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鲨鱼皮胶原蛋白防海水浸泡生物医用材料研究

摘要第3-6页
ABSTRACT第6-9页
缩略词表第10-17页
引言第17-18页
第一章 鲨鱼皮胶原蛋白纯化及胶原海绵制备与理化性质分析第18-29页
    1.1 材料与仪器第18-19页
    1.2 实验方法第19-22页
        1.2.1 鲨鱼皮胶原蛋白的提取第19页
            1.2.1.1 鲨鱼皮的前处理第19页
            1.2.1.2 酸溶性胶原蛋白的提取及纯化第19页
        1.2.2 SSC的理化性质分析第19-20页
            1.2.2.1 胶原蛋白含量测定第19-20页
            1.2.2.2 紫外吸收光谱测定第20页
            1.2.2.3 红外光谱测定第20页
            1.2.2.4 圆二色谱(CD)测定第20页
            1.2.2.5 纯度及二级结构测定第20页
            1.2.2.6 氨基酸组成测定第20页
        1.2.3 胶原海绵的制备及其物化性质分析第20-22页
            1.2.3.1 超显微结构测定(SEM)第21页
            1.2.3.2 吸水率测定(Swelling rate)第21页
            1.2.3.3 孔隙率测定(Porosity examination)第21页
            1.2.3.4 水蒸气透过率测定(Water vapour transmission rate,WVTR)第21-22页
            1.2.3.5 机械性能测定(拉伸强度)第22页
    1.3 结果第22-28页
        1.3.1 SSC胶原蛋白的含量第22页
        1.3.2 SSC的紫外吸收光谱第22-23页
        1.3.3 SSC的红外光谱第23-24页
        1.3.4 SSC的圆二色谱第24页
        1.3.5 SSC的纯度及二级结构第24-25页
        1.3.6 SSC的氨基酸组成第25-26页
        1.3.7 SSCS的超显微结构第26页
        1.3.8 SSCS的吸水溶胀性第26-28页
        1.3.9 SSCS的水蒸气透过率(WVTR)第28页
        1.3.10 胶原海绵的机械性能第28页
    1.4 讨论第28-29页
第二章 鲨鱼皮胶原蛋白的体外抗氧化作用第29-34页
    2.1 实验材料第29页
        2.1.1 实验试剂第29页
        2.1.2 实验仪器第29页
    2.2 实验方法第29-31页
        2.2.1 对DPPH· 的清除作用测定第29-30页
        2.2.2 对HO· 的清除作用测定第30页
        2.2.3 总还原能力的测定第30-31页
    2.3 结果与分析第31-32页
        2.3.1 SSC对DPPH· 的清除作用第31页
        2.3.2 SSC对HO· 的清除作用第31-32页
        2.3.3 SSC的总还原能力第32页
    2.4 讨论第32-34页
第三章 鲨鱼皮胶原蛋白海绵促创伤愈合作用研究第34-44页
    3.1 材料和仪器第34-35页
        3.1.1 实验材料第34页
        3.1.2 实验仪器第34-35页
    3.2 实验方法第35-36页
        3.2.1 动物分组及模型建立第35页
        3.2.2 愈合率的测定第35页
        3.2.3 HE染色和免疫组化第35-36页
    3.3 结果与分析第36-42页
        3.3.1 SSCS对创伤愈合的促进作用第36页
        3.3.2 SSCS促创伤愈合的组织病理学分析第36-37页
        3.3.3 SSCS对创伤愈合组织CD31表达的促进作用第37-38页
        3.3.4 SSCS对创伤愈合组织TGF-β表达的促进作用第38-40页
        3.3.5 SSCS对创伤愈合组织EGF表达的促进作用第40-41页
        3.3.6 SSCS对创伤愈合组织bFGF表达的促进作用第41-42页
    3.4 讨论第42-44页
第四章 鲨鱼皮胶原蛋白海绵促海水浸泡创伤愈合作用研究第44-67页
    4.1 材料和仪器第44-45页
        4.1.1 实验材料第44-45页
        4.1.2 实验仪器第45页
    4.2 实验方法第45-49页
