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玉米螟生防工程菌株构建的研究

中文摘要第1-3页
Abstract第3-5页
目录第5-9页
第1章 绪论第9-18页
   ·玉米螟危害及防治概述第9页
   ·植物的诱导防御第9-11页
     ·防御相关基因的诱导表达第10页
     ·诱导植物次生代谢产物含量增加第10页
     ·诱导防御蛋白的积累第10-11页
     ·相关信号途径的诱导激活第11页
   ·植物与昆虫互作研究概述第11-14页
     ·植物与昆虫互作基因水平研究概述第11-13页
     ·植物与昆虫互作蛋白质组学水平研究进展第13-14页
   ·昆虫解毒酶系研究概述第14-16页
   ·害虫生防工程菌株研究应用概述第16-17页
   ·本研究目的与意义第17-18页
第2章 外源MJA处理对玉米叶片丁布含量及亚洲玉米螟生长发育的影响第18-27页
   ·材料与方法第18-21页
     ·供试材料第18页
     ·主要试剂及仪器第18-19页
     ·玉米幼苗培养及外源MJA处理第19-20页
     ·外源MJA处理后玉米叶片中丁布含量的测定第20页
     ·MJA诱导玉米后对亚洲玉米螟生长发育和繁殖影响的测定第20页
     ·MJA诱导玉米后对亚洲玉米螟幼虫体重及蛹重的影响第20页
     ·外源MJA诱导处理后亚洲玉米螟生命表构建第20-21页
     ·数据统计与分析第21页
   ·结果与分析第21-25页
     ·丁布标准样品的提取及检测第21页
     ·不同品种玉米经外源MJA处理后丁布含量的测定第21-22页
     ·MJA诱导处理后亚洲玉米螟的生物活性测定第22-23页
     ·MJA诱导处理对亚洲玉米螟幼虫发育历期的影响第23页
     ·MJA诱导处理对亚洲玉米螟成虫寿命及产卵量的影响第23-24页
     ·MJA诱导对亚洲玉米螟幼虫体重及蛹重的影响第24-25页
     ·225μmol/L MJA处理对亚洲玉米螟次代种群生命表参数影响第25页
   ·本章小结第25-27页
第3章 玉米叶片响应MJA处理后蛋白质组学分析第27-46页
   ·材料与方法第28-33页
     ·植物材料及处理第28页
     ·主要试剂及仪器第28-29页
     ·实验所需常用溶液及试剂的配制第29-30页
     ·玉米叶片总蛋白提取及定量第30页
     ·蛋白样品双向电泳及软件分析第30-31页
     ·差异表达蛋白点的质谱鉴定及数据处理第31页
     ·防御蛋白编码基因克隆第31-32页
     ·荧光定量PCR(Quantitativ6-Real Time PCR)第32-33页
   ·结果与分析第33-44页
     ·玉米叶片蛋白提取、定量和SDS-PAGE蛋白谱分析第33-35页
     ·不同处理条件下玉米叶片蛋白双向电泳分析第35-36页
     ·差异蛋白点nano ESI MS/MS鉴定第36-40页
     ·差异表达蛋白的功能分析第40-41页
     ·几个重要植物防御相关蛋白基因的克隆与序列测定第41-43页
     ·编码防御相关蛋白基因的qRT-PCR分析第43-44页
   ·本章小结第44-46页
第4章 玉米防御蛋白基因原核表达载体构建及亚洲玉米螟生物学活性测定第46-52页
   ·材料与方法第46-47页
     ·供试植物与昆虫第46页
     ·主要试剂及仪器第46-47页
     ·玉米防御蛋白编码基因原核表达载体构建第47页
     ·融合蛋白诱导表达第47页
     ·亚洲玉米螟生物学活性测定第47页
   ·结果与分析第47-51页
     ·防御蛋白编码基因原核表达载体构建及酶切验证第47-49页
     ·融合蛋白诱导表达及SDS-PAGE验证第49-50页
     ·融合蛋白对亚洲玉米螟生长发育的影响第50-51页
   ·本章小结第51-52页
第5章 亚洲玉米螟GST RNAi生防工程菌株构建第52-76页
   ·材料与方法第53-59页
     ·供试昆虫第53页
     ·主要试剂及仪器第53页
     ·主要使用试剂的配制方法第53-54页
     ·亚洲玉米螟OfGST基因的克隆与生物信息学分析第54-55页
     ·亚洲玉米螟OfGST基因原核表达载体构建第55-56页
     ·多克隆抗体制备与检测第56页
     ·Western blot检测第56-57页
     ·亚洲玉米螟OfGST RNAi工程菌株的构建第57-59页
   ·结果与分析第59-74页
     ·亚洲玉米螟幼虫中肠总RNA的提取、鉴定及cDNA合成第59页
     ·亚洲玉米螟谷胱甘肽-S-转移酶基因(OfGST)全长序列获得第59-62页
     ·亚洲玉米螟OfGST基因生物信息学分析第62-67页
     ·pET28a-OfGST重组表达载体的构建第67-68页
     ·pET28a-OfGST的原核诱导表达及蛋白纯化第68-69页
     ·多克隆抗体的制备与ELASA检测第69-70页
     ·Western Blot分析第70页
     ·构建表达dsRNA的重组载体L4440-OfGST第70-73页
     ·饲喂法RNAi效果检测第73-74页
   ·本章小结第74-76页
第六章 讨论第76-85页
   ·MJA诱导玉米抗性对丁布含量及亚洲玉米螟生长发育的影响第76-78页
   ·玉米叶片响应MJA处理的蛋白质组学分析第78-79页
   ·防御蛋白基因原核表达载体构建及亚洲玉米螟生物学活性测定第79-82页
   ·亚洲玉米螟OfGST基因克隆及其生防工程菌株的构建第82-85页
第七章 结论第85-87页
参考文献第87-99页
致谢第99-101页
攻读学位期间发表的学术论文第101-102页

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