首页--生物科学论文--植物学论文--植物细胞遗传学论文--植物基因工程论文

水稻OsGPDH1基因的克隆及功能验证

摘要第5-6页
Abstract第6-7页
1 绪论第10-23页
    1.1 水稻及其面临的生物胁迫与非生物胁迫第10-11页
    1.2 干旱胁迫对植物的影响第11-12页
    1.3 植物对干旱胁迫的调节第12-16页
        1.3.1 气孔调节第12页
        1.3.2 渗透物质以及参与渗透调节的基因第12-14页
        1.3.3 活性氧的清除第14页
        1.3.4 特殊蛋白的保护作用第14-15页
        1.3.5 植物激素的调节第15-16页
    1.4 甘油3磷酸脱氢酶基因的研究进展第16-21页
        1.4.1 甘油3磷酸脱氢酶的分类第16页
        1.4.2 甘油3磷酸脱氢酶的研究进展第16-21页
            1.4.2.1 甘油3磷酸脱氢酶在油脂生物合成过程中的作用第16-18页
            1.4.2.2 甘油3磷酸脱氢酶(GPDH)在生物胁迫中的作用第18-20页
            1.4.2.3 甘油3磷酸脱氢酶(GPDH)在非生物胁迫中的作用第20-21页
    1.5 本研究的目的和意义第21-22页
    1.6 本研究的技术路线第22-23页
2 材料和方法第23-39页
    2.1 材料第23-24页
        2.1.1 水稻材料第23页
        2.1.2 菌株和载体第23页
        2.1.3 实验耗材和仪器第23页
        2.1.4 实验中主要溶液的配制第23-24页
    2.2 方法第24-39页
        2.2.1 GPDH蛋白的生物信息学分析第24-25页
        2.2.2 水稻品种日本晴总RNA提取(TRNzol-A+法)第25-26页
            2.2.2.1 水稻品种日本晴总RNA的提取第25页
            2.2.2.2 总RNA质量的检测方法第25-26页
        2.2.3 反转录合成第一条链cDNA第26页
        2.2.4 引物的设计第26-27页
        2.2.5 荧光定量PCR(qPCR)第27页
        2.2.6 OsGPDH1基因的表达模式分析第27-29页
            2.2.6.1 OsGPDH1的组织表达特性分析第27页
            2.2.6.2 OsGPDH1在不同胁迫及激素处理下的表达模式第27-28页
            2.2.6.3 OsGPDH1在水陆稻的表达情况第28-29页
        2.2.7 OsGPDH1基因的克隆第29页
        2.2.8 凝胶回收OsGPDH1基因片段与TA克隆第29-30页
            2.2.8.1 凝胶回收目标片段第29-30页
            2.2.8.2 PCR平末端产物加A第30页
            2.2.8.3 T-A克隆第30页
        2.2.9 质粒的抽提(TIANprep Mini Plasmid Kit)第30-31页
        2.2.10 OsGPDH1过表达载体的构建第31-32页
        2.2.11 农杆菌转化第32-33页
        2.2.12 农杆菌介导的水稻遗传转化[153]第33-34页
        2.2.13 转基因植株的阳性检测、拷贝数的检测、表达量的检测第34-39页
            2.2.13.1 CTAB小样法抽提DNA第34页
            2.2.13.2 转基因植株的阳性检测第34-35页
            2.2.13.3 转基因植株的拷贝数检测和表达量的检测第35-38页
            2.2.13.4 转基因植株的表达量的检测第38-39页
        2.2.14 转基因植株苗期抗逆试验第39页
            2.2.14.1 转基因植株在高盐胁迫下的萌发试验第39页
            2.2.14.2 转基因植株苗期PEG6000模拟干旱胁迫试验第39页
3 结果第39-48页
    3.1 GPDH蛋白的生物信息学分析第39-40页
    3.2 OsGPDH1基因的表达模式分析第40-43页
        3.2.1 OsGPDH1基因的组织表达特性分析第40-41页
        3.2.2 OsGPDH1基因在不同胁迫及激素处理下的表达模式第41-43页
        3.2.3 OsGPDH1基因在不同水陆稻或籼粳稻中的表达分析第43页
    3.3 OsGPDH1基因的克隆、载体的构建和转基因植株的获得第43-46页
        3.3.1 OsGPDH1基因的克隆第43-44页
        3.3.2 超表达载体的构建第44-45页
        3.3.3 转基因植株的阳性检测第45-46页
    3.4 转基因植株的拷贝数和表达量的检测第46-47页
    3.5 转基因植株在非生物胁迫下的表型鉴定试验第47-48页
        3.5.1 转基因材料在盐胁迫下的萌发率第47页
        3.5.2 转基因植株苗期PEG模拟干旱胁迫试验第47-48页
4 讨论第48-51页
    4.1 挖掘和鉴定抗旱候选基因的必要性第48-49页
    4.2 OsGPDH1基因功能的讨论第49-50页
    4.3 下一步的工作展望第50-51页
5 结论第51-52页
参考文献第52-61页
附录第61-66页
致谢第66页

论文共66页,点击 下载论文
上一篇:安徽省麻疹发病影响因素及控制策略研究
下一篇:CD206、CD68基因单核苷酸多态性及其在巨噬细胞中的表达与肝细胞肝癌发病及预后的关联研究