| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 缩略语表 | 第13-15页 |
| 前言 | 第15-17页 |
| 文献回顾 | 第17-27页 |
| 1 癌症 | 第17-21页 |
| 1.1 癌症的定义 | 第17-18页 |
| 1.2 癌症患者的表现特征 | 第18-19页 |
| 1.2.1 生理临床症状 | 第18页 |
| 1.2.2 心理状态特征 | 第18-19页 |
| 1.2.3 社会性反应 | 第19页 |
| 1.3 癌症治疗 | 第19-21页 |
| 1.3.1 癌症治疗的分类 | 第19-21页 |
| 1.3.2 癌症治疗的发展 | 第21页 |
| 2 乳腺癌 | 第21-22页 |
| 3 miRNA | 第22-23页 |
| 3.1 miRNA概述 | 第22-23页 |
| 3.3 miRNA的作用机理 | 第23页 |
| 4 miRNA与乳腺癌 | 第23-25页 |
| 5 小结与展望 | 第25-27页 |
| 第一部分 miR4095p和RSU1在人乳腺癌组织及细胞株中的表达变化 | 第27-43页 |
| 1 材料 | 第27-32页 |
| 1.1 研究对象 | 第27页 |
| 1.1.1 病例来源 | 第27页 |
| 1.1.2 细胞株 | 第27页 |
| 1.2 主要实验试剂 | 第27-29页 |
| 1.3 主要溶液的配制 | 第29-31页 |
| 1.4 主要实验仪器 | 第31-32页 |
| 2 方法 | 第32-36页 |
| 2.1 细胞复苏与传代培养 | 第32页 |
| 2.2 mRNA的提取和实时荧光定量PCR检测表达水平 | 第32-34页 |
| 2.2.1 总RNA提取 | 第32-33页 |
| 2.2.2 反转录试验 | 第33页 |
| 2.2.3 Real-time PCR试验 | 第33-34页 |
| 2.3 蛋白免疫印迹法（Western-Blotting）法测定乳腺癌组织和细胞株RSU1蛋白的含量 | 第34-36页 |
| 2.3.1 乳腺癌组织和细胞株RSU1蛋白提取 | 第34-35页 |
| 2.3.2 BCA法测定蛋白浓度操作步骤 | 第35页 |
| 2.3.3 Western-Blotting | 第35-36页 |
| 2.4 数据分析 | 第36页 |
| 3 结果 | 第36-39页 |
| 3.1 人乳腺癌组织和乳腺癌细胞株中mRNA鉴定 | 第36-37页 |
| 3.2 人乳腺癌组织标本中miR4095p的表达水平 | 第37页 |
| 3.3 人乳腺癌组织标本中RSU1蛋白的表达水平 | 第37-38页 |
| 3.4 人乳腺癌细胞中miR4095p的mRNA表达水平差异 | 第38-39页 |
| 3.5 人乳腺癌细胞中RSU1蛋白的表达水平差异 | 第39页 |
| 4 讨论 | 第39-43页 |
| 第二部分 miR4095p对人乳腺癌细胞生物学行为影响的实验研究 | 第43-61页 |
| 1 材料 | 第43-47页 |
| 1.1 实验细胞 | 第43页 |
| 1.2 主要药品及试剂 | 第43-44页 |
| 1.3 主要仪器 | 第44-45页 |
| 1.4 主要试剂配制 | 第45-47页 |
| 2 方法 | 第47-53页 |
| 2.1 细胞复苏及传代培养 | 第47-48页 |
| 2.2 实时荧光定量PCR实验 | 第48-50页 |
| 2.2.1 总RNA提取 | 第48页 |
| 2.2.2 反转录试验 | 第48-49页 |
| 2.2.3 Real-time PCR试验 | 第49-50页 |
| 2.3 Western blotting实验 | 第50-52页 |
| 2.3.1 乳腺癌组织和细胞株RSU1蛋白提取 | 第50页 |
| 2.3.2 BCA法测定蛋白浓度操作步骤 | 第50-51页 |
| 2.3.3 Western-Blotting | 第51-52页 |
| 2.4 乳腺癌细胞慢病毒转染 | 第52页 |
| 2.5 MTT法测定细胞增殖实验 | 第52-53页 |
| 2.6 迁移实验 | 第53页 |
| 2.7 数据分析 | 第53页 |
| 3 结果 | 第53-58页 |
| 3.1 miR4095p在乳腺癌组织和乳腺癌细胞系均发生上调 | 第53-55页 |
| 3.2 miR4095p下调抑制乳腺癌细胞的增殖和迁移 | 第55-57页 |
| 3.3 miR4095p的下调抑制乳腺癌移植 | 第57-58页 |
| 4 讨论 | 第58-61页 |
| 第三部分 miR4095p调控乳腺癌中RSU1表达的实验研究 | 第61-81页 |
| 1 材料 | 第61-66页 |
| 1.1 实验细胞 | 第61页 |
| 1.2 药品及试剂 | 第61-63页 |
| 1.3 主要实验仪器 | 第63页 |
| 1.4 主要试剂配制 | 第63-66页 |
| 2 方法 | 第66-72页 |
| 2.1 细胞复苏及传代 | 第66-67页 |
| 2.2 实时荧光定量PCR实验 | 第67-69页 |
| 2.2.1 总RNA提取 | 第67页 |
| 2.2.2 反转录试验 | 第67-68页 |
| 2.2.3 Real-time PCR试验 | 第68-69页 |
| 2.3 Western blotting实验 | 第69-71页 |
| 2.3.1 乳腺癌组织和细胞株RSU1蛋白提取 | 第69页 |
| 2.3.2 BCA法测定蛋白浓度操作步骤 | 第69-70页 |
| 2.3.3 Western-Blotting | 第70-71页 |
| 2.4 预测基因质粒的构建 | 第71页 |
| 2.5 转染 | 第71页 |
| 2.6 荧光检测 | 第71页 |
| 2.7 数据分析 | 第71-72页 |
| 3 结果 | 第72-80页 |
| 3.1 RSU1是乳腺癌miR4095p的下游靶基因 | 第72-75页 |
| 3.2 抑制RSU1对乳腺癌mir4095p下调所引起作用起到相反作用 | 第75-80页 |
| 4 讨论 | 第80-81页 |
| 结论 | 第81-83页 |
| 参考文献 | 第83-91页 |
| 个人简历和研究成果 | 第91-93页 |
| 致谢 | 第93页 |
