| 中文摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 英文缩略表 | 第10-11页 |
| 第一章 序言 | 第11-25页 |
| 1.1 禽流感 | 第11-14页 |
| 1.1.1 禽流感与禽流感病毒 | 第11-13页 |
| 1.1.2 禽流感疫苗的研究现状 | 第13-14页 |
| 1.2 转基因植物疫苗 | 第14-16页 |
| 1.3 转基因植物疫苗的免疫机制 | 第16-17页 |
| 1.4 转基因植物疫苗的研究概况 | 第17-20页 |
| 1.4.1 H5N1流感疫苗 | 第18页 |
| 1.4.2 H1N1流感疫苗 | 第18页 |
| 1.4.3 大肠杆菌肠毒素疫苗 | 第18-19页 |
| 1.4.4 乙肝病毒表面抗原病毒疫苗 | 第19页 |
| 1.4.5 诺沃克病毒疫苗 | 第19-20页 |
| 1.4.6 狂犬病毒疫苗 | 第20页 |
| 1.4.7 麻疹病毒疫苗 | 第20页 |
| 1.5 转基因植物疫苗存在的问题和未来研究展望 | 第20-23页 |
| 1.5.1 外源蛋白在植物中表达量低 | 第20-21页 |
| 1.5.2 转基因沉默现象 | 第21-22页 |
| 1.5.3 免疫原性低、免疫耐受问题 | 第22页 |
| 1.5.4 生物安全性问题 | 第22-23页 |
| 1.6 本文研究背景 | 第23页 |
| 1.7 本研究目的及意义 | 第23-25页 |
| 第二章 广谱H5N1禽流感抗原蛋白植物表达载体的构建和在百脉根中的转化 | 第25-47页 |
| 2.1 实验材料 | 第25-29页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第25页 |
| 2.1.2 基因、菌种及载体 | 第25页 |
| 2.1.3 试剂 | 第25-26页 |
| 2.1.4 培养基及其它试剂的配制 | 第26-28页 |
| 2.1.5 仪器及工具 | 第28页 |
| 2.1.6 引物与测序 | 第28-29页 |
| 2.2 实验方法 | 第29-36页 |
| 2.2.1 质粒DNA提取 | 第29-30页 |
| 2.2.2 PCR反应体系 | 第30页 |
| 2.2.3 PCR产物胶回收 | 第30页 |
| 2.2.4 酶切与连接 | 第30-31页 |
| 2.2.5 基因全序列的合成 | 第31页 |
| 2.2.6 质粒的制备与鉴定 | 第31-33页 |
| 2.2.7 农杆菌介导的百脉根遗传转化 | 第33-34页 |
| 2.2.8 百脉根的遗传转化 | 第34-36页 |
| 2.3 结果与分析 | 第36-45页 |
| 2.3.1 植物高效表达载体的构建及酶切验证 | 第36-40页 |
| 2.3.2 农杆菌LBA4404的转化及其鉴定 | 第40-41页 |
| 2.3.3 百脉根外植体的遗传转化 | 第41-45页 |
| 2.4 讨论 | 第45-46页 |
| 2.5 小结 | 第46-47页 |
| 第三章 广谱H5N1禽流感抗原蛋白在百脉根中的整合与表达 | 第47-64页 |
| 3.1 材料与方法 | 第47-56页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第47页 |
| 3.1.2 仪器与试剂 | 第47页 |
| 3.1.3 引物 | 第47-48页 |
| 3.1.4 PCR检测外源基因的整合 | 第48-49页 |
| 3.1.5 目的基因的RT-PCR检测 | 第49-51页 |
| 3.1.6 转基因百脉根表达目的蛋白的Western-Bloting检测 | 第51-54页 |
| 3.1.7 转基因百脉根表达目的蛋白的ELISA检测 | 第54-56页 |
| 3.2 结果及分析 | 第56-61页 |
| 3.2.1 转基因百脉根的PCR检测 | 第56-57页 |
| 3.2.2 RT-PCR检测 | 第57-58页 |
| 3.2.3 目的蛋白的Western Blotting检测 | 第58-59页 |
| 3.2.4 目的蛋白的ELISA检测 | 第59-61页 |
| 3.3 讨论 | 第61-62页 |
| 3.4 小结 | 第62-64页 |
| 第四章 广谱H5N1禽流感抗原蛋白转基因百脉根的大田繁育 | 第64-68页 |
| 4.1 材料与方法 | 第64-65页 |
| 4.1.1 材料 | 第64页 |
| 4.1.2 实验方法 | 第64-65页 |
| 4.1.3 繁育成活植株的分析及检测 | 第65页 |
| 4.2 结果 | 第65-66页 |
| 4.3 讨论 | 第66-68页 |
| 第五章 结论与展望 | 第68-70页 |
| 5.1 结论 | 第68页 |
| 5.2 展望 | 第68-70页 |
| 参考文献 | 第70-80页 |
| 致谢 | 第80页 |
