| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-7页 |
| 第1章 引言 | 第7-9页 |
| 第2章 材料与方法 | 第9-13页 |
| ·细胞株 | 第9页 |
| ·主要试剂 | 第9-10页 |
| ·自配试剂 | 第10-12页 |
| ·主要仪器设备 | 第12-13页 |
| 第3章 实验方法 | 第13-21页 |
| ·细胞培养 | 第13-14页 |
| ·细胞传代 | 第13页 |
| ·细胞冻存 | 第13页 |
| ·细胞复苏 | 第13-14页 |
| ·FAT10-siRNA瞬时转染Hep3B细胞及MHCC-97h细胞 | 第14页 |
| ·细胞分组 | 第14页 |
| ·细胞转染 | 第14页 |
| ·绘制细胞生长曲线 | 第14-15页 |
| ·细胞计数及种板 | 第14-15页 |
| ·细胞转染 | 第15页 |
| ·加顺铂 | 第15页 |
| ·收集细胞计数并绘制生长抑制曲线 | 第15页 |
| ·实时荧光定量PCR检测肝癌细胞中FAT10、bcl-2及bax的mRNA表达水平 | 第15-17页 |
| ·RNA提取 | 第15页 |
| ·RNA逆转录成cDNA | 第15-16页 |
| ·实时荧光定量PCR扩增 | 第16-17页 |
| ·Western blot分析肝癌细胞Hep3B和MHCC97H内bcl-2及bax蛋白表达水平 | 第17-19页 |
| ·蛋白质的提取 | 第17页 |
| ·BCA法测定蛋白浓度 | 第17页 |
| ·SDS-PAGE电泳 | 第17-18页 |
| ·转膜 | 第18页 |
| ·免疫反应 | 第18-19页 |
| ·化学发光、显影、定影 | 第19页 |
| ·X胶片图像分析 | 第19页 |
| ·流式细胞术检测分析细胞周期的改变情况 | 第19页 |
| ·流式细胞术检测分析细胞凋亡的改变情况 | 第19-20页 |
| ·统计学分析 | 第20-21页 |
| 第4章 结果 | 第21-26页 |
| ·实验组细胞生长曲线的变化 | 第21页 |
| ·实验组细胞生长曲线的变化 | 第21-22页 |
| ·实时荧光定量PCR及WesternbIot分析干扰FAT10后肝癌细胞 Hep3B及M”CH-97h中Bcl-2和Bax表达的变化 | 第22-24页 |
| ·流式细胞术分析细胞周期及凋亡变化 | 第24-26页 |
| 第5章 讨论 | 第26-29页 |
| 第6章 结论 | 第29-30页 |
| 致谢 | 第30-31页 |
| 参考文献 | 第31-33页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第33-34页 |
| 综述 | 第34-39页 |
| 参考文献 | 第38-39页 |
