摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-13页 |
英文缩略词表 | 第13-15页 |
引言 | 第15-17页 |
第一部分 绪论 | 第17-30页 |
1.研究的思路、目的和意义 | 第17-19页 |
2.研究进展与发展趋势 | 第19-27页 |
3.中医理论依据与现代医学理论依据 | 第27-30页 |
第二部分 TUA通过下调NF-κB表达抑制肺癌细胞株NCI-H460增殖研究 | 第30-66页 |
1.前言 | 第30-31页 |
2.材料与方法 | 第31-46页 |
·药品(试剂)、仪器和实验动物 | 第31-33页 |
·细胞培养及处理 | 第33页 |
·乳酸脱氢酶 (LDH) 分析 | 第33-34页 |
·5-溴脱氧尿嘧啶核苷(Brd U)测定 | 第34页 |
·细胞活力检测(CCK-8 检测) | 第34-35页 |
·细胞凋亡分析 | 第35页 |
·细胞周期检测 | 第35-36页 |
·实时定量PCR(RT- PCR)检测细胞凋亡相关基因 | 第36-38页 |
·Western Blot分析凋亡相关蛋白 | 第38-41页 |
·EMSA法检测NF-kB结合活性 | 第41-43页 |
·免疫细胞化学染色观察NF-kB、IkBa表达 | 第43页 |
·体内抗肿瘤实验 | 第43-46页 |
·统计分析 | 第46页 |
3.结果与分析 | 第46-62页 |
·细胞毒性LDH释放和CCK-8 细胞活性分析结果 | 第46页 |
·Brd U测定细胞增殖结果 | 第46-48页 |
·流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期结果 | 第48-51页 |
·q RT-PCR检测与凋亡相关基因结果 | 第51页 |
·Western Blot检测TUA对NF-κB相关蛋白表达 | 第51-53页 |
·EMSA法检测NF-kB-DNA结合活性结果 | 第53-55页 |
·免疫细胞化学染色(ICC)测定NF-kB、IkBa表达结果 | 第55-57页 |
·体内动物实验结果 | 第57-62页 |
4.讨论 | 第62-66页 |
第三部分 TUA诱导宫颈癌He La细胞凋亡及其机制初步研究 | 第66-82页 |
1.材料 | 第66-67页 |
2.实验方法 | 第67-73页 |
·细胞培养 | 第67页 |
·细胞活力检测(CCK-8 检测) | 第67-68页 |
·乳酸脱氢酶(LDH)测定 | 第68-69页 |
·5-溴脱氧尿嘧啶核苷(Brd U)测定 | 第69-70页 |
·不同实验IC50值的比较 | 第70-71页 |
·4’,6-二脒基2苯基吲哚(DAPI)核染色 | 第71页 |
·半胱胺酸蛋白酶-3/ 7(Caspase-3/7)的活性测定 | 第71-72页 |
·NF-κB p65的转录因子检测 | 第72-73页 |
·统计分析 | 第73页 |
3.结果与分析 | 第73-79页 |
·细胞毒性LDH释放和CCK-8 细胞活性分析结果 | 第73-75页 |
·Brd U测定结果 | 第75-76页 |
·不同实验IC50值的对比 | 第76页 |
·形态学变化 | 第76-77页 |
·Caspase-3/7 的活性测定结果 | 第77-78页 |
·NF-κB活性测定结果 | 第78-79页 |
4.小结与讨论 | 第79-82页 |
第四部分 结论 | 第82-83页 |
致谢 | 第83-84页 |
参考文献 | 第84-94页 |
综述 作用于NF-kB信号通路的抗肿瘤中药研究概况 | 第94-107页 |
参考文献 | 第102-107页 |
攻读博士学位期间主要研究成果 | 第107-108页 |
附录:TUA结构鉴定相关图谱 | 第108-111页 |