        4.2.1 胶原蛋白海绵促海水浸泡创伤愈合实验第45-46页
            4.2.1.1 动物分组第45-46页
            4.2.1.2 愈合率的测定第46页
            4.2.1.3 HE染色和免疫组化第46页
        4.2.2 胶原蛋白海绵促海水浸泡创伤愈合机制研究第46-49页
            4.2.2.1 动物分组第46页
            4.2.1.2 SSCS对海水浸泡伤大鼠外周血象的检测第46页
            4.2.1.3 实时定量PCR检测目的基因表达量第46-48页
                4.2.1.3.1 创伤皮肤组织总RNA的抽提第46页
                4.2.1.3.2 总RNA质量检测第46-47页
                4.2.1.3.3 实时定量PCR第47-48页
            4.2.1.4 Western-blot检测目的蛋白第48-49页
    4.3 结果与分析第49-66页
        4.3.1 SSCS对海水浸泡伤口愈合的促进作用第49-50页
        4.3.2 SSCS促进海水浸泡伤口愈合的组织病理学分析第50-51页
        4.3.3 SSCS对海水浸泡伤口组织CD31表达的促进作用第51-52页
        4.3.4 SSCS对海水浸泡伤口组织TGF-β表达的促进作用第52-53页
        4.3.5 SSCS对海水浸泡伤口组织bFGF表达的促进作用第53-55页
        4.3.6 SSCS对海水浸泡伤口组织EGF表达的促进作用第55-56页
        4.3.7 SSCS对海水浸泡伤口大鼠外周血象的影响第56页
        4.3.8 伤口组织愈合相关基因mRNA表达变化第56-62页
            4.3.8.1 总RNA抽提质量第56-57页
            4.3.8.2 PCR特异性产物分析第57-58页
            4.3.8.3 建立标准曲线第58-59页
            4.3.8.4 伤口组织愈合相关基因mRNA表达的变化第59-62页
        4.3.9 创伤组织愈合相关蛋白表达变化第62-66页
    4.4 讨论第66-67页
第五章 鲨鱼皮胶原防海水浸泡敷贴促海水浸泡伤口愈合作用研究第67-75页
    5.1 材料和仪器第67页
    5.2 实验方法第67-68页
        5.2.1 防海水浸泡胶原敷贴的制备第67页
        5.2.2 动物分组及模型建立第67-68页
        5.2.3 愈合率的测定第68页
        5.2.4 HE染色和免疫组化第68页
    5.3 结果与分析第68-74页
        5.3.1 防海水浸泡和对创伤愈合的促进作用第68-69页
        5.3.2 组织病理学分析第69页
        5.3.3 防海水浸泡创伤组织的CD31表达第69-70页
        5.3.4 防海水浸泡创伤的TGF-β表达第70-71页
        5.3.5 防海水浸泡创伤组织EGF表达第71-72页
        5.3.6 防海水浸泡创伤组织bFGF表达第72-74页
    5.4 讨论第74-75页
第六章 鲨鱼皮胶原蛋白海绵的生物安全性评价第75-84页
    6.1 材料与仪器第75页
        6.1.1 实验材料第75页
        6.1.2 实验动物第75页
    6.2 实验方法第75-79页
        6.2.1 SSCS的细胞毒性实验第75-76页
        6.2.2 SSCS的血液相容性实验第76页
        6.2.3 SSCS的最大耐受量急性全身毒性实验第76页
        6.2.4 SSCS的皮肤刺激性实验第76-77页
        6.2.5 SSCS的皮肤致敏性实验第77-79页
            6.2.5.1 预实验第78页
            6.2.5.2 主试验第78-79页
    6.3 实验结果第79-83页
        6.3.1 SSCS的细胞毒性第79-80页
        6.3.2 SSCS的血液相容性第80页
        6.3.3 SSCS的最大耐受量急性全身毒性第80-81页
        6.3.4 SSCS的皮肤刺激性研究第81-82页
        6.3.5 SSCS的皮肤致敏性第82-83页
    6.4 讨论第83-84页
总结第84-86页
参考文献第86-93页
致谢第93-94页
硕士期间发表论文与参与课题第94页

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