| 摘要 | 第1-8页 |
| 文献综述 | 第8-18页 |
| 1 补体调控蛋白家族研究进展 | 第8-10页 |
| ·补体调控蛋白基本特征 | 第8页 |
| ·含有CCP结构域蛋白质的分类 | 第8-9页 |
| ·CCP结构域的功能 | 第9-10页 |
| 2 红细胞补体受体研究进展 | 第10-15页 |
| ·人红细胞补体受体CR1研究进展 | 第10-14页 |
| ·动物红细胞补体受体CR1研究进展 | 第14-15页 |
| 3 真核表达技术研究进展 | 第15-18页 |
| ·毕赤酵母的表达载体及宿主菌株 | 第16页 |
| ·毕赤酵母表达产物的糖基化及其影响 | 第16-17页 |
| ·CR1与毕赤酵母表达系统 | 第17-18页 |
| 前言 | 第18-19页 |
| 试验材料及方法 | 第19-32页 |
| 1 试验材料 | 第19-20页 |
| ·试验动物、质粒及菌株 | 第19页 |
| ·主要试剂及材料 | 第19页 |
| ·主要仪器 | 第19-20页 |
| 2 相关试剂配制 | 第20-23页 |
| ·普通培养基、试剂配制 | 第20-21页 |
| ·培养毕赤酵母所需培养基、试剂配制 | 第21-22页 |
| ·蛋白纯化所需试剂配制 | 第22-23页 |
| ·Western blotting所需试剂 | 第23页 |
| 3 试验方法 | 第23-32页 |
| ·猪CR1-like基因序列的ORF分析 | 第23页 |
| ·猪CR1-like氨基酸序列生物信息学分析 | 第23-24页 |
| ·猪CR1-like功能区域目的基因的设计及合成 | 第24页 |
| ·获取目的基因 | 第24-25页 |
| ·构建重组表达载体并鉴定 | 第25-26页 |
| ·线性化重组质粒及制备毕赤酵母感受态细胞 | 第26-27页 |
| ·重组蛋白CCP36/CCP811在巴斯德毕赤酵母中的表达 | 第27页 |
| ·SDS-PAGE及Western blotting验证重组蛋白CCP36/CCP811 | 第27-29页 |
| ·重组蛋白CCP36/CCP811多聚体的验证 | 第29-30页 |
| ·重组蛋白CCP36/CCP811免疫活性研究 | 第30-32页 |
| 试验结果 | 第32-45页 |
| 1 猪CR1-like基因序列的分析及合成结果 | 第32-37页 |
| ·猪CR1-like基因序列的ORF分析结果 | 第32页 |
| ·猪CR1-like氨基酸序列生物信息学分析 | 第32-35页 |
| ·猪CR1-like功能区域目的基因的设计及合成 | 第35-37页 |
| 2 目的基因CCP36/CCP811的获得 | 第37页 |
| 3 重组质粒pwPICZalpha-CCP36/CCP811的鉴定结果 | 第37-38页 |
| 4 SDS-PAGE及Western blotting验证重组酵母CCP36/CCP811 | 第38-39页 |
| 5 重组蛋白CCP36/CCP811的纯化 | 第39-42页 |
| ·表达产物经Ni-NTA Resin柱分离纯化结果 | 第39-40页 |
| ·重组蛋白经强阴离子交换柱分离纯化结果 | 第40-41页 |
| ·重组蛋白CCP36/CCP811的浓缩结果 | 第41页 |
| ·重组蛋白CCP36/CCP811的多聚体验证结果 | 第41-42页 |
| 6 重组蛋白活性的验证 | 第42-45页 |
| ·重组蛋白补体结合活性检测结果 | 第42-43页 |
| ·重组蛋白功能的检测结果 | 第43-45页 |
| 分析与讨论 | 第45-49页 |
| 1 猪CR1-like CCP36/CCP811生物信息学分析及真核表达 | 第45-46页 |
| 2 重组猪CR1-like CCP36/CCP811蛋白糖基化现象 | 第46-47页 |
| 3 重组猪CR1-like CCP36/CCP811蛋白功能活性 | 第47-49页 |
| 全文结论 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-57页 |
| Abstract | 第57-59页 |
| 致谢 | 第59-61页 |
| 附录 | 第61-92页 |
