| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 1 引言 | 第10-19页 |
| 1.1 病原学 | 第10-12页 |
| 1.1.1 病毒粒子形态结构 | 第10-11页 |
| 1.1.2 理化特性 | 第11页 |
| 1.1.3 病毒基因组特征 | 第11-12页 |
| 1.1.4 病毒体外培养与增殖特点 | 第12页 |
| 1.2 流行病学 | 第12页 |
| 1.3 临床症状 | 第12-14页 |
| 1.4 致病机理 | 第14页 |
| 1.5 抗病毒免疫和免疫逃避 | 第14-15页 |
| 1.5.1 抗病毒免疫 | 第14-15页 |
| 1.5.2 免疫逃避 | 第15页 |
| 1.6 诊断方法 | 第15-16页 |
| 1.7 疫苗研究 | 第16-17页 |
| 1.7.1 灭活疫苗 | 第16-17页 |
| 1.7.2 弱毒疫苗 | 第17页 |
| 1.7.3 其他疫苗 | 第17页 |
| 1.8 本研究的目的及意义 | 第17-19页 |
| 2 材料与方法 | 第19-29页 |
| 2.1 材料 | 第19-20页 |
| 2.1.1 病毒 | 第19页 |
| 2.1.2 细胞与菌株 | 第19页 |
| 2.1.3 相关试剂 | 第19页 |
| 2.1.4 主要仪器与设备 | 第19页 |
| 2.1.5 培养基与溶液 | 第19-20页 |
| 2.2 方法 | 第20-29页 |
| 2.2.1 引物设计与合成 | 第20-21页 |
| 2.2.2 病毒基因组DNA的提取 | 第21页 |
| 2.2.3 PCR扩增 | 第21-22页 |
| 2.2.4 琼脂糖凝胶电泳 | 第22页 |
| 2.2.5 普通琼脂糖凝胶DNA回收 | 第22-23页 |
| 2.2.6 目的片段与pMD18-T载体的连接转化 | 第23页 |
| 2.2.7 阳性克隆菌的筛选 | 第23页 |
| 2.2.8 重组质粒DNA的提取 | 第23-24页 |
| 2.2.9 重组阳性质粒PCR鉴定 | 第24页 |
| 2.2.10 重组阳性质粒双酶切鉴定 | 第24-25页 |
| 2.2.11 重组阳性质粒测序鉴定 | 第25页 |
| 2.2.12 生物信息学分析 | 第25页 |
| 2.2.13 B2L原核表达载体的构建 | 第25-27页 |
| 2.2.14 重组B2L基因编码蛋白的原核诱导表达 | 第27页 |
| 2.2.15 SDS-PAGE电泳分析 | 第27页 |
| 2.2.16 重组B2L蛋白的原核诱导表达条件优化 | 第27-28页 |
| 2.2.17 B2L蛋白纯化 | 第28页 |
| 2.2.18 重组蛋白Western Blot鉴定 | 第28-29页 |
| 3 结果 | 第29-38页 |
| 3.1 PCR扩增及重组质粒双酶切鉴定结果 | 第29页 |
| 3.2 测序结果 | 第29-30页 |
| 3.3 ORFV/QD/2015株B2L基因核苷酸序列同源性分析 | 第30页 |
| 3.4 ORFV/QD/2015株B2L基因系统进化树分析 | 第30-31页 |
| 3.5 ORFV/QD/2015株B2L基因氨基酸序列同源性分析 | 第31页 |
| 3.6 ORFV/QD/2015株B2L基因编码蛋白的二级结构预测 | 第31-32页 |
| 3.7 ORFV/QD/2015株B2L基因编码蛋白细胞抗原表位参数预测 | 第32-33页 |
| 3.8 ORFV/QD/2015株B2L基因编码的蛋白的三级结构预测 | 第33-34页 |
| 3.9 ORFV/QD/2015株B2L基因编码的蛋白的信号肽预测 | 第34页 |
| 3.10 ORFV/QD/2015株B2L基因编码的蛋白的跨膜结构域预测 | 第34-35页 |
| 3.11 重组表达质粒普通PCR和双酶切鉴定结果 | 第35页 |
| 3.12 重组蛋白SDS-PAGE分析 | 第35-36页 |
| 3.13 重组蛋白纯化 | 第36-37页 |
| 3.14 重组蛋白Western Blot检测 | 第37-38页 |
| 4 讨论 | 第38-40页 |
| 5 结论 | 第40-41页 |
| 致谢 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-46页 |
| 作者简介 | 第46页 |
