |
| 2.2.6 滴度测定 | 第21页 |
| 2.2.7 中和抗体检测 | 第21页 |
| 2.3 实验结果 | 第21-26页 |
| 2.3.1 重组质粒pWNVrepCME-GFP构建 | 第21-22页 |
| 2.3.2 重组质粒pAGG-WNV-C构建 | 第22页 |
| 2.3.3 转染后报告基因GFP表达 | 第22-23页 |
| 2.3.4 单轮感染能力检测 | 第23-24页 |
| 2.3.5 非结构蛋白NS1蛋白检测 | 第24-25页 |
| 2.3.6 滴度测定 | 第25页 |
| 2.3.7 中和抗体实验 | 第25-26页 |
| 2.4 讨论 | 第26-27页 |
| 第三章 复制子及细胞系稳定包装系统的建立 | 第27-39页 |
| 3.1 材料方法 | 第27-31页 |
| 3.1.1 质粒、细胞、抗体及血清 | 第27页 |
| 3.1.2 试剂和材料 | 第27页 |
| 3.1.3 复制子包装原理示意图 | 第27-28页 |
| 3.1.4 稳定表达WNV C/PrM/E细胞系构建 | 第28-30页 |
| 3.1.5 RRPs感染BWNV-CME细胞及噬斑形成 | 第30页 |
| 3.1.6 RRPs滴度测定 | 第30页 |
| 3.1.7 RRPs大量制备 | 第30页 |
| 3.1.8 RRPs复制动力学曲线 | 第30页 |
| 3.1.9 RRPs限制性复制 | 第30-31页 |
| 3.1.10 RRPs在Vero, HEK-293, BHK-21 和SK-N-SH细胞上感染特征 | 第31页 |
| 3.1.11 中和试验 | 第31页 |
| 3.1.12 抗病毒实验 | 第31页 |
| 3.2 实验结果 | 第31-37页 |
| 3.2.1 IFA鉴定 | 第31-32页 |
| 3.2.2 表达蛋白的Western blot鉴定 | 第32页 |
| 3.2.3 RRPs感染BWNV-CME细胞及噬斑形成 | 第32-33页 |
| 3.2.4 RRPs复制动力学曲线 | 第33页 |
| 3.2.5 RRPs的限制性复制 | 第33-34页 |
| 3.2.6 RRPs在Vero, HEK-293, BHK-21 和SK-N-SH细胞上感染特征 | 第34-35页 |
| 3.2.7 中和试验 | 第35-36页 |
| 3.2.8 抗病毒实验 | 第36-37页 |
| 3.3 讨论 | 第37-39页 |
| 第四章 全文结论 | 第39-40页 |
| 参考文献 | 第40-47页 |
| 致谢 | 第47-48页 |
| 作者简历 | 第48页 |
