摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-9页 |
第一章 文献综述 | 第12-18页 |
1.1 葡萄白粉病的研究进展 | 第12-14页 |
1.2 白藜芦醇和芪合成酶基因的研究进展 | 第14-15页 |
1.3 启动子研究进展 | 第15-17页 |
1.4 本研究目的与意义 | 第17-18页 |
第二章 中国野生毛葡萄‘丹凤-2’芪合成酶基因克隆与表达分析 | 第18-37页 |
2.1 材料 | 第18-19页 |
2.1.1 植物材料 | 第18页 |
2.1.2 菌株和载体 | 第18页 |
2.1.3 主要试剂 | 第18页 |
2.1.4 仪器设备 | 第18页 |
2.1.5 引物 | 第18-19页 |
2.2 方法 | 第19-21页 |
2.2.1 采集与处理样品 | 第19页 |
2.2.2 中国野生毛葡萄‘丹凤-2’总RNA提取与三个芪合成酶基因cDNA全长的克隆 | 第19-20页 |
2.2.3 半定量与实时荧光定量PCR分析 | 第20页 |
2.2.4 HPLC测定转基因烟草中芪类物质的含量 | 第20-21页 |
2.3 结果与分析 | 第21-34页 |
2.3.1 VqSTS21、VqSTS30、VqSTS32基因的克隆与序列分析 | 第21-23页 |
2.3.2 VqSTS21、VqSTS30、VqSTS32在 ‘丹凤-2’与‘赤霞珠’不同组织中的表达分析 | 第23-24页 |
2.3.3 VqSTS21、VqSTS30、VqSTS32在不同激素诱导下的表达分析 | 第24-27页 |
2.3.4 VqSTS21、VqSTS30、VqSTS32在不同非生物胁迫处理下的表达分析 | 第27-30页 |
2.3.5 葡萄白粉菌诱导后VqSTS21、VqSTS30、VqSTS32基因的表达分析 | 第30-31页 |
2.3.6 烟草NC89转芪合成酶基因植株的PCR检测 | 第31-33页 |
2.3.7 转基因植株中芪类物质含量的测定 | 第33-34页 |
2.4 讨论 | 第34-37页 |
2.4.1 VqSTS21、VqSTS30、VqSTS32基因的组织表达特异性 | 第34-35页 |
2.4.2 植物激素诱导和不同非生物胁迫处理下VqSTS21、VqSTS30、VqSTS32基因的表达分析 | 第35页 |
2.4.3 白粉病菌诱导后VqSTS21、VqSTS30、VqSTS32基因的表达分析 | 第35-36页 |
2.4.4 转基因植株中芪类物质含量的检测 | 第36-37页 |
第三章 中国野生毛葡萄‘丹凤-2’芪合成酶基因启动子克隆与功能分析 | 第37-49页 |
3.1 材料 | 第37-38页 |
3.1.1 植物材料 | 第37页 |
3.1.2 菌株和载体 | 第37页 |
3.1.3 主要试剂和仪器 | 第37页 |
3.1.4 引物 | 第37-38页 |
3.2 方法 | 第38-41页 |
3.2.1 葡萄体细胞胚的诱导 | 第38页 |
3.2.2 中国野生毛葡萄‘丹凤-2’芪合成酶基因启动子克隆 | 第38-39页 |
3.2.3 植物瞬时表达载体的构建 | 第39页 |
3.2.4 启动子的生物信息学分析 | 第39页 |
3.2.5 农杆菌介导的葡萄叶片与体胚瞬时表达分析 | 第39页 |
3.2.6 GUS组织化学染色 | 第39-40页 |
3.2.7 GUS荧光定量分析 | 第40-41页 |
3.3 结果与分析 | 第41-47页 |
3.3.1 中国野生毛葡萄‘丹凤-2’芪合成酶基因的家族序列分析 | 第41-43页 |
3.3.2 中国野生毛葡萄‘丹凤-2’芪合成酶启动子的序列比对分析 | 第43页 |
3.3.3 中国野生毛葡萄‘丹凤-2’芪合成酶启动子的功能预测分析 | 第43-44页 |
3.3.4 中国野生毛葡萄‘丹凤-2’芪合成酶启动子的表达分析 | 第44-47页 |
3.4 讨论 | 第47-49页 |
全文结论 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-56页 |
致谢 | 第56-57页 |
作者简介 | 第57页 |