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结核分枝杆菌GntR家族转录因子Rv1152在万古霉素耐受中的分子机理研究

摘要第6-8页
Abstract第8-10页
第1章 综述第11-22页
    1.1 效应器结合结构域第12页
    1.2 Fad R亚家族第12-14页
    1.3 HutC亚家族第14-15页
    1.4 MocR亚家族第15页
    1.5 YtrA亚家族第15页
    1.6 AraR亚家族第15-16页
    1.7 其它亚家族第16-17页
    1.8 结核分枝杆菌GntR转录因子第17-19页
        1.8.1 结核分枝杆菌Gnt R蛋白Rv3060具有内部重复第17页
        1.8.2 结核分枝杆菌Gnt R亚家族第17-18页
        1.8.3 结核分枝杆菌FadR-样蛋白第18页
        1.8.4 结核分枝杆菌Hut C-样蛋白第18页
        1.8.5 结核分枝杆菌Ytr A-样转录因子第18-19页
    1.9 DNA结合结构域第19-20页
    1.10 変构效应转换与连接器的作用第20-21页
    1.11 展望第21-22页
第2章 引言第22-24页
第3章 材料与方法第24-38页
    3.1 实验材料第24-26页
        3.1.1 实验菌株、质粒和细胞第24页
        3.1.2 培养基及培养条件第24-25页
        3.1.3 主要试剂第25页
        3.1.4 主要溶液第25-26页
        3.1.5 主要仪器第26页
    3.2 实验方法第26-38页
        3.2.0 构建Rv1152基因的过表达重组耻垢分枝杆菌第26-27页
        3.2.1 大肠杆菌和M. smegmatis mc2155感受态制备第27页
        3.2.2 化学转化与电转化第27-28页
        3.2.3 鉴定Rv1152在耻垢分枝杆菌中的表达第28-29页
        3.2.4 MS_Rv1152的亚细胞定位分析第29页
        3.2.5 耻垢分枝杆菌MSMEG_5174基因敲除菌株的构建第29-31页
        3.2.6 回补菌株的构建第31页
        3.2.7 重组菌株与突变菌株生长曲线测定第31页
        3.2.8 重组菌MS_Rv1152体外压力耐受能力检测第31-32页
        3.2.9 重组菌MS_Rv1152对抗结核药物耐受性分析第32-33页
        3.2.10 突变菌株对抗结核药物耐受性分析第33页
        3.2.11 在重组菌和突变菌株中万古霉素耐受相关基因表达情况检测第33-36页
        3.2.12 构建受Rv1152所调控基因的过表达菌株第36页
        3.2.13 分析七个重组菌在耻垢分枝杆菌中的表达第36-37页
        3.2.14 七个重组耻垢分枝杆菌对万古霉素物耐受性分析第37页
        3.2.15 统计分析第37-38页
第4章 结果与分析第38-53页
    4.1 RV1152成功表达于耻垢分枝杆菌第38-39页
    4.2 RV1152蛋白定位于耻垢分枝杆菌细胞壁和细胞质第39页
    4.3 耻垢分枝杆菌MSMEG_5174基因敲除菌株构建成功第39页
    4.4 回补菌株构建成功第39-40页
    4.5 RV1152过表达和MSMEG_5174的缺失不影响耻垢分枝杆菌的生长第40-41页
    4.6 RV1152过表达影响耻垢分枝杆菌对体外压力的应答第41-42页
    4.7 RV1152使耻垢分枝杆菌对万古霉素耐受第42-44页
        4.7.1 液体测定抗生素对MS_Rv1152的MIC第42-43页
        4.7.2 万古霉素对MS_Rv1152的杀菌情况检测第43-44页
    4.8 突变菌株对万古霉素敏感第44-46页
        4.8.1 抗生素对突变株的MIC第44-45页
        4.8.2 万古霉素对突变菌株的杀菌情况第45-46页
    4.9 RV1152抑制万古霉素应答相关基因的表达第46-48页
    4.10 7 个基因在耻垢分枝杆菌中的过表达菌株构建成功第48-49页
    4.11 7 个过表达菌株对万古霉素的敏感情况第49-53页
        4.11.1 液体测定万古霉素对7个菌株的MIC第49-50页
        4.11.2 万古霉素对Ms_Lat的杀菌情况检测第50-51页
        4.11.3 万古霉素对6个过表达菌株的固体平板杀菌情况检测第51-53页
第5章 结论与展望第53-56页
    5.1 实验结论第53页
    5.2 讨论与分析第53-55页
    5.3 展望第55-56页
参考文献第56-64页
致谢第64-66页
在学期间发表的论文第66-67页

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