| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 1 引言 | 第10-18页 |
| 1.1 猪流行性腹泻概述 | 第10-13页 |
| 1.1.1 PEDV及其主要分子特征 | 第10-11页 |
| 1.1.2 培养特性 | 第11页 |
| 1.1.3 流行特征与致病性 | 第11-12页 |
| 1.1.4 防治 | 第12-13页 |
| 1.2 肠免疫屏障 | 第13-16页 |
| 1.2.1 肠黏膜屏障的构成 | 第13页 |
| 1.2.2 肥大细胞 | 第13-14页 |
| 1.2.3 CD163 | 第14页 |
| 1.2.4 MUC2 | 第14-15页 |
| 1.2.5 炎症中的细胞性渗出物 | 第15页 |
| 1.2.6 肠道黏膜免疫调节机制 | 第15-16页 |
| 1.3 研究内容和技术路线 | 第16页 |
| 1.3.1 研究内容 | 第16页 |
| 1.3.2 技术路线 | 第16页 |
| 1.4 研究目的与意义 | 第16页 |
| 1.5 研究目标 | 第16-18页 |
| 2 材料 | 第18-23页 |
| 2.1 细胞及毒株 | 第18页 |
| 2.2 实验动物 | 第18页 |
| 2.3 主要试剂 | 第18-21页 |
| 2.3.1 细胞培养用溶液 | 第18页 |
| 2.3.2 琼脂糖凝胶电泳用溶液 | 第18-19页 |
| 2.3.3 淋巴细胞增殖试验用溶液 | 第19页 |
| 2.3.4 流式细胞术所用的标记抗体 | 第19-20页 |
| 2.3.5 肠系膜淋巴结细胞分离用溶液 | 第20页 |
| 2.3.6 组织切片与免疫组化用试剂 | 第20-21页 |
| 2.3.7 其它试剂 | 第21页 |
| 2.4 主要仪器 | 第21-23页 |
| 3 方法 | 第23-31页 |
| 3.1 引物的设计与合成 | 第23页 |
| 3.2 PEDV HBMC/2012 株细胞毒的制备 | 第23页 |
| 3.3 实验动物的分组与感染 | 第23-24页 |
| 3.3.1 动物感染实验Ⅰ | 第23-24页 |
| 3.3.2 动物感染实验Ⅱ | 第24页 |
| 3.4 样品的采集与处理 | 第24页 |
| 3.5 肉眼及组织学病理检测 | 第24-25页 |
| 3.5.1 肉眼病理检查 | 第24页 |
| 3.5.2 组织病理变化检查 | 第24-25页 |
| 3.6 病毒检测 | 第25-27页 |
| 3.6.1 RT-PCR方法 | 第25-27页 |
| 3.6.2 免疫组化方法 | 第27页 |
| 3.7 抗体检测 | 第27页 |
| 3.8 淋巴细胞增殖实验 | 第27-29页 |
| 3.8.1 外周血淋巴细胞的分离 | 第27-28页 |
| 3.8.2 肠系膜淋巴结细胞的分离 | 第28页 |
| 3.8.3 淋巴细胞增殖试验——MTT法 | 第28-29页 |
| 3.9 免疫细胞亚群含量的流式细胞术检测 | 第29页 |
| 3.10 肠黏膜中MC及具有CD163、MUC2 和SWC1A、SWC8 分子标志免疫细胞的检测 | 第29-31页 |
| 4 结果与分析 | 第31-59页 |
| 4.1 临床症状 | 第31-32页 |
| 4.2 肉眼与组织病变 | 第32-37页 |
| 4.3 病毒血症 | 第37-38页 |
| 4.4 病毒排出 | 第38-39页 |
| 4.5 病毒在组织中的分布 | 第39-44页 |
| 4.6 血清中PEDV抗体动态 | 第44页 |
| 4.7 外周血淋巴细胞及肠系膜淋巴结细胞的增殖活性 | 第44-46页 |
| 4.7.1 外周血淋巴细胞的增殖活性 | 第44-45页 |
| 4.7.2 PEDV感染仔猪肠系膜淋巴结细胞的增殖活性 | 第45-46页 |
| 4.8 PEDV感染仔猪外周血T淋巴细胞亚群的含量变化 | 第46-48页 |
| 4.9 肠黏膜中MC及具有CD163、MUC2 和SWC1A、SWC8 分子标志免疫细胞的检测结果 | 第48-59页 |
| 4.9.1 MC在肠黏膜中的分布 | 第48-50页 |
| 4.9.2 具有CD163 标志的免疫细胞在肠黏膜中的分布 | 第50-52页 |
| 4.9.3 具有MUC2 标志的免疫细胞在肠黏膜中的分布 | 第52-54页 |
| 4.9.4 具有SWC1a、SWC8 标志的免疫细胞在肠黏膜中的分布 | 第54-59页 |
| 5 讨论 | 第59-62页 |
| 5.1 PEDV的致病性 | 第59-60页 |
| 5.1.1 临床症状及病理变化 | 第59页 |
| 5.1.2 病毒血症、排出及其在仔猪组织中的分布 | 第59-60页 |
| 5.2 PEDV HBMC/2012 的免疫学特性 | 第60-62页 |
| 5.2.1 全身免疫特性 | 第60页 |
| 5.2.2 局部免疫研究 | 第60-62页 |
| 6 结论 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-68页 |
| 在读期间发表的学术论文及获得的奖励 | 第68-69页 |
| 作者简介 | 第69-70页 |
| 致谢 | 第70-71页 |
