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MYB216调控杨树纤维素合成的机制研究

摘要第5-7页
Abstract第7-8页
第一章 绪论第15-25页
    1.1 引言第15-22页
        1.1.1 细胞壁的成分第15-16页
        1.1.2 纤维素合成第16页
        1.1.3 纤维素合酶CESA基因的结构特征第16-17页
        1.1.4 纤维素合酶CESA基因的作用方式第17-19页
        1.1.5 细胞壁合成的转录调控网络模型第19-21页
        1.1.6 MYB类转录因子第21-22页
    1.2 研究目的与内容第22-24页
        1.2.1 研究目的第22-23页
        1.2.2 研究内容第23-24页
    1.3 技术路线第24-25页
第二章 杨树次生壁CESA基因的表达模式分析第25-44页
    2.1 实验材料第25-27页
        2.1.1 植物材料与生长条件第25页
        2.1.2 菌株和质粒第25页
        2.1.3 酶和生化试剂第25页
        2.1.4 常用培养基和缓冲液的配置第25-27页
    2.2 实验方法第27-37页
        2.2.1 样品的获取第27-28页
        2.2.2 PCR扩增目的基因cDNA第28-30页
        2.2.3 基于LUC体系的次生壁CESAs表达载体构建第30-32页
        2.2.4 PPtCESA::GUS表达载体的构建第32-33页
        2.2.5 杨树次生壁CESA基因在不同组织中的表达分析第33-34页
        2.2.6 荧光素酶互补报告体系第34-35页
        2.2.7 农杆菌介导 84K杨的遗传转化第35-36页
        2.2.8 GUS染色第36-37页
        2.2.9 次生壁CESA的激素响应分析第37页
    2.3 结果与分析第37-44页
        2.3.1 杨树次生壁CESAs基因的克隆及序列分析第37-39页
        2.3.2 杨树次生壁CESAs在不同组织及次生维管发育中的表达特征第39页
        2.3.3 基于启动子驱动 GUS 表达的转基因杨树中次生壁 CESAs 的表达模式第39-41页
        2.3.4 杨树次生壁 CESAs 对激素的响应第41-42页
        2.3.5 杨树次生壁 CESAs 间的互作第42-44页
第三章 杨树PagMYB216转录因子在纤维素合成中的调控作用第44-77页
    3.1 实验材料第44页
    3.2 实验方法第44-56页
        3.2.1 35S::GFP-PagMYB216瞬时表达载体的构建第44页
        3.2.2 PptCESA-LUC和pRT107-PagMYB216载体构建第44-45页
        3.2.3 PagMYB216转录因子 35s超量表达载体及抑制表达载体的构建第45页
        3.2.4 PagMYB216转录因子在杨树不同组织中表达量分析第45-46页
        3.2.5 亚细胞定位第46页
        3.2.6 PagMYB216转录因子的瞬时激活检测体系第46-47页
        3.2.7 PagMYB216转录因子在超量表达及显性抑制表达转基因植株中的表达分析第47页
        3.2.8 PagMYB216超量表达和抑制表达转基因植株生长发育指标的测定第47页
        3.2.9 组织半薄切片第47-48页
        3.2.10 转基因植株纤维素含量的测定第48页
        3.2.11 PagMYB216基因的原核表达第48-51页
        3.2.12 凝胶迁移实验(EMSA)第51-54页
        3.2.13 糖化第54-56页
    3.3 结果与分析第56-77页
        3.3.1 OsMYB61调控杨树次生壁CESAs表达第56页
        3.3.2 杨树PagMYB216基因的克隆与其序列分析第56-58页
        3.3.3 PagMYB216基因的表达分析第58-59页
        3.3.4 PagMYB216蛋白的亚细胞定位第59-60页
        3.3.5 PagMYB216转录因子对杨树次生壁CESAs基因表达的调控分析第60-64页
        3.3.6 PagMYB216与次生壁CESAs启动子特异结合的EMSA分析第64-69页
        3.3.7 PagMYB216超表达与显性抑制转基因 84K杨的表达分析与生长指标测定第69-73页
        3.3.8 PagMYB216超表达与显性抑制转基因 84K杨中次生壁CESAs基因的表达量分析与纤维素含量测定第73-74页
        3.3.9 PagMYB216超表达与显性抑制转基因 84K杨中糖化率及生物量的测定第74-77页
第四章 讨论第77-81页
    4.1 CESA是纤维素合成的关键基因第77-78页
    4.2 PagMYB216参与调控纤维素的合成第78-81页
        4.2.1 PagMYB216与赤霉素途径相关第78-79页
        4.2.2 PagMYB216同时调控纤维素与木质素合成第79-81页
参考文献第81-86页
附录第86-88页
在读期间的学术研究第88-89页
致谢第89页

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