| 致谢 | 第1-5页 |
| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-31页 |
| 1 石斛中多糖的研究 | 第14-17页 |
| ·多糖的结构 | 第14页 |
| ·多糖含量的影响因素 | 第14-15页 |
| ·石斛多糖的提取方法和提取效率的影响因素 | 第15-16页 |
| ·石斛多糖的药理 | 第16-17页 |
| 2 石斛中生物碱的研究 | 第17-19页 |
| ·石斛属植物中生物碱的种类 | 第17页 |
| ·石斛属植物生物碱的药理作用 | 第17-19页 |
| ·抗肿瘤作用 | 第17-18页 |
| ·对心血管系统的作用 | 第18页 |
| ·对胃肠道的作用 | 第18页 |
| ·止痛退热作用 | 第18页 |
| ·其它作用 | 第18-19页 |
| ·石斛碱的提取和测定方法 | 第19页 |
| 3 β-胡萝卜素 | 第19-20页 |
| ·β-胡萝卜素的药理作用 | 第19-20页 |
| ·β-胡萝卜素的提取和测定方法 | 第20页 |
| 4 其它有效成分 | 第20-21页 |
| 5 药用植物的次生代谢 | 第21-31页 |
| ·次生代谢的意义 | 第21页 |
| ·环境及诱导子对植物次生代谢的调节作用 | 第21-23页 |
| ·次生代谢的诱导作用机制 | 第23-24页 |
| ·几种信号分子的转导机制以及作为诱导子的应用 | 第24-27页 |
| ·水杨酸(SA) | 第24-25页 |
| ·茉莉酸及其衍生物作为诱导子的应用 | 第25-27页 |
| ·一氧化氮(NO)对植物细胞次生代谢产物合成的促进作用 | 第27页 |
| ·信号分子间的相互作用机制 | 第27-29页 |
| ·诱导子与次生代谢物合成有关的关键酶基因的表达 | 第29-31页 |
| ·诱导子对关键酶基因表达的影响 | 第29-30页 |
| ·药用植物代谢关键酶基因研究 | 第30-31页 |
| 第二章 信号分子对金钗石斛组培苗次生代谢产物积累的影响 | 第31-49页 |
| 1 金钗石斛苗的组织培养 | 第31-32页 |
| ·材料 | 第31页 |
| ·实验试剂和仪器 | 第31页 |
| ·药品和试剂 | 第31页 |
| ·仪器 | 第31页 |
| ·培养基及其培养条件 | 第31-32页 |
| ·种子萌发与继代培养基的制作 | 第31页 |
| ·添加信号分子的培养基制作 | 第31-32页 |
| ·接种方法和实验材料的收集 | 第32页 |
| 2 金钗石斛组培苗次生代谢产物的提取和测定 | 第32-42页 |
| ·可溶性总多糖的提取和测定 | 第32-33页 |
| ·仪器和试剂 | 第32页 |
| ·提取和测定 | 第32-33页 |
| ·石斛碱的提取和含量测定 | 第33-39页 |
| ·仪器和试剂 | 第33页 |
| ·石斛碱的提取方法 | 第33页 |
| ·石斛碱的HPLC和GC测定方法比较 | 第33-36页 |
| ·色谱条件 | 第33-34页 |
| ·标准品溶液和样品溶液的制备 | 第34-36页 |
| ·石斛碱标准曲线的制备 | 第36-37页 |
| ·样品中石斛碱的提取和溶液制备 | 第37-38页 |
| ·GC法测定石斛碱含量相关参数实验 | 第38页 |
| ·精密度实验 | 第38页 |
| ·稳定性试验 | 第38页 |
| ·重现性实验 | 第38页 |
| ·加样回收率试验 | 第38页 |
| ·样品的GC测定 | 第38-39页 |
| ·β-胡萝卜素的测定 | 第39-42页 |
| ·仪器和试剂 | 第39页 |
| ·色谱条件 | 第39页 |
| ·标准品溶液的制备 | 第39-41页 |
| ·样品中β-胡萝素的提取和溶液制备 | 第41-42页 |
| ·HPLC法测定β-胡萝素含量的相关参数实验 | 第42页 |
| ·精密度实验 | 第42页 |
| ·稳定性试验 | 第42页 |
| ·重现性实验 | 第42页 |
| ·加样回收率试验 | 第42页 |
| ·样品的测定 | 第42页 |
| 3 利用实时荧光定量RT-PCR检测基因的差异性表达 | 第42-49页 |
| ·材料 | 第43页 |
| ·所需试剂和设备 | 第43页 |
| ·材料的处理 | 第43页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第43-49页 |
| ·实时荧光定量PCR引物的设计与合成 | 第43-44页 |
| ·普通PCR检测引物的可行性 | 第44-48页 |
| ·样品总RNA的提取 | 第44-45页 |
| ·基因组DNA污染的去除 | 第45页 |
| ·RNA电泳检测 | 第45-47页 |
| ·反转录 | 第47页 |
| ·使用各种引物进行普通PCR扩增 | 第47-48页 |
| ·全部材料的总RNA提取及反转录 | 第48页 |
| ·实时荧光定量PCR条件的优化 | 第48页 |
| ·数据统计 | 第48-49页 |
| 第三章 结果分析 | 第49-66页 |
| 1 信号分子对金钗石斛组培苗多糖含量的影响 | 第49-50页 |
| 2 信号分子对金钗石斛组培苗石斛碱含量的影响 | 第50-53页 |
| 3 信号分子对金钗石斛组培苗β-胡萝素含量的影响 | 第53-56页 |
| 4 信号分子处理后金钗石斛基因表达的差异 | 第56-66页 |
| ·普通PCR检测引物可行性结果 | 第56-57页 |
| ·信号分子诱导下几种基因的实时荧光定量PCR结果 | 第57-66页 |
| 第四章 讨论及展望 | 第66-68页 |
| 参考文献 | 第68-77页 |
| 附录1 几种植物常用培养基(MS、B5、N6)的成分表 | 第77-78页 |
| 附录2 MS、B5、N6培养基储备液(母液)的配制表 | 第78-79页 |
| 作者简介 | 第79页 |
