中文摘要 | 第5-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
前言 | 第9-13页 |
材料和方法 | 第13-27页 |
一、实验材料 | 第13-16页 |
(一) 标本来源 | 第13页 |
(二) 主要试剂及溶液配制 | 第13-14页 |
(三) 主要仪器设备 | 第14-15页 |
(四) 统计学方法 | 第15-16页 |
二、实验方法 | 第16-27页 |
(一) 人瘢痕疙瘩成纤维细胞培养 | 第16-17页 |
(二) MicroRNA-152 mimics转染及RT-PCR检测 | 第17-20页 |
(三) 瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖能力检测 | 第20-21页 |
(四) 羟脯氨酸胶原蛋白检测 | 第21-22页 |
(五) Westen-blot成纤维细胞Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白检测 | 第22-24页 |
(六) RT-PCR法成纤维细胞Ⅰ型、Ⅲ型胶原及TGF-β 1基因mRNA水平检测 | 第24-27页 |
结果 | 第27-38页 |
一、瘢痕疙瘩成纤维细胞鉴定 | 第27页 |
二、MicroRNA-152转染效果鉴定 | 第27-30页 |
(一) MicroRNA-152拟似物转染 | 第27-28页 |
(二) MicroRNA-152基因Realtime PCR检测 | 第28-30页 |
三、MicroRNA-152转染后成纤维细胞增殖情况 | 第30-31页 |
四、MicroRNA-152转染后成纤维细胞总胶原合成情况 | 第31-33页 |
五、MicroRNA-152转染后成纤维细胞Ⅰ型、Ⅲ型胶原合成情况 | 第33-34页 |
六、MicroRNA-152转染后瘢痕疙瘩成纤维细胞Ⅰ型、Ⅲ型胶原及TGF-β1基因mRNA水平 | 第34-38页 |
讨论 | 第38-50页 |
一、组织块法成纤维细胞培养 | 第38-39页 |
二、瘢痕疙瘩中microRNA的异常表达 | 第39-41页 |
三、MicroRNA-152对成纤维细胞增殖的作用 | 第41-43页 |
四、MicroRNA-152对胶原蛋白合成的影响 | 第43-44页 |
五、MicroRNA-152与TGF-β1/Smads传导通路 | 第44-46页 |
六、MicroRNA-152的作用机制及靶基因预测 | 第46-47页 |
七、MicroRNA的研究前景展望 | 第47-49页 |
八、本研究的不足之处 | 第49-50页 |
结论 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-60页 |
综述 | 第60-83页 |
参考文献 | 第72-83页 |
附录 | 第83-84页 |
致谢 | 第84-85页 |