中文摘要 | 第1-3页 |
Abstract | 第3-5页 |
目录 | 第5-9页 |
第1章 绪论 | 第9-18页 |
·玉米螟危害及防治概述 | 第9页 |
·植物的诱导防御 | 第9-11页 |
·防御相关基因的诱导表达 | 第10页 |
·诱导植物次生代谢产物含量增加 | 第10页 |
·诱导防御蛋白的积累 | 第10-11页 |
·相关信号途径的诱导激活 | 第11页 |
·植物与昆虫互作研究概述 | 第11-14页 |
·植物与昆虫互作基因水平研究概述 | 第11-13页 |
·植物与昆虫互作蛋白质组学水平研究进展 | 第13-14页 |
·昆虫解毒酶系研究概述 | 第14-16页 |
·害虫生防工程菌株研究应用概述 | 第16-17页 |
·本研究目的与意义 | 第17-18页 |
第2章 外源MJA处理对玉米叶片丁布含量及亚洲玉米螟生长发育的影响 | 第18-27页 |
·材料与方法 | 第18-21页 |
·供试材料 | 第18页 |
·主要试剂及仪器 | 第18-19页 |
·玉米幼苗培养及外源MJA处理 | 第19-20页 |
·外源MJA处理后玉米叶片中丁布含量的测定 | 第20页 |
·MJA诱导玉米后对亚洲玉米螟生长发育和繁殖影响的测定 | 第20页 |
·MJA诱导玉米后对亚洲玉米螟幼虫体重及蛹重的影响 | 第20页 |
·外源MJA诱导处理后亚洲玉米螟生命表构建 | 第20-21页 |
·数据统计与分析 | 第21页 |
·结果与分析 | 第21-25页 |
·丁布标准样品的提取及检测 | 第21页 |
·不同品种玉米经外源MJA处理后丁布含量的测定 | 第21-22页 |
·MJA诱导处理后亚洲玉米螟的生物活性测定 | 第22-23页 |
·MJA诱导处理对亚洲玉米螟幼虫发育历期的影响 | 第23页 |
·MJA诱导处理对亚洲玉米螟成虫寿命及产卵量的影响 | 第23-24页 |
·MJA诱导对亚洲玉米螟幼虫体重及蛹重的影响 | 第24-25页 |
·225μmol/L MJA处理对亚洲玉米螟次代种群生命表参数影响 | 第25页 |
·本章小结 | 第25-27页 |
第3章 玉米叶片响应MJA处理后蛋白质组学分析 | 第27-46页 |
·材料与方法 | 第28-33页 |
·植物材料及处理 | 第28页 |
·主要试剂及仪器 | 第28-29页 |
·实验所需常用溶液及试剂的配制 | 第29-30页 |
·玉米叶片总蛋白提取及定量 | 第30页 |
·蛋白样品双向电泳及软件分析 | 第30-31页 |
·差异表达蛋白点的质谱鉴定及数据处理 | 第31页 |
·防御蛋白编码基因克隆 | 第31-32页 |
·荧光定量PCR(Quantitativ6-Real Time PCR) | 第32-33页 |
·结果与分析 | 第33-44页 |
·玉米叶片蛋白提取、定量和SDS-PAGE蛋白谱分析 | 第33-35页 |
·不同处理条件下玉米叶片蛋白双向电泳分析 | 第35-36页 |
·差异蛋白点nano ESI MS/MS鉴定 | 第36-40页 |
·差异表达蛋白的功能分析 | 第40-41页 |
·几个重要植物防御相关蛋白基因的克隆与序列测定 | 第41-43页 |
·编码防御相关蛋白基因的qRT-PCR分析 | 第43-44页 |
·本章小结 | 第44-46页 |
第4章 玉米防御蛋白基因原核表达载体构建及亚洲玉米螟生物学活性测定 | 第46-52页 |
·材料与方法 | 第46-47页 |
·供试植物与昆虫 | 第46页 |
·主要试剂及仪器 | 第46-47页 |
·玉米防御蛋白编码基因原核表达载体构建 | 第47页 |
·融合蛋白诱导表达 | 第47页 |
·亚洲玉米螟生物学活性测定 | 第47页 |
·结果与分析 | 第47-51页 |
·防御蛋白编码基因原核表达载体构建及酶切验证 | 第47-49页 |
·融合蛋白诱导表达及SDS-PAGE验证 | 第49-50页 |
·融合蛋白对亚洲玉米螟生长发育的影响 | 第50-51页 |
·本章小结 | 第51-52页 |
第5章 亚洲玉米螟GST RNAi生防工程菌株构建 | 第52-76页 |
·材料与方法 | 第53-59页 |
·供试昆虫 | 第53页 |
·主要试剂及仪器 | 第53页 |
·主要使用试剂的配制方法 | 第53-54页 |
·亚洲玉米螟OfGST基因的克隆与生物信息学分析 | 第54-55页 |
·亚洲玉米螟OfGST基因原核表达载体构建 | 第55-56页 |
·多克隆抗体制备与检测 | 第56页 |
·Western blot检测 | 第56-57页 |
·亚洲玉米螟OfGST RNAi工程菌株的构建 | 第57-59页 |
·结果与分析 | 第59-74页 |
·亚洲玉米螟幼虫中肠总RNA的提取、鉴定及cDNA合成 | 第59页 |
·亚洲玉米螟谷胱甘肽-S-转移酶基因(OfGST)全长序列获得 | 第59-62页 |
·亚洲玉米螟OfGST基因生物信息学分析 | 第62-67页 |
·pET28a-OfGST重组表达载体的构建 | 第67-68页 |
·pET28a-OfGST的原核诱导表达及蛋白纯化 | 第68-69页 |
·多克隆抗体的制备与ELASA检测 | 第69-70页 |
·Western Blot分析 | 第70页 |
·构建表达dsRNA的重组载体L4440-OfGST | 第70-73页 |
·饲喂法RNAi效果检测 | 第73-74页 |
·本章小结 | 第74-76页 |
第六章 讨论 | 第76-85页 |
·MJA诱导玉米抗性对丁布含量及亚洲玉米螟生长发育的影响 | 第76-78页 |
·玉米叶片响应MJA处理的蛋白质组学分析 | 第78-79页 |
·防御蛋白基因原核表达载体构建及亚洲玉米螟生物学活性测定 | 第79-82页 |
·亚洲玉米螟OfGST基因克隆及其生防工程菌株的构建 | 第82-85页 |
第七章 结论 | 第85-87页 |
参考文献 | 第87-99页 |
致谢 | 第99-101页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第101-102页 |