| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 缩略词表 | 第12-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-24页 |
| 1 谷胱甘肽-S-转移酶M2 的功能以及研究进展 | 第13-14页 |
| 2 RNAi GSTM2 的DEGs相关分析 | 第14-16页 |
| 2.1 对差异基因进行GO（Gene ontology）分析 | 第14-15页 |
| 2.2 主要参与的信号通路 | 第15-16页 |
| 3 猪早期胚胎发育与胚胎附植的相关研究 | 第16-20页 |
| 3.1 早期胚胎发育 | 第16-17页 |
| 3.2 胚胎附植相关研究 | 第17-18页 |
| 3.3 子宫对胚胎的识别 | 第18-19页 |
| 3.4 猪的妊娠识别信号 | 第19-20页 |
| 4 STAT1 的功能及研究进展 | 第20-22页 |
| 4.1 STAT1 的结构与功能 | 第20-21页 |
| 4.2 STAT1 参与的主要通路 | 第21-22页 |
| 4.3 STAT1 在子宫免疫识别的作用 | 第22页 |
| 5 研究的目的和意义 | 第22-24页 |
| 第二章 材料与方法 | 第24-42页 |
| 1 试验材料 | 第24-29页 |
| 1.1 组织和细胞样品 | 第24页 |
| 1.2 载体和菌株 | 第24页 |
| 1.3 主要仪器设备 | 第24-25页 |
| 1.4 主要试剂与药品 | 第25-27页 |
| 1.5 主要试剂的配置 | 第27-29页 |
| 1.5.1 转化所用溶液的配制 | 第27页 |
| 1.5.2 细胞培养所用试剂 | 第27-28页 |
| 1.5.3 用于SDS-PAGE缓冲液的配制 | 第28-29页 |
| 1.5.4 其他常用试剂配制 | 第29页 |
| 1.6 主要的分子生物学软件和网站 | 第29页 |
| 2 试验方法 | 第29-42页 |
| 2.1 基因表达检测 | 第29-33页 |
| 2.1.1 组织、细胞总RNA提取 | 第29-31页 |
| 2.1.2 cDNA的制备 | 第31-33页 |
| 2.1.3 qPCR分析差异基因表达 | 第33页 |
| 2.2 GSTM2 和STAT1 超表达载体的构建 | 第33-37页 |
| 2.2.1 GSTM2 和STAT1 全长的扩增 | 第33-35页 |
| 2.2.2 回收产物的酶切、连接及转化 | 第35-37页 |
| 2.3 细胞培养与转染 | 第37-38页 |
| 2.3.1 细胞培养和传代 | 第37页 |
| 2.3.2 细胞冻存 | 第37页 |
| 2.3.3 细胞复苏 | 第37-38页 |
| 2.3.4 ST细胞转染 | 第38页 |
| 2.4 免疫沉淀试验 | 第38-39页 |
| 2.4.1 提取细胞总蛋白 | 第38-39页 |
| 2.4.2 免疫沉淀具体步骤 | 第39页 |
| 2.5 Western Blot | 第39-42页 |
| 2.5.1 细胞总蛋白的提取 | 第39-40页 |
| 2.5.2 蛋白浓度测定 | 第40页 |
| 2.5.3 Western blot具体步骤 | 第40-42页 |
| 第三章 结果与分析 | 第42-56页 |
| 1 内参基因筛选和候选基因定量表达分析 | 第42-43页 |
| 1.1 内参基因筛选 | 第42页 |
| 1.2 差异表达基因的荧光定量PCR验证 | 第42-43页 |
| 2 相关基因在子宫内膜不同时期的表达情况 | 第43-47页 |
| 2.1 GSTM2 和STAT1 在子宫内膜不同时期的表达情况 | 第43-44页 |
| 2.2 黏附分子在子宫内膜不同时期的表达情况 | 第44-45页 |
| 2.3 免疫相关分子在子宫内膜不同时期的表达情况 | 第45-47页 |
| 3 超表达载体的构建 | 第47-48页 |
| 3.1 GSTM2 超表达载体的构建 | 第47页 |
| 3.2 STAT1 超表达载体的构建 | 第47-48页 |
| 4 超表达GSTM2 及对下游基因的影响 | 第48-50页 |
| 4.1 GSTM2 超表达载体转染效率检测 | 第48页 |
| 4.2 GSTM2 超表达效果的检测及对STAT1 蛋白表达的影响 | 第48-49页 |
| 4.3 超表达GSTM2 对其下游基因的调节 | 第49-50页 |
| 4.4 超表达GSTM2 抑制STAT1 的磷酸化 | 第50页 |
| 5 GSTM2 与STAT1 相互结合的检测 | 第50-51页 |
| 6 STAT1 的干涉及对下游基因的调节 | 第51-54页 |
| 6.1 STAT1 干涉片段转染效率的检测 | 第51-52页 |
| 6.2 STAT1 干涉效果的检测及对下游基因的调节 | 第52-54页 |
| 7 STAT1 的超表达及对下游基因的影响 | 第54-56页 |
| 第四章 讨论 | 第56-62页 |
| 1 测序结果讨论 | 第56-58页 |
| 1.1 胚胎发育相关基因 | 第56页 |
| 1.2 母胚交流相关基因 | 第56-58页 |
| 1.2.1 黏附分子 | 第56-57页 |
| 1.2.2 免疫相关分子 | 第57-58页 |
| 1.2.3 子宫内膜的重塑 | 第58页 |
| 2 GSTM2 通过与STAT1 的结合来调节其磷酸化 | 第58-59页 |
| 3 GSTM2 对妊娠识别和胚胎附植的调节 | 第59-62页 |
| 第五章 小结 | 第62-64页 |
| 1 本研究的主要结果 | 第62-63页 |
| 2 本研究的创新之处 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-74页 |
| 附录 | 第74-75页 |
| 致谢 | 第75页 |
