摘要 | 第3-6页 |
ABSTRACT | 第6-9页 |
缩略词表 | 第10-17页 |
引言 | 第17-18页 |
第一章 鲨鱼皮胶原蛋白纯化及胶原海绵制备与理化性质分析 | 第18-29页 |
1.1 材料与仪器 | 第18-19页 |
1.2 实验方法 | 第19-22页 |
1.2.1 鲨鱼皮胶原蛋白的提取 | 第19页 |
1.2.1.1 鲨鱼皮的前处理 | 第19页 |
1.2.1.2 酸溶性胶原蛋白的提取及纯化 | 第19页 |
1.2.2 SSC的理化性质分析 | 第19-20页 |
1.2.2.1 胶原蛋白含量测定 | 第19-20页 |
1.2.2.2 紫外吸收光谱测定 | 第20页 |
1.2.2.3 红外光谱测定 | 第20页 |
1.2.2.4 圆二色谱(CD)测定 | 第20页 |
1.2.2.5 纯度及二级结构测定 | 第20页 |
1.2.2.6 氨基酸组成测定 | 第20页 |
1.2.3 胶原海绵的制备及其物化性质分析 | 第20-22页 |
1.2.3.1 超显微结构测定(SEM) | 第21页 |
1.2.3.2 吸水率测定(Swelling rate) | 第21页 |
1.2.3.3 孔隙率测定(Porosity examination) | 第21页 |
1.2.3.4 水蒸气透过率测定(Water vapour transmission rate,WVTR) | 第21-22页 |
1.2.3.5 机械性能测定(拉伸强度) | 第22页 |
1.3 结果 | 第22-28页 |
1.3.1 SSC胶原蛋白的含量 | 第22页 |
1.3.2 SSC的紫外吸收光谱 | 第22-23页 |
1.3.3 SSC的红外光谱 | 第23-24页 |
1.3.4 SSC的圆二色谱 | 第24页 |
1.3.5 SSC的纯度及二级结构 | 第24-25页 |
1.3.6 SSC的氨基酸组成 | 第25-26页 |
1.3.7 SSCS的超显微结构 | 第26页 |
1.3.8 SSCS的吸水溶胀性 | 第26-28页 |
1.3.9 SSCS的水蒸气透过率(WVTR) | 第28页 |
1.3.10 胶原海绵的机械性能 | 第28页 |
1.4 讨论 | 第28-29页 |
第二章 鲨鱼皮胶原蛋白的体外抗氧化作用 | 第29-34页 |
2.1 实验材料 | 第29页 |
2.1.1 实验试剂 | 第29页 |
2.1.2 实验仪器 | 第29页 |
2.2 实验方法 | 第29-31页 |
2.2.1 对DPPH· 的清除作用测定 | 第29-30页 |
2.2.2 对HO· 的清除作用测定 | 第30页 |
2.2.3 总还原能力的测定 | 第30-31页 |
2.3 结果与分析 | 第31-32页 |
2.3.1 SSC对DPPH· 的清除作用 | 第31页 |
2.3.2 SSC对HO· 的清除作用 | 第31-32页 |
2.3.3 SSC的总还原能力 | 第32页 |
2.4 讨论 | 第32-34页 |
第三章 鲨鱼皮胶原蛋白海绵促创伤愈合作用研究 | 第34-44页 |
3.1 材料和仪器 | 第34-35页 |
3.1.1 实验材料 | 第34页 |
3.1.2 实验仪器 | 第34-35页 |
3.2 实验方法 | 第35-36页 |
3.2.1 动物分组及模型建立 | 第35页 |
3.2.2 愈合率的测定 | 第35页 |
3.2.3 HE染色和免疫组化 | 第35-36页 |
3.3 结果与分析 | 第36-42页 |
3.3.1 SSCS对创伤愈合的促进作用 | 第36页 |
3.3.2 SSCS促创伤愈合的组织病理学分析 | 第36-37页 |
3.3.3 SSCS对创伤愈合组织CD31表达的促进作用 | 第37-38页 |
3.3.4 SSCS对创伤愈合组织TGF-β表达的促进作用 | 第38-40页 |
3.3.5 SSCS对创伤愈合组织EGF表达的促进作用 | 第40-41页 |
3.3.6 SSCS对创伤愈合组织bFGF表达的促进作用 | 第41-42页 |
3.4 讨论 | 第42-44页 |
第四章 鲨鱼皮胶原蛋白海绵促海水浸泡创伤愈合作用研究 | 第44-67页 |
4.1 材料和仪器 | 第44-45页 |
4.1.1 实验材料 | 第44-45页 |
4.1.2 实验仪器 | 第45页 |
4.2 实验方法 | 第45-49页 |
