摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
第一章 绪论 | 第15-25页 |
1.1 引言 | 第15-22页 |
1.1.1 细胞壁的成分 | 第15-16页 |
1.1.2 纤维素合成 | 第16页 |
1.1.3 纤维素合酶CESA基因的结构特征 | 第16-17页 |
1.1.4 纤维素合酶CESA基因的作用方式 | 第17-19页 |
1.1.5 细胞壁合成的转录调控网络模型 | 第19-21页 |
1.1.6 MYB类转录因子 | 第21-22页 |
1.2 研究目的与内容 | 第22-24页 |
1.2.1 研究目的 | 第22-23页 |
1.2.2 研究内容 | 第23-24页 |
1.3 技术路线 | 第24-25页 |
第二章 杨树次生壁CESA基因的表达模式分析 | 第25-44页 |
2.1 实验材料 | 第25-27页 |
2.1.1 植物材料与生长条件 | 第25页 |
2.1.2 菌株和质粒 | 第25页 |
2.1.3 酶和生化试剂 | 第25页 |
2.1.4 常用培养基和缓冲液的配置 | 第25-27页 |
2.2 实验方法 | 第27-37页 |
2.2.1 样品的获取 | 第27-28页 |
2.2.2 PCR扩增目的基因cDNA | 第28-30页 |
2.2.3 基于LUC体系的次生壁CESAs表达载体构建 | 第30-32页 |
2.2.4 PPtCESA::GUS表达载体的构建 | 第32-33页 |
2.2.5 杨树次生壁CESA基因在不同组织中的表达分析 | 第33-34页 |
2.2.6 荧光素酶互补报告体系 | 第34-35页 |
2.2.7 农杆菌介导 84K杨的遗传转化 | 第35-36页 |
2.2.8 GUS染色 | 第36-37页 |
2.2.9 次生壁CESA的激素响应分析 | 第37页 |
2.3 结果与分析 | 第37-44页 |
2.3.1 杨树次生壁CESAs基因的克隆及序列分析 | 第37-39页 |
2.3.2 杨树次生壁CESAs在不同组织及次生维管发育中的表达特征 | 第39页 |
2.3.3 基于启动子驱动 GUS 表达的转基因杨树中次生壁 CESAs 的表达模式 | 第39-41页 |
2.3.4 杨树次生壁 CESAs 对激素的响应 | 第41-42页 |
2.3.5 杨树次生壁 CESAs 间的互作 | 第42-44页 |
第三章 杨树PagMYB216转录因子在纤维素合成中的调控作用 | 第44-77页 |
3.1 实验材料 | 第44页 |
3.2 实验方法 | 第44-56页 |
3.2.1 35S::GFP-PagMYB216瞬时表达载体的构建 | 第44页 |
3.2.2 PptCESA-LUC和pRT107-PagMYB216载体构建 | 第44-45页 |
3.2.3 PagMYB216转录因子 35s超量表达载体及抑制表达载体的构建 | 第45页 |
3.2.4 PagMYB216转录因子在杨树不同组织中表达量分析 | 第45-46页 |
3.2.5 亚细胞定位 | 第46页 |
3.2.6 PagMYB216转录因子的瞬时激活检测体系 | 第46-47页 |
3.2.7 PagMYB216转录因子在超量表达及显性抑制表达转基因植株中的表达分析 | 第47页 |
3.2.8 PagMYB216超量表达和抑制表达转基因植株生长发育指标的测定 | 第47页 |
3.2.9 组织半薄切片 | 第47-48页 |
3.2.10 转基因植株纤维素含量的测定 | 第48页 |
3.2.11 PagMYB216基因的原核表达 | 第48-51页 |
3.2.12 凝胶迁移实验(EMSA) | 第51-54页 |
3.2.13 糖化 | 第54-56页 |
3.3 结果与分析 | 第56-77页 |
3.3.1 OsMYB61调控杨树次生壁CESAs表达 | 第56页 |
3.3.2 杨树PagMYB216基因的克隆与其序列分析 | 第56-58页 |
3.3.3 PagMYB216基因的表达分析 | 第58-59页 |
3.3.4 PagMYB216蛋白的亚细胞定位 | 第59-60页 |
3.3.5 PagMYB216转录因子对杨树次生壁CESAs基因表达的调控分析 | 第60-64页 |
3.3.6 PagMYB216与次生壁CESAs启动子特异结合的EMSA分析 | 第64-69页 |
3.3.7 PagMYB216超表达与显性抑制转基因 84K杨的表达分析与生长指标测定 | 第69-73页 |
3.3.8 PagMYB216超表达与显性抑制转基因 84K杨中次生壁CESAs基因的表达量分析与纤维素含量测定 | 第73-74页 |
3.3.9 PagMYB216超表达与显性抑制转基因 84K杨中糖化率及生物量的测定 | 第74-77页 |
第四章 讨论 | 第77-81页 |
4.1 CESA是纤维素合成的关键基因 | 第77-78页 |
4.2 PagMYB216参与调控纤维素的合成 | 第78-81页 |
4.2.1 PagMYB216与赤霉素途径相关 | 第78-79页 |
4.2.2 PagMYB216同时调控纤维素与木质素合成 | 第79-81页 |
参考文献 | 第81-86页 |
附录 | 第86-88页 |
在读期间的学术研究 | 第88-89页 |
致谢 | 第89页 |