摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
第1章 综述 | 第11-22页 |
1.1 效应器结合结构域 | 第12页 |
1.2 Fad R亚家族 | 第12-14页 |
1.3 HutC亚家族 | 第14-15页 |
1.4 MocR亚家族 | 第15页 |
1.5 YtrA亚家族 | 第15页 |
1.6 AraR亚家族 | 第15-16页 |
1.7 其它亚家族 | 第16-17页 |
1.8 结核分枝杆菌GntR转录因子 | 第17-19页 |
1.8.1 结核分枝杆菌Gnt R蛋白Rv3060具有内部重复 | 第17页 |
1.8.2 结核分枝杆菌Gnt R亚家族 | 第17-18页 |
1.8.3 结核分枝杆菌FadR-样蛋白 | 第18页 |
1.8.4 结核分枝杆菌Hut C-样蛋白 | 第18页 |
1.8.5 结核分枝杆菌Ytr A-样转录因子 | 第18-19页 |
1.9 DNA结合结构域 | 第19-20页 |
1.10 変构效应转换与连接器的作用 | 第20-21页 |
1.11 展望 | 第21-22页 |
第2章 引言 | 第22-24页 |
第3章 材料与方法 | 第24-38页 |
3.1 实验材料 | 第24-26页 |
3.1.1 实验菌株、质粒和细胞 | 第24页 |
3.1.2 培养基及培养条件 | 第24-25页 |
3.1.3 主要试剂 | 第25页 |
3.1.4 主要溶液 | 第25-26页 |
3.1.5 主要仪器 | 第26页 |
3.2 实验方法 | 第26-38页 |
3.2.0 构建Rv1152基因的过表达重组耻垢分枝杆菌 | 第26-27页 |
3.2.1 大肠杆菌和M. smegmatis mc2155感受态制备 | 第27页 |
3.2.2 化学转化与电转化 | 第27-28页 |
3.2.3 鉴定Rv1152在耻垢分枝杆菌中的表达 | 第28-29页 |
3.2.4 MS_Rv1152的亚细胞定位分析 | 第29页 |
3.2.5 耻垢分枝杆菌MSMEG_5174基因敲除菌株的构建 | 第29-31页 |
3.2.6 回补菌株的构建 | 第31页 |
3.2.7 重组菌株与突变菌株生长曲线测定 | 第31页 |
3.2.8 重组菌MS_Rv1152体外压力耐受能力检测 | 第31-32页 |
3.2.9 重组菌MS_Rv1152对抗结核药物耐受性分析 | 第32-33页 |
3.2.10 突变菌株对抗结核药物耐受性分析 | 第33页 |
3.2.11 在重组菌和突变菌株中万古霉素耐受相关基因表达情况检测 | 第33-36页 |
3.2.12 构建受Rv1152所调控基因的过表达菌株 | 第36页 |
3.2.13 分析七个重组菌在耻垢分枝杆菌中的表达 | 第36-37页 |
3.2.14 七个重组耻垢分枝杆菌对万古霉素物耐受性分析 | 第37页 |
3.2.15 统计分析 | 第37-38页 |
第4章 结果与分析 | 第38-53页 |
4.1 RV1152成功表达于耻垢分枝杆菌 | 第38-39页 |
4.2 RV1152蛋白定位于耻垢分枝杆菌细胞壁和细胞质 | 第39页 |
4.3 耻垢分枝杆菌MSMEG_5174基因敲除菌株构建成功 | 第39页 |
4.4 回补菌株构建成功 | 第39-40页 |
4.5 RV1152过表达和MSMEG_5174的缺失不影响耻垢分枝杆菌的生长 | 第40-41页 |
4.6 RV1152过表达影响耻垢分枝杆菌对体外压力的应答 | 第41-42页 |
4.7 RV1152使耻垢分枝杆菌对万古霉素耐受 | 第42-44页 |
4.7.1 液体测定抗生素对MS_Rv1152的MIC | 第42-43页 |
4.7.2 万古霉素对MS_Rv1152的杀菌情况检测 | 第43-44页 |
4.8 突变菌株对万古霉素敏感 | 第44-46页 |
4.8.1 抗生素对突变株的MIC | 第44-45页 |
4.8.2 万古霉素对突变菌株的杀菌情况 | 第45-46页 |
4.9 RV1152抑制万古霉素应答相关基因的表达 | 第46-48页 |
4.10 7 个基因在耻垢分枝杆菌中的过表达菌株构建成功 | 第48-49页 |
4.11 7 个过表达菌株对万古霉素的敏感情况 | 第49-53页 |
4.11.1 液体测定万古霉素对7个菌株的MIC | 第49-50页 |
4.11.2 万古霉素对Ms_Lat的杀菌情况检测 | 第50-51页 |
4.11.3 万古霉素对6个过表达菌株的固体平板杀菌情况检测 | 第51-53页 |
第5章 结论与展望 | 第53-56页 |
5.1 实验结论 | 第53页 |
5.2 讨论与分析 | 第53-55页 |
5.3 展望 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-64页 |
致谢 | 第64-66页 |
在学期间发表的论文 | 第66-67页 |