| 摘要 | 第8-9页 |
| 英文摘要 | 第9-10页 |
| 1 引言 | 第11-18页 |
| 1.1 猫杯状病毒感染概述 | 第11-13页 |
| 1.1.1 流行病学特征 | 第11页 |
| 1.1.2 病原学特征 | 第11-12页 |
| 1.1.3 FCV基因组结构及其编码产物 | 第12-13页 |
| 1.1.4 临床症状及病理变化 | 第13页 |
| 1.1.5 FCV感染机制 | 第13页 |
| 1.2 RNA病毒的反向遗传学技术 | 第13-15页 |
| 1.2.1 概述 | 第13-14页 |
| 1.2.2 表达系统的选择 | 第14-15页 |
| 1.3 FCV反向遗传研究进展 | 第15-17页 |
| 1.3.1 FCV反向遗传应用 | 第15-16页 |
| 1.3.2 反向遗传学技术在FCV疫苗研究的进展 | 第16-17页 |
| 1.4 研究目的与意义 | 第17-18页 |
| 2 材料与方法 | 第18-31页 |
| 2.1 实验材料 | 第18-19页 |
| 2.1.1 毒株、载体与质粒 | 第18页 |
| 2.1.2 细胞与病毒 | 第18页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第18页 |
| 2.1.4 仪器设备 | 第18-19页 |
| 2.2 实验方法 | 第19-31页 |
| 2.2.1 引物设计与合成 | 第19-20页 |
| 2.2.2 克隆载体pOK-12改造 | 第20页 |
| 2.2.3 FCV全长c DNA感染性克隆的构建 | 第20-25页 |
| 2.2.4 FCV的拯救 | 第25-27页 |
| 2.2.5 重组病毒的鉴定 | 第27页 |
| 2.2.6 亲本病毒与重组病毒生长曲线测定 | 第27-28页 |
| 2.2.7 表达eGFP重组病毒的拯救 | 第28-31页 |
| 3 结果 | 第31-36页 |
| 3.1 FCV全长cDNA感染性克隆的构建 | 第31页 |
| 3.2 FCV的拯救 | 第31-32页 |
| 3.3 拯救病毒的鉴定 | 第32-33页 |
| 3.4 亲本病毒与拯救病毒生长动力学比较 | 第33页 |
| 3.5 表达e GFP重组病毒的拯救 | 第33-34页 |
| 3.6 r2280-e GFP与亲本病毒生长动力学比较 | 第34-36页 |
| 4 讨论 | 第36-40页 |
| 4.1 FCV的拯救 | 第36-38页 |
| 4.1.1 FCV VPg蛋白的功能 | 第36页 |
| 4.1.2 核酶与基因组的忠实性 | 第36页 |
| 4.1.3 拯救系统的选择 | 第36-37页 |
| 4.1.4 转染方法的选择 | 第37页 |
| 4.1.5 忠实性c DNA克隆的获得 | 第37-38页 |
| 4.1.6 拯救病毒的鉴定 | 第38页 |
| 4.2 FCV反向遗传的应用 | 第38-40页 |
| 5 结论 | 第40-41页 |
| 致谢 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-47页 |
| 附录 | 第47-51页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第51页 |