摘要 | 第8-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
缩略语 | 第13-14页 |
第一章 文献综述 | 第14-22页 |
1 乳腺癌研究进展 | 第14-16页 |
1.1 乳腺癌现状 | 第14页 |
1.2 乳腺癌检测 | 第14-15页 |
1.2.1 乳腺癌临床影像学检测 | 第14页 |
1.2.2 乳腺癌蛋白标记物检测 | 第14-15页 |
1.2.3 乳腺癌基因检测 | 第15页 |
1.3 乳腺癌治疗 | 第15-16页 |
2 lncRNA研究进展 | 第16-17页 |
2.1 lncRNA简介 | 第16页 |
2.2 MALAT-1 | 第16页 |
2.3 H19 | 第16-17页 |
2.4 GAS5 | 第17页 |
3 miRNA研究进展 | 第17-22页 |
3.1 miRNA简介 | 第17-18页 |
3.2 miRNA与疾病 | 第18-19页 |
3.2.1 miRNA与阿尔兹海默症 | 第18页 |
3.2.2 miRNA与动脉硬化 | 第18-19页 |
3.2.3 miRNA与肥胖 | 第19页 |
3.3 miRNA与乳腺癌 | 第19-20页 |
3.4 Let-7 基因家族研究进展 | 第20-22页 |
3.4.1 Let-7 简介 | 第20页 |
3.4.2 Let-7c-5p与癌症 | 第20-22页 |
第二章 实验方案设计 | 第22-23页 |
1 研究目的与意义 | 第22页 |
2 研究内容 | 第22-23页 |
第三章 材料与方法 | 第23-36页 |
1 材料与试剂 | 第23-27页 |
1.1 实验样本与材料 | 第23页 |
1.2 实验仪器 | 第23-24页 |
1.3 实验主要试剂 | 第24-27页 |
2 方法 | 第27-36页 |
2.1 乳腺癌组织总RNA提取 | 第27-28页 |
2.2 反转录 | 第28页 |
2.3 荧光定量PCR | 第28-29页 |
2.4 细胞实验 | 第29-32页 |
2.4.1 细胞复苏 | 第29页 |
2.4.2 细胞传代 | 第29-30页 |
2.4.3 细胞计数 | 第30页 |
2.4.4 细胞转染 | 第30页 |
2.4.5 MTT实验 | 第30-31页 |
2.4.6 细胞凋亡实验 | 第31页 |
2.4.7 细胞冻存 | 第31-32页 |
2.4.8 细胞总RNA提取 | 第32页 |
2.5 靶基因预测及验证 | 第32-34页 |
2.5.1 靶基因预测 | 第32页 |
2.5.2 重组质粒构建 | 第32-33页 |
2.5.3 双荧光素酶实验 | 第33-34页 |
2.6 蛋白提取与变性 | 第34页 |
2.7 Western blotting | 第34页 |
2.8 统计学分析 | 第34-36页 |
第四章 结果和分析 | 第36-50页 |
1 乳腺癌及癌旁组织中let-7c-5p表达差异分析 | 第36-38页 |
1.1 引物质量分析 | 第36-37页 |
1.2 Let-7c-5p表达差异分析 | 第37-38页 |
2 Let-7c-5p过表达分析 | 第38-40页 |
3 Let-7c-5p对MCF-7 细胞增殖能力的影响 | 第40页 |
4 Let-7c-5p对MCF-7 细胞凋亡影响 | 第40-42页 |
5 Let-7c-5p靶基因预测 | 第42-44页 |
6 Let-7c-5p靶基因验证 | 第44-46页 |
6.1 海肾荧光素酶载体重组与验证 | 第44-46页 |
6.2 双荧光素酶活性分析 | 第46页 |
7 Let-7c-5p对ERCC6蛋白表达的影响 | 第46-48页 |
7.1 蛋白定量分析 | 第46-47页 |
7.2 Western blotting分析 | 第47-48页 |
8 Let-7c-5p对ERCC6 mRNA的影响 | 第48-50页 |
第五章 讨论 | 第50-52页 |
第六章 总结与展望 | 第52-54页 |
参考文献 | 第54-63页 |
研究生学习期间主要成果 | 第63-64页 |
致谢 | 第64页 |