摘要 | 第4-5页 |
ABSTRACT | 第5-6页 |
引言 | 第9-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-18页 |
1.1 日本鳗鲡人工繁殖研究现状 | 第10页 |
1.2 Dmrt家族基因研究现状 | 第10-13页 |
1.2.1 Dmrt1基因 | 第11-12页 |
1.2.2 Dmrt2基因 | 第12页 |
1.2.3 DMY基因 | 第12-13页 |
1.3 Dmrt的主要特点及功能 | 第13-14页 |
1.3.1 性别调控 | 第13页 |
1.3.2 神经系统和感觉器官的发育 | 第13-14页 |
1.3.3 参与其他器官或组织的形成和功能维持 | 第14页 |
1.4 鱼类性别决定机制 | 第14-16页 |
1.4.1 基因调控 | 第14-15页 |
1.4.2 外源激素的影响 | 第15-16页 |
1.4.3 其它因素的影响 | 第16页 |
1.5 小结 | 第16-17页 |
1.6 本论文的目的和意义 | 第17-18页 |
第二章 Dmrt2基因cDNA序列的获取 | 第18-30页 |
引言 | 第18页 |
2.1 实验材料 | 第18页 |
2.2 实验方法 | 第18-23页 |
2.2.1 各组织总RNA的提取 | 第18-19页 |
2.2.2 RNA的反转录 | 第19页 |
2.2.3 PCR扩增DM—domain区域 | 第19-20页 |
2.2.4 从琼脂糖凝胶中回收cDNA | 第20-21页 |
2.2.5 使用RACE技术获取Dmrt2基因cDNA全长 | 第21页 |
2.2.6 序列分析 | 第21-23页 |
2.3 实验结果 | 第23-28页 |
2.3.1 PCR电泳结果 | 第23页 |
2.3.2 测序结果及分析 | 第23-28页 |
2.4 讨论 | 第28-30页 |
第三章 Dmrt2基因的RT-PCR | 第30-34页 |
引言 | 第30页 |
3.1 实验材料 | 第30页 |
3.2 实验方法 | 第30-31页 |
3.2.1 总RNA提取及cDNA第一条链的合成 | 第30-31页 |
3.2.2 引物的设计与获取 | 第31页 |
3.3 实验结果 | 第31-32页 |
3.4 讨论 | 第32-34页 |
第四章 Dmrt2基因在性腺中的荧光原位杂交 | 第34-39页 |
引言 | 第34页 |
4.1 实验材料 | 第34-35页 |
4.2 实验方法 | 第35-36页 |
4.2.1 组织标本的准备 | 第35页 |
4.2.2 杂交片的前处理 | 第35页 |
4.2.3 杂交 | 第35页 |
4.2.4 杂交后洗涤 | 第35-36页 |
4.3 实验结果 | 第36-37页 |
4.4 讨论 | 第37-39页 |
结论 | 第39-40页 |
参考文献 | 第40-49页 |
致谢 | 第49页 |