4.2.1 胶原蛋白海绵促海水浸泡创伤愈合实验 | 第45-46页 |
4.2.1.1 动物分组 | 第45-46页 |
4.2.1.2 愈合率的测定 | 第46页 |
4.2.1.3 HE染色和免疫组化 | 第46页 |
4.2.2 胶原蛋白海绵促海水浸泡创伤愈合机制研究 | 第46-49页 |
4.2.2.1 动物分组 | 第46页 |
4.2.1.2 SSCS对海水浸泡伤大鼠外周血象的检测 | 第46页 |
4.2.1.3 实时定量PCR检测目的基因表达量 | 第46-48页 |
4.2.1.3.1 创伤皮肤组织总RNA的抽提 | 第46页 |
4.2.1.3.2 总RNA质量检测 | 第46-47页 |
4.2.1.3.3 实时定量PCR | 第47-48页 |
4.2.1.4 Western-blot检测目的蛋白 | 第48-49页 |
4.3 结果与分析 | 第49-66页 |
4.3.1 SSCS对海水浸泡伤口愈合的促进作用 | 第49-50页 |
4.3.2 SSCS促进海水浸泡伤口愈合的组织病理学分析 | 第50-51页 |
4.3.3 SSCS对海水浸泡伤口组织CD31表达的促进作用 | 第51-52页 |
4.3.4 SSCS对海水浸泡伤口组织TGF-β表达的促进作用 | 第52-53页 |
4.3.5 SSCS对海水浸泡伤口组织bFGF表达的促进作用 | 第53-55页 |
4.3.6 SSCS对海水浸泡伤口组织EGF表达的促进作用 | 第55-56页 |
4.3.7 SSCS对海水浸泡伤口大鼠外周血象的影响 | 第56页 |
4.3.8 伤口组织愈合相关基因mRNA表达变化 | 第56-62页 |
4.3.8.1 总RNA抽提质量 | 第56-57页 |
4.3.8.2 PCR特异性产物分析 | 第57-58页 |
4.3.8.3 建立标准曲线 | 第58-59页 |
4.3.8.4 伤口组织愈合相关基因mRNA表达的变化 | 第59-62页 |
4.3.9 创伤组织愈合相关蛋白表达变化 | 第62-66页 |
4.4 讨论 | 第66-67页 |
第五章 鲨鱼皮胶原防海水浸泡敷贴促海水浸泡伤口愈合作用研究 | 第67-75页 |
5.1 材料和仪器 | 第67页 |
5.2 实验方法 | 第67-68页 |
5.2.1 防海水浸泡胶原敷贴的制备 | 第67页 |
5.2.2 动物分组及模型建立 | 第67-68页 |
5.2.3 愈合率的测定 | 第68页 |
5.2.4 HE染色和免疫组化 | 第68页 |
5.3 结果与分析 | 第68-74页 |
5.3.1 防海水浸泡和对创伤愈合的促进作用 | 第68-69页 |
5.3.2 组织病理学分析 | 第69页 |
5.3.3 防海水浸泡创伤组织的CD31表达 | 第69-70页 |
5.3.4 防海水浸泡创伤的TGF-β表达 | 第70-71页 |
5.3.5 防海水浸泡创伤组织EGF表达 | 第71-72页 |
5.3.6 防海水浸泡创伤组织bFGF表达 | 第72-74页 |
5.4 讨论 | 第74-75页 |
第六章 鲨鱼皮胶原蛋白海绵的生物安全性评价 | 第75-84页 |
6.1 材料与仪器 | 第75页 |
6.1.1 实验材料 | 第75页 |
6.1.2 实验动物 | 第75页 |
6.2 实验方法 | 第75-79页 |
6.2.1 SSCS的细胞毒性实验 | 第75-76页 |
6.2.2 SSCS的血液相容性实验 | 第76页 |
6.2.3 SSCS的最大耐受量急性全身毒性实验 | 第76页 |
6.2.4 SSCS的皮肤刺激性实验 | 第76-77页 |
6.2.5 SSCS的皮肤致敏性实验 | 第77-79页 |
6.2.5.1 预实验 | 第78页 |
6.2.5.2 主试验 | 第78-79页 |
6.3 实验结果 | 第79-83页 |
6.3.1 SSCS的细胞毒性 | 第79-80页 |
6.3.2 SSCS的血液相容性 | 第80页 |
6.3.3 SSCS的最大耐受量急性全身毒性 | 第80-81页 |
6.3.4 SSCS的皮肤刺激性研究 | 第81-82页 |
6.3.5 SSCS的皮肤致敏性 | 第82-83页 |
6.4 讨论 | 第83-84页 |
总结 | 第84-86页 |
参考文献 | 第86-93页 |
致谢 | 第93-94页 |
硕士期间发表论文与参与课题 | 第94页